茅蒼術(shù)水提物中6種單體化合物對(duì)雷公藤內(nèi)酯醇減毒增效研究.pdf

1、雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide,TP)，是從植物雷公藤(Tripterygium wilfordii Hook F)中提取的環(huán)氧二萜內(nèi)酯類化合物，具有抗癌、抗老年癡呆、抗類風(fēng)濕及抗炎免疫抑制等作用。但是，研究發(fā)現(xiàn)TP的有效劑量與中毒劑量極為相近，這大大的限制了其臨床使用。因此，如何減少TP所致毒性并保持其良好的藥理作用，成為近年來(lái)研究的一大熱點(diǎn)。
　　茅蒼術(shù)為菊科植物茅蒼術(shù)Atractylodes lancea(Thunb.)

2、DC.的干燥根莖，具有抗炎、抗腫瘤、保肝等藥理作用。前期實(shí)驗(yàn)證明茅蒼術(shù)水提物可誘導(dǎo)CYP3A蛋白表達(dá)，且與TP聯(lián)用后達(dá)到減毒增效作用。為進(jìn)一步分析其中何種活性成分發(fā)揮減毒增效作用，本論文選取了水提物中方便獲得，并且量足以進(jìn)行動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的6種單體化合物（蒼術(shù)苷A、香草酸、丁香酸、原兒茶酸、原兒茶醛、檸檬苦素），研究其對(duì)細(xì)胞色素P450主要亞型的影響，及其與TP聯(lián)用能否達(dá)到減毒增效的作用，為后期實(shí)驗(yàn)研究提供數(shù)據(jù)支撐。主要的研究?jī)?nèi)容及結(jié)論如下：

3、
　　1.茅蒼術(shù)水提物中6種單體化合物的選擇及其對(duì)C57BL/6小鼠毒性采用UPLC-QTOF/MS技術(shù)將水提物中6種單體化合物與茅蒼術(shù)水提物進(jìn)行比對(duì)，結(jié)果顯示6種單體化合物均存在于茅蒼術(shù)水提物中。隨后，測(cè)定了6種單體化合物對(duì)C57BL/6小鼠的毒性，與正常對(duì)照組相比，血清生化指標(biāo)ALT、AST、BUN和GSH無(wú)顯著性差異；臟器指數(shù)無(wú)顯著變化；病理組織切片未見(jiàn)明顯病變。結(jié)果表明測(cè)試劑量的6種化合物無(wú)毒。
　　2.茅蒼術(shù)水提物

4、中6種單體化合物對(duì)細(xì)胞色素P450主要亞型表達(dá)的影響Western blot結(jié)果顯示，蒼術(shù)苷A可顯著誘導(dǎo)CYP3A、CYP1A2、CYP2C和CYP2E1的蛋白表達(dá)；香草酸可顯著誘導(dǎo)CYP3A、CYP1A2和CYP2D的蛋白表達(dá)；丁香酸可顯著誘導(dǎo)CYP3A、CYP1A1、CYP1A2、CYP2D和CYP2E1的蛋白表達(dá)；原兒茶酸可顯著誘導(dǎo)CYP1A1、CYP1A2、CYP2B和CYP2E1的蛋白表達(dá)；原兒茶醛可顯著誘導(dǎo) CYP3A、CY

5、P1A2、CYP2B和 CYP2C的蛋白表達(dá)；檸檬苦素可顯著誘導(dǎo)CYP3A、CYP1A1、CYP1A2、CYP2A、CYP2D和CYP2E1的蛋白表達(dá)。RT-PCR結(jié)果顯示，蒼術(shù)苷A、檸檬苦素可顯著上調(diào)Cyp3a11、Cyp1a2的mRNA水平；香草酸、丁香酸、原兒茶醛可顯著上調(diào)Cyp3a11的mRNA水平；原兒茶酸可顯著上調(diào)Cyp1a2的mRNA水平。
　　3.茅蒼術(shù)水提物中6種單體化合物對(duì)C57BL/6小鼠體內(nèi)雷公藤內(nèi)酯醇（T

6、P）的解毒作用6種單體化合物與TP聯(lián)合給藥C57BL/6小鼠，研究結(jié)果顯示，與正常對(duì)照組相比，TP單用組小鼠肝臟、腎臟、脾臟和睪丸均有損傷，且聯(lián)合給藥組無(wú)顯著性差異，提示6種單體化合物對(duì)TP所致?lián)p傷有較好的保護(hù)作用。但是，茅蒼術(shù)水提物與TP聯(lián)合給藥的解毒效果優(yōu)于單體化合物。
　　4.茅蒼術(shù)水提物中6種單體化合物抗炎作用及其與雷公藤內(nèi)酯醇（TP）聯(lián)用抗炎增效作用實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，與正常對(duì)照組比較，6種單體化合物作用后，小鼠耳腫脹度明顯降