牙鲆腸道中乳酸菌粘附相關(guān)蛋白質(zhì)的研究.pdf

1、粘附(adhesion)是指細菌與粘液(mucus)或上皮細胞通過生物化學作用產(chǎn)生的特異性粘連，是細菌定植的第一步，腸道中各種粘附相關(guān)成分是細菌介導粘附的基礎(chǔ)，對這些成分的研究分析是闡明益生菌對腸道粘附機理的必要條件，而粘附機理的深入研究對于消化道微生態(tài)環(huán)境的改善以及病原菌的生態(tài)防治均具有重要意義。益生乳酸菌在腸道中的定植能夠排斥外來病原菌的入侵，從而起到生物抗菌的作用。 本文應(yīng)用體外粘附模型，研究了從健康牙鲆腸道中分離篩選的乳

2、桿菌L15(LactobacillusL15)等幾株乳桿菌的粘附特性。發(fā)現(xiàn)細菌的種類不同，表現(xiàn)的粘附特性也不一致。所試菌株對牙鲆腸粘液、鯉魚腸粘液、小鼠腸粘液和膠原均較好地粘附。以L15對牙鲆腸粘液的粘附最強，L.acidophilus對小鼠粘液的粘附最強。經(jīng)表面蛋白提取和加入表面蛋白提取物后，L15和L.acidophilus的粘附率明顯降低，說明在表面蛋白提取物中有粘附相關(guān)的蛋白質(zhì)。乳桿菌及其表面蛋白提取物對致病菌的粘附有明顯的抑制

3、作用，說明細菌的粘附具有競爭性，L15等益生菌可以提前占位，減少病原菌侵害。此外，細菌粘附還表現(xiàn)出種屬特異性，菌種的來源明顯影響到其粘附特性，而且細菌的粘附相關(guān)成分存在于細菌表面，這一結(jié)論與資料報道的一致。 通過凝膠電泳(PAGE)和用酯化生物素標記的乳桿菌L15表面蛋白進行蛋白印跡實驗，結(jié)果顯示，在牙鲆腸道前段的粘液和上皮細胞膜蛋白中顯示有不同的粘附受體，在粘液中有分子量約為30.3kDa和29.7kDa的兩個條帶，在上皮細胞

4、膜蛋白中除上述兩種蛋白外，還顯示一分子量小于14kDa的蛋白條帶。在牙鲆腸道的后段，粘液和上皮細胞膜蛋白中均顯示同樣的30.3kDa和29.7kDa兩個蛋白條帶，盲囊中沒有任何蛋白條帶顯示。這一結(jié)果說明乳酸桿菌對腸道的粘附不但具有菌種的特異性，而且也說明動物不同其粘附受體不同，就牙鲆而言，甚至是同一器官的不同部位也具有不同的受體成分，雖然這一觀點還未見報道，但這與細菌對腸道粘附因素的復雜性相一致。 通過對牙鲆腸道石蠟切片進行HE