瘦素和SIRT1對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移的影響及機(jī)制研究.pdf

1、研究目的:骨肉瘤(OS)是一種骨髓間充質(zhì)來(lái)源的局部侵襲性的惡性腫瘤，易發(fā)生早期侵襲轉(zhuǎn)移。OS常表現(xiàn)為局部浸潤(rùn)和早期肺轉(zhuǎn)移，伴發(fā)轉(zhuǎn)移的患者5年生存率僅為20％。近年來(lái)由于手術(shù)與新輔助化療的應(yīng)用延長(zhǎng)了患者的生存期，改善了患者生存質(zhì)量，但OS的整體治療效果仍不理想。由于對(duì)多種化療藥物不敏感，頑固性的OS患者亟需更好的預(yù)后指標(biāo)和更多的有效治療靶點(diǎn)。
　　瘦素（Leptin），一種由脂肪細(xì)胞分泌的內(nèi)分泌激素，作為一個(gè)潛在的抗癌藥物靶點(diǎn)已獲得

2、越來(lái)越多的關(guān)注。Sirutin-1(SIRTl)作為L(zhǎng)eptin下游的靶點(diǎn)，是哺乳動(dòng)物中重要的NAD+依賴性去乙酰化酶。本研究檢測(cè)Leptin和SIRT1在人骨肉瘤組織中的表達(dá);觀察Leptin和SIRT1對(duì)骨肉瘤細(xì)胞增殖和轉(zhuǎn)移的影響;探討SIRT1介導(dǎo)Leptin促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制，并將數(shù)據(jù)與OS患者的臨床病理資料進(jìn)行了相關(guān)分析。本研究結(jié)果不僅具有理論價(jià)值，而且對(duì)于OS的臨床治療及預(yù)后判斷也具有指導(dǎo)意義。
　　研究方法

3、:首先檢測(cè)Leptin和SIRT1在人骨肉瘤組織中的表達(dá)，根據(jù)表達(dá)水平的差別結(jié)合臨床隨訪資料，采用單因素及多因素方差分析，評(píng)估表達(dá)與腫瘤的不良臨床特征及預(yù)后的關(guān)系。然后采用MTT、流式細(xì)胞儀、細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)、Transwell實(shí)驗(yàn)、Westernblot等實(shí)驗(yàn)方法對(duì)骨肉瘤MG-63細(xì)胞的生長(zhǎng)特性及形態(tài)學(xué)表現(xiàn)進(jìn)行研究，以評(píng)估Leptin和SIRT1在骨肉瘤細(xì)胞中的表達(dá)及對(duì)其增殖轉(zhuǎn)移侵襲能力的影響，通過(guò)抑制SIRT1表達(dá)對(duì)Leptin促進(jìn)骨肉

4、瘤細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移的影響來(lái)印證二者在OS的相關(guān)性。
　　研究結(jié)果:
　　1、Leptin和SIRT1在OS中呈高表達(dá)。高表達(dá)的Leptin和SIRT1與不良臨床特征顯著相關(guān)。無(wú)論患者是否接受了新輔助化療，Leptin與SIRT1的表達(dá)水平呈正相關(guān)，且二者均與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和Enneking分期呈正相關(guān)。
　　2、Leptin通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)促進(jìn)了骨肉瘤細(xì)胞的血管生成能力，Leptin可促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的增殖和抗凋亡能力，

5、并可以降低骨肉瘤細(xì)胞的粘附性和增強(qiáng)侵襲能力。
　　3、SIRT1可能通過(guò)VEGF途徑增強(qiáng)血管生成能力從而促進(jìn)了腫瘤的局部侵襲、增殖和抗凋亡能力。
　　4、Leptin可顯著促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞中SIRT1的表達(dá)，抑制骨肉瘤細(xì)胞中SIRT1的表達(dá)可有效抑制Leptin促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移能力。SIRT1可能通過(guò)促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞中MMP2、MMP8及MMP9的表達(dá)促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。
　　研究結(jié)論:
　　1、Le

6、ptin和SIRT1在OS中高表達(dá)。高表達(dá)的Leptin和SIRT1與不良臨床特征顯著相關(guān)。無(wú)論患者是否接受了新輔助化療，Leptin與SIRT1的表達(dá)水平正相關(guān)，且二者均與遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和Enneking分期正相關(guān)。SIRT1可能在OS發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮重要的作用。SIRT1的表達(dá)水平對(duì)于OS患者是一個(gè)重要的臨床預(yù)后因子，也可作為OS患者治療的新靶點(diǎn)。
　　2、Leptin通過(guò)上調(diào)VEGF的表達(dá)促進(jìn)了骨肉瘤細(xì)胞的血管生成能力，同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)

7、Leptin可促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的增殖和抗凋亡能力，并可以降低骨肉瘤細(xì)胞的粘附性和增強(qiáng)侵襲能力，這些研究結(jié)果進(jìn)一步證實(shí)了Leptin在OS的轉(zhuǎn)移進(jìn)程中起到重要的作用，為早期控制OS的發(fā)展提供潛在診斷、治療策略及數(shù)據(jù)支持。
　　3、SIRT1可能通過(guò)VEGF途徑增強(qiáng)血管生成能力從而促進(jìn)了腫瘤的局部侵襲，并且促進(jìn)了骨肉瘤細(xì)胞增殖和抗凋亡能力，提示SIRT1在OS的發(fā)生發(fā)展中可能發(fā)揮著重要的作用。
　　4、Leptin可顯著促進(jìn)骨肉瘤

8、細(xì)胞中SIRT1的表達(dá)，而且抑制骨肉瘤細(xì)胞中SIRT1可有效抑制Leptin促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移能力，提示SIRT1介導(dǎo)了Leptin促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞增殖侵襲轉(zhuǎn)移能力。而SIRT1則可能通過(guò)促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞中MMP2、MMP8及MMP9的表達(dá)促進(jìn)骨肉瘤細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移。
　　本課題通過(guò)探討OS發(fā)生發(fā)展過(guò)程中Leptin與SIRT1的調(diào)控機(jī)制，明確了骨肉瘤細(xì)胞生物學(xué)性能調(diào)控的作用靶點(diǎn)及分子機(jī)制，SIRT1作為OS一個(gè)潛在的基因治療新