乳酸菌活性保藏的研究.pdf

1、乳酸菌，是指一群可發(fā)酵碳水化合物主要生成乳酸的革蘭氏陽性細菌的總稱。乳酸菌具有多種生理功能，廣泛應(yīng)用于食品、飼料、醫(yī)藥等行業(yè)。延長乳酸菌活菌保藏期是目前乳酸菌制劑研制與開發(fā)的技術(shù)關(guān)鍵問題。本文從市售乳酸菌產(chǎn)品中分離篩選和從微生物保藏機構(gòu)購買得到乳酸菌的優(yōu)良菌株。通過對乳酸菌增值培養(yǎng)、影響乳酸菌細胞凍藏和凍干保藏存活率的相關(guān)因素進行了系統(tǒng)研究，為建立一套高活性乳酸菌的保藏試驗方案和技術(shù)路線提供依據(jù)，促進乳酸菌的進一步開發(fā)應(yīng)用。結(jié)果如下：

2、 從國內(nèi)外優(yōu)質(zhì)發(fā)酵酸奶制品或商業(yè)發(fā)酵劑分離出的乳酸菌，初步篩選出2株保加利亞乳桿菌和一株嗜熱鏈球菌；并從廣東省微生物所購買一株德氏乳桿菌保加利亞亞種。選育出發(fā)酵性能優(yōu)良的一株德氏乳桿菌保加利亞亞種為主要研究對象。 采用正交試驗，優(yōu)化了培養(yǎng)基和培養(yǎng)條件，得到德氏乳桿菌保加利亞亞種的培養(yǎng)基組成：大豆蛋白胨O.5％、乳糖O.3％、酵母粉0.7％、檸檬酸鈉O.5％、吐溫80 O.1％、氯化鈉0.25％、硫酸鎂0.1％、麥芽汁10％

3、，pH值6.3；最佳培養(yǎng)條件：發(fā)酵培養(yǎng)最適溫度38℃，初始pH6.3，普通生化箱培養(yǎng)，培養(yǎng)時間15h，菌數(shù)達到:1.58×10<'9> cfu/mL。 研究了菌種凍存性差異及培養(yǎng)條件、營養(yǎng)基質(zhì)和不同保藏條件對德氏乳桿菌保加利亞亞種細胞抗冷凍性的影響。結(jié)果表明：球菌比桿菌的抗冷凍性更好；37℃培養(yǎng)，20℃冷激2h，初始pH值6.0，對數(shù)末期或穩(wěn)定初期收獲菌體、保護劑pH值調(diào)至5.5左右、在增值培養(yǎng)基中添加0.1％甘油或吐溫80，可

4、顯著提高德氏乳桿菌的冷凍存活率。 通過研究離心力、離心時間對乳酸菌離心損失率的影響，確定了離心條件:4000 r/min，30min。 研究了凍干前活菌數(shù)含量對凍干存活率的影響；篩選出含7種物質(zhì)的優(yōu)良凍干復(fù)合保護劑配方，冷凍干燥后，德氏乳桿菌保加利亞亞種L.b1的凍干存活率為48.54％左右、活菌數(shù)在1.12×10<'10>cfu/mL左右，而且不同復(fù)水介質(zhì)對乳酸菌的存活率影響不顯著；將乳酸菌凍干粉，在4℃常壓狀態(tài)下進