雷公藤內(nèi)酯醇在大鼠體內(nèi)藥代動力學及組織分布研究.pdf

1、雷公藤內(nèi)酯醇(triptolide，TPL)，又稱雷公藤內(nèi)酯、雷公藤甲素，是從衛(wèi)矛科雷公藤屬植物雷公藤(Tripterygium wilfoidiiHook．F)，昆明山海棠[(T.Hy-poglaucum Levl.)Hukeda．又名黑麥]，以及蒼山雷公藤(T.Forretii Dials)、東北雷公藤(T.RegeliSp ragueet Ta keta)等植物中分離出來的一種含有3個環(huán)氧基的二萜內(nèi)酯化合物。純品為無色晶體，無嗅無

2、味，性質(zhì)穩(wěn)定。雷公藤內(nèi)酯醇具有潛在的抗腫瘤，免疫抑制，抗炎癥等作用，可應(yīng)用于許多自身免疫性疾病的治療。近年來，國內(nèi)外研究雷公藤內(nèi)酯醇抗腫瘤機制方面的文獻眾多，特別是腹腔注射和靜脈注射給藥途徑已有文獻明確表明該藥抗實體瘤的良好效果。預(yù)示該藥具有進一步開發(fā)成治療某些腫瘤的良好前景。 目的及內(nèi)容：本實驗作為雷公藤內(nèi)酯醇新藥開發(fā)的一部分，目的在于建立檢測大鼠生物樣品中雷公藤內(nèi)酯醇濃度的方法，并運用該方法研究大鼠靜脈注射雷公藤內(nèi)酯醇后的藥

3、代動力學和組織分布規(guī)律，為進一步對動物進行藥理學和毒理學研究，以及為臨床合理用藥的安全性和有效性(最佳藥物劑量、給藥途徑、給藥間隔時間和劑型)提供參考依據(jù)。實驗分為兩個部分：(1)雷公藤內(nèi)酯醇在大鼠體內(nèi)的藥代動力學研究，(2)雷公藤內(nèi)酯醇在大鼠體內(nèi)的組織分布研究。 方法：HPLC法以C<,18>色譜柱(Zorbax eclipse XDB C18，5 um，150 mm×4.6 mm i.d)為固定相，以77％水和23％的乙腈為

4、流動相，流速：1.0 ml/min。柱溫：40℃。紫外檢測波長為217～221nm。取大鼠血漿或組織勻漿，加入一定體積的乙酸乙酯，旋渦混勻后離心，按一定比例吸取上清液。將上清液置于60℃氮氣揮干儀上揮干，流動相溶解殘渣，過濾后進樣。選用SD大鼠經(jīng)尾靜脈注射不同劑量雷公藤內(nèi)酯醇后于不同時間點經(jīng)斷尾處采血，通過分析藥代動力血參數(shù)，探討該藥在體內(nèi)的代謝規(guī)律。并以藥代結(jié)果設(shè)計分布實驗，經(jīng)大鼠尾靜脈注射有效劑量雷公藤內(nèi)酯醇后，于設(shè)計時間點采集大鼠

5、的各臟器組織，通過比較各組織的雷公藤內(nèi)酯醇濃度，探討該藥注射給藥后在大鼠體內(nèi)的分布情況。 結(jié)果：在上述條件下，生物樣品中的雷公藤內(nèi)酯醇峰形良好，血漿中雷公藤內(nèi)酯醇的最低檢測低限為0.01μg/ml。血漿樣品提取回收率可達85.9％，組織樣品提取回收率可達60～75％。同內(nèi)和同間差異RSD均小于15％。各生物樣品中雷公藤內(nèi)酯醇的濃度與峰面積線性關(guān)系良好，r值均大于0.9989。大鼠尾靜脈分別注射三個劑量(100μg/kg、200μ

6、g/kg、300μg/kg)雷公藤內(nèi)酯醇后，各劑量組相對應(yīng)的t<,1/2α>分別為：0.033、0.021、0.026 h，t<,1/2β>分別為：0.753，0.630，0.574 h；AUC與給藥劑量成正相關(guān)；動力學過程符合線性動力學特征，房室模型為二室模型。大鼠尾靜脈注射有效劑量(200 μg/kg)雷公藤內(nèi)酯醇后，組織分布迅速而廣泛，給藥5min后藥物含量以肺組織最高，肝臟、腎臟的濃度也較高，其次依次為心、腦、脾、小腸、生殖腺、

7、骨骼肌、胃。給藥后15min各組織藥物濃度均下降，在肺、腎、心、肝的濃度較高，其余分布次序與給藥5min后基本相同。給藥后lh各組織藥物濃度下降明顯，在肝和小腸仍維持較高藥物濃度。 結(jié)論：本實驗建立了一種良好的HPLC方法用于測定大鼠生物樣本中雷公藤內(nèi)酯醇的濃度，本分析方法靈敏準確、重復(fù)性好、可信性高、簡便且易于推廣，能滿足藥物在大鼠體內(nèi)的藥代動力學和組織分布的研究。雷公藤內(nèi)酯醇在大鼠體內(nèi)的藥代動力學過程符合二室模型特征。在大鼠