雷公藤紅素對人骨肉瘤細胞增殖、凋亡的影響及作用機制研究.pdf

1、目的：
　　明確雷公藤紅素對人骨肉瘤細胞增殖、凋亡的影響及相關(guān)作用機制。
　　方法：
　　MTT比色法檢測不同濃度、不同作用時間的雷公藤紅素對人骨肉瘤細胞增殖的作用；Hoechst33258染色熒光倒置顯微鏡下觀察不同濃度雷公藤紅素作用下人骨肉瘤細胞形態(tài)的變化；流式細胞技術(shù)檢測不同濃度雷公藤紅素對人骨肉瘤細胞凋亡的影響；Westernblot檢測不同濃度雷公藤紅素作用下人骨肉瘤細胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2,Bax,cas

2、pase-3,caspase-8,procaspase-9,cytochromec和PARP的表達情況。
　　結(jié)果：
　　MTT比色法結(jié)果顯示，雷公藤紅素可顯著抑制人骨肉瘤細胞（MG-63,U-2OS及HOS）的增殖，其抑制效應(yīng)呈現(xiàn)濃度依賴性和時間依賴性。通過繪制細胞生長曲線發(fā)現(xiàn)雷公藤紅素對人骨肉瘤U-2OS細胞的增殖抑制作用最為明顯；Hoechst33258染色熒光倒置顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn)隨著雷公藤紅素作用濃度的升高，人骨肉瘤

3、U-2OS細胞內(nèi)出現(xiàn)明顯的核濃縮、核膜核仁破碎等典型的細胞凋亡形態(tài)變化；流式細胞技術(shù)檢測提示，雷公藤紅素可提高人骨肉瘤U-2OS細胞的凋亡率，并呈現(xiàn)濃度依賴性；Westernblot檢測發(fā)現(xiàn)隨著雷公藤紅素作用濃度的升高，人骨肉瘤U-2OS細胞內(nèi)線粒體凋亡途徑相關(guān)蛋白表達量均發(fā)生了顯著變化：Bax/Bcl-2比值升高，procaspase-9表達量下降，cytochromec表達量升高，而死亡受體凋亡途徑相關(guān)蛋白caspase-8表達量無