SAB,SAC及其分子藥對(duì)配伍對(duì)HSA誘導(dǎo)HK-2細(xì)胞CCL2，CCL3表達(dá)量的影響.pdf

1、目的:研究SAB, SAC及其分子藥對(duì)配伍對(duì)HSA誘導(dǎo)腎小管上皮細(xì)胞過(guò)程中CCL2,CCL3表達(dá)的影響。
　　方法:將體外培養(yǎng)的HK-2細(xì)胞隨機(jī)分為6組：①正常組②人血清白蛋白組(簡(jiǎn)稱模型組)、③PDGF-C抗體組(簡(jiǎn)稱抗體組)④丹酚酸B組⑤丹酚酸C組⑥丹酚酸B, C按1:1組分配伍組(簡(jiǎn)稱:配伍組)。同步化24h后，除正常組外，其余各組均給予HSA誘導(dǎo)?？贵w組、丹酚酸B組、丹酚酸C組、配伍組（統(tǒng)稱為治療組）分別加入相應(yīng)藥物共同培

2、養(yǎng)，于24h、48h、72h分組收集細(xì)胞。采用Western Blot、免疫細(xì)胞化學(xué)及免疫熒光技術(shù)檢測(cè)HK-2細(xì)胞PDGF-C、PDGFR-α、CCL2和CCL3的定位及表達(dá)水平。分別采用WST-1法、DTNB法和TBA法測(cè)定SOD、GSH及 MDA的含量。
　　結(jié)果：1. PDGF-C的檢測(cè)結(jié)果1）免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)結(jié)果:PDGF-C陽(yáng)性表達(dá)為棕黃顆粒，表達(dá)部位主要位于HK-2細(xì)胞胞質(zhì)。2）WB檢測(cè)結(jié)果：與模型組相比24h、48h

3、及72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)治療組PDGF-C相對(duì)表達(dá)量明顯減少（P<0.05）。2. PDGFR-α的檢測(cè)結(jié)果1）免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)結(jié)果：PDGFR-α陽(yáng)性表達(dá)為棕黃顆粒，表達(dá)部位主要位于HK-2細(xì)胞胞質(zhì)。2）WB檢測(cè)結(jié)果：與模型組相比24h、48h及72h治療組PDGFR-α相對(duì)表達(dá)量明顯減少（P<0.05），其中，72h時(shí)間點(diǎn)抗體組及配伍組PDGFR-α相對(duì)表達(dá)量較丹酚酸B、C組顯著降低（P<0.05）3. CCL2的檢測(cè)結(jié)果1）免疫熒光化學(xué)

4、檢測(cè)結(jié)果：CCL2陽(yáng)性表達(dá)為綠色熒光，表達(dá)部位主要位于HK-2細(xì)胞胞質(zhì)。2）WB檢測(cè)結(jié)果：與模型組相比，24h、48h及72h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各治療組CCL2相對(duì)表達(dá)量均明顯減少（P<0.05），其中，72h時(shí)間點(diǎn)抗體組及配伍組CCL2相對(duì)表達(dá)量較丹酚酸C組顯著降低（P<0.05）。4. CCL3檢測(cè)結(jié)果1）免疫熒光化學(xué)檢測(cè)結(jié)果：CCL3陽(yáng)性表達(dá)為綠色熒光，表達(dá)部位主要位于HK-2細(xì)胞胞質(zhì)。2） WB檢測(cè)結(jié)果：與模型組相比，24h、48h和7

5、2h三個(gè)時(shí)間點(diǎn)各治療組CCL3蛋白相對(duì)表達(dá)明顯減少（P<0.05）。5. SOD、GSH和MDA檢測(cè)結(jié)果：與模型組相比，24h、48h及72h各治療組SOD和GSH含量明顯升高(P<0.05)，各治療組內(nèi)比較，配伍組SOD和GSH含量均較其他治療組明顯升高(P<0.05)。與模型組相比，24h、48h及72h各治療組MDA含量明顯降低(P<0.05)，配伍組MDA含量較其他治療組明顯降低(P<0.05)。
　　結(jié)論：丹酚酸B、C及