雷公藤內酯醇對腎臟系膜細胞NF-κB通路作用及其機制研究.pdf

1、目的：以體外培養(yǎng)的正常大鼠系膜細胞為對象，以TNF-α為刺激因子，觀察不同濃度雷公藤內酯醇對腫瘤壞死因子(TNF-α)介導的腎小球系膜細胞(GMC)核因子-κB(NF-κB)活化、抑制蛋白IκB及單核細胞趨化因子-1(MCP-1)、細胞間粘附分子-1（ICAM-1）表達的影響，研究TNF-α- NF-κB/I-κB–MCP-1的通路蛋白表達水平。探討雷公藤內酯醇在抑制腎小球系膜細胞炎癥因子表達及抗炎作用可能的機制。
　　方法：培養(yǎng)

2、大鼠GMC株，用10ul/L TNF-α刺激GMC，將培養(yǎng)的大鼠GMC隨機分為6組：正常培養(yǎng)對照組、TNF-α刺激組、TNF-α加NF-κB抑制劑吡咯烷二硫代氨基甲酸鹽(PDTC)、TNF-α和3種不同濃度的雷公藤內酯醇共孵育組。分別采用酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)及新型凝膠蛋白遷移率法(EMSA)結合ELISA法，檢測GMC核內NF-κBp65活化率，細胞培養(yǎng)上清液中MCP-1水平，GMC質內IκB表達水平及三者可能存在的通路。

3、>　　結果:
　　⑴：TNF-α能明顯上調了MCP-1及ICAM-1的表達，且明顯增高細胞核內NF-κB、顯著降低細胞質內I-κB的蛋白含量，P<0.01。
　?、疲豪坠賰弱ゴ硷@著抑制了GMC分泌MCP-1、ICAM-1水平，P<0.01；雷公藤內酯醇、NF-κB抑制劑PDTC均能明顯下調細胞核內NF-κB、MCP-1、ICAM-1蛋白的表達P<0.01，且對I-κB亦有抑制其磷酸化的作用P<0.05。
　　結論：實

4、驗表明TNF-α可激活IκBα，使其發(fā)生磷酸化，通過激活NF-κB誘導MCP-1、ICAM-1分泌，促進腎臟炎癥進展。雷公藤內酯醇可下調TNF-α介導的大鼠GMC內NF-κBp65、MCP-1、ICAM-1水平，抑制TNF-α誘導的大鼠GMC內IκB蛋白磷酸化水解。
　　提示：雷公藤內酯醇通過抑制TNF-α誘導的大鼠GMCIκB的磷酸化，降解影響NF-κB活化；抑制TNF-α誘導的大鼠GMC的MCP-1、ICAM-1分泌，可能通過