人胚胎干細(xì)胞向神經(jīng)前體細(xì)胞誘導(dǎo)分化的研究.pdf

1、人胚胎干細(xì)胞的研究與人類的健康和醫(yī)學(xué)有著密切的關(guān)系,利用胚胎干細(xì)胞的多分化潛能對受損和退化的細(xì)胞或組織進(jìn)行修補(bǔ),有希望為神經(jīng)系統(tǒng)疾病細(xì)胞替代性治療提供理想的細(xì)胞來源,有利于深入研究體外條件下定向誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞分化為神經(jīng)種系細(xì)胞的調(diào)控機(jī)理。本研究包括二方面工作:(一)利用臨床體外受精多余的囊胚建立人胚胎干細(xì)胞系。用鏈蛋白酶消化去除囊胚的透明帶,然后直接機(jī)械分離出內(nèi)細(xì)胞團(tuán),接種到小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層上,在hES細(xì)胞培養(yǎng)液中進(jìn)行培養(yǎng),成功

2、建立人胚胎干細(xì)胞系并命名為H14;通過對人胚胎干細(xì)胞系H14的特征進(jìn)行鑒定,發(fā)現(xiàn)其應(yīng)具備的干細(xì)胞特征:自我更新能力、多向分化潛能和核型正常等。(二)建立人胚胎干細(xì)胞系H14之后,我們開展了人胚胎干細(xì)胞體外定向誘導(dǎo)分化為神經(jīng)前體細(xì)胞的研究。通過實(shí)驗(yàn)比較了bFGF和Noggin兩種生長因子對人胚胎干細(xì)胞系H14體外誘導(dǎo)分化為神經(jīng)前體細(xì)胞的效率的差異,并利用細(xì)胞免疫熒光染色和RT-PCR進(jìn)行了相關(guān)鑒定。結(jié)果提示人胚胎干細(xì)胞分化所得到的神經(jīng)前體