華南忍冬與鈣代謝途徑相關基因的克隆及表達分析.pdf

1、西南巖溶地區(qū)因其碳酸鹽巖風化造成了該巖溶生態(tài)系統(tǒng)土壤的富鈣性，而華南忍冬則對這種高鈣的土壤條件表現出較好的適應性。忍冬屬于藤本植物，其繁殖能力強，根系尤為發(fā)達，對防止水土流失，恢復當地生態(tài)起著非常重要的作用。研究表明，華南忍冬之所以能在巖溶區(qū)生長良好，與植物體的組織結構和本身的泌鈣機能密切相關。因此，本論文中通過對華南忍冬不同濃度的鈣鹽處理，并對與鈣代謝途徑相關的基因進行了序列分析以及表達量研究，獲得了如下的研究結果：
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2、1)克隆的華南忍冬(Lonicera coNFusa)和忍冬(Lonicera japonica)的鈣調蛋白cDNA序列全長均為450bp，編碼150個氨基酸。利用NCBI中的Blast分析，與報道的其他物種鈣調蛋白基因同源性均在90％以上。兩種忍冬的鈣調蛋白與油茶(Camellia oleifera)的同源性達到98％；與茄科(Solanum tuberosum)的同源性為95％；與長春花(Catharanthus roseus)的同

3、源性也較高為96％；與玉米(Zea mays)、小麥(Triticum aestirum)、水稻(Oryza sativa)等單子葉植物的同源性均為93％。蛋白質比較分析結果顯示物種間鈣調蛋白同源性更高，僅個別氨基酸位點發(fā)生突變，進一步說明了鈣調蛋白的高度保守性。測序得到的華南忍冬鈣調蛋白DNA序列全長為2053bp，經分析在鈣調蛋白DNA序列僅有一個拷貝。
　　 (2)對不同鈣鹽處理條件下華南忍冬和忍冬鈣調蛋白基因進行熒光定量

4、PCR檢測，結果表明，兩種忍冬科植物的鈣調蛋白基因的表達水平均隨著鈣濃度的升高而升高；且忍冬升高水平顯著，華南忍冬升高水平較平緩。
　　 (3)克隆的華南忍冬鈣調蛋白激酶基因的cDNA序列全長為960bp，編碼263個氨基酸，與報道的其他物種CDPKs基因同源性在85％左右。
　　 (4)克隆的華南忍冬鈣轉運蛋白基因ACA1的cDNA序列全長為3057bp，編碼1018個氨基酸，與報道的擬南芥的ACA1基因同源性為80％