丹酚酸B、C分子藥對配伍對腎纖維化炎癥趨化因子CCL2、CCL3的影響.pdf

1、目的:研究丹酚酸B、C分子藥對配伍對腎纖維化過程中炎癥細(xì)胞趨化因子CCL2、CCL3的抑制作用。
　　方法:采用50只健康雄性SD大鼠隨機(jī)分為五組,即正常組(n=10),模型組(n=10),丹酚酸B組(n=10),丹酚酸C組(n=10),丹酚酸B、C按1:1配伍組(簡稱:丹酚酸B+C組,n=10)。除正常組外,其余大鼠均造成單側(cè)輸尿管梗阻(UUO)模型,即麻醉后打開腹腔結(jié)扎右側(cè)輸尿管。正常組和模型組予雙蒸水灌胃,其余各治療組予相應(yīng)

2、藥物灌胃治療14天,全自動(dòng)生化分析儀檢測血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN), ELISA法檢測尿?2-微球蛋白(?2-MicrogloBulin,?2-MG)、N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(N-acetyl-β-D-glucosaminidase,NAG)的含量,光鏡下觀察腎組織病理、膠原沉積,免疫組化法檢測腎組織內(nèi)Ⅰ型膠原(ColⅠ)、Ⅲ型膠原(ColⅢ)、α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)的變化,Western-Blotting

3、技術(shù)檢測腎組織單核細(xì)胞趨化蛋白-1(CCL2)和巨噬細(xì)胞炎癥蛋白-3α(CCL3)的表達(dá)。
　　結(jié)果:1.各組大鼠腎臟病理結(jié)果(1)HE染色結(jié)果正常組大鼠腎組織未見病理改變,UUO組大鼠腎組織可見腎小管上皮細(xì)胞大量萎縮空泡變性,管腔擴(kuò)張或斷裂,并可見腎間質(zhì)內(nèi)大量炎性細(xì)胞浸潤,間質(zhì)纖維化較明顯;與模型組比較,各治療組HE評分顯著降低(P<0.05);各治療組間比較,丹酚酸B、B+C組HE評分明顯低于丹酚酸 C組(P<0.05)。(2

4、)Masson染色結(jié)果正常組腎組織膠原沉積不明顯,模型組可見腎小囊、腎小管基膜及間質(zhì)出現(xiàn)明顯的絲狀淡藍(lán)色膠原沉積,各治療組膠原沉積較模型組均明顯減輕(P<0.05)。丹酚酸B+C組Masson評分較丹酚酸C組明顯減少(P<0.05)。
　　2.腎功能測定結(jié)果與正常組比較,模型組及各治療組血清Scr和BUN水平均有不同程度升高,說明 UUO大鼠腎功能受損。與模型組比較,丹酚酸 C組血清 Scr水平明顯降低(P<0.05)。各治療組間

5、比較,丹酚酸C組血清Scr水平明顯低于丹酚酸B+C組(P<0.05)。
　　3.尿?2-MG、NAG檢測結(jié)果與正常組比較,模型組及各治療組尿?2-MG、NAG蛋白水平顯著升高(P<0.05),說明 UUO大鼠腎小管功能受損。與模型組比較,各治療組尿?2-MG、NAG水平顯著降低(P<0.05),說明丹酚酸B、C分子藥對配伍對UUO大鼠腎小管功能有一定保護(hù)作用。各治療組間比較,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.免疫組化檢測結(jié)果與正常組比較,模型

6、組ColⅠ、ColⅢ、α-SMA平均光密度值顯著升高(P<0.05);與模型組比較,丹酚酸B、B+C組ColⅠ、ColⅢ及各治療組α-SMA平均光密度值顯著降低(P<0.05);各治療組間比較,丹酚酸B、B+C組ColⅠ平均光密度值顯著低于丹酚酸C組(P<0.05),丹酚酸B+C組ColⅢ、α-SMA平均光密度值顯著低于丹酚酸C組(P<0.05)。
　　5. Western-Blotting檢測結(jié)果與正常組比較,模型組CCL2和C

7、CL3相對表達(dá)顯著升高(P<0.05);與模型組比較,各治療組CCL2、CCL3相對表達(dá)顯著降低(P<0.05),各治療組間比較,丹酚酸B+C組較丹酚酸B、C組CCL2相對表達(dá)顯著降低(P<0.05),CCL3的相對表達(dá)各治療組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),說明丹酚酸B、C分子藥對配伍可在一定程度上抑制炎癥細(xì)胞趨化因子CCL2、CCL3的表達(dá)。
　　結(jié)論:丹酚酸B、C分子藥對配伍對UUO大鼠腎臟具有一定的保護(hù)作用,可一定程度