GM-CSF對(duì)肥大細(xì)胞蛋白酶激活受體表達(dá)和介質(zhì)分泌的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路探討.pdf

1、分類(lèi)號(hào)R392汕頭大學(xué)碩士學(xué)位論文題目GMCSF對(duì)肥大細(xì)胞蛋白酶激活受體表達(dá)和介質(zhì)分泌的影響及其信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路探討英文題目ModulationofMastCellProteinaseActivatedReceptExpressionCytokineReleasebyGMCSFthePotentialSignalTransductionPathways研究生姓名張連霞張連霞學(xué)號(hào)1051002210510022專(zhuān)業(yè)病理學(xué)與病理生理學(xué)病理學(xué)與病

2、理生理學(xué)導(dǎo)師姓名何韶衡何韶衡職稱(chēng)“長(zhǎng)江學(xué)者”特聘教授“長(zhǎng)江學(xué)者”特聘教授入學(xué)日期2005年9月2005年9月答辯日期2008年6月2008年6月汕頭大學(xué)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文摘要背景與目的：蛋白酶激活受體（proteaseactivatedrecepts，PARs），白細(xì)胞介素（interleukin，IL）IL4，IL6參與過(guò)敏反應(yīng)的發(fā)生，粒巨噬細(xì)胞集落刺激因子（granulocytemacrophagecolonystimulating

3、fact，GMCSF）具有調(diào)節(jié)免疫應(yīng)答的功能，然而GMCSF對(duì)肥大細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響還不甚清楚。因此本研究探討GMCSF對(duì)肥大細(xì)胞P815PARs表達(dá)和IL4，IL6分泌的影響，并探討可能的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路。方法：肥大細(xì)胞P815激發(fā)后，收集各時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞和上清。細(xì)胞處理后采用實(shí)時(shí)定量PCR和流式細(xì)胞術(shù)的方法在mRNA和蛋白水平檢測(cè)PAR1，PAR2，PAR3和PAR4表達(dá)情況，用細(xì)胞激發(fā)信號(hào)ELISA（cellularactivati

4、onofsignalingELISACASE）方法檢測(cè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路蛋白Akt，ERK，p38和STAT3磷酸化情況；上清用ELISA方法檢測(cè)IL4，IL6水平。結(jié)果：GMCSF上調(diào)PAR2蛋白和mRNA在肥大細(xì)胞P815上的表達(dá)；GMCSF上調(diào)PAR1PAR3和PAR4mRNA在肥大細(xì)胞P815的表達(dá)；GMCSF抗體的應(yīng)用可以阻斷GMCSF對(duì)PARs蛋白表達(dá)的調(diào)節(jié)作用。GMCSF以濃度依賴(lài)的方式促進(jìn)肥大細(xì)胞P815分泌IL4和IL6；應(yīng)

5、用PD98059U0126和LY294002可以阻斷GMCSF引起的肥大細(xì)胞IL4和IL6分泌并抑制其引起的ERK和Akt磷酸化。結(jié)論：GMCSF能夠調(diào)節(jié)肥大細(xì)胞PARs表達(dá)并刺激肥大細(xì)胞分泌IL4和IL6。GMCSF引起肥大細(xì)胞P815分泌細(xì)胞因子很可能是通過(guò)激活A(yù)kt和ERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)通路實(shí)現(xiàn)的，這些發(fā)現(xiàn)提示GMCSF可以條件依賴(lài)性的調(diào)節(jié)Th1細(xì)胞因子和或Th2細(xì)胞因子分泌從而在過(guò)敏性炎癥中發(fā)揮重要作用。關(guān)鍵詞：肥大細(xì)胞，蛋白酶激活受