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文檔簡介
1、 本實驗以扁桃品種“Pioneer”為材料。首先，利用網(wǎng)上資源及本實驗室先前獲得的若干泛素降解途徑關(guān)鍵酶的EST序列，并運用RACE和RT-PCR技術(shù)，對下列基因進行了克隆和測序工作，包括泛素激活酶(E1)、泛素結(jié)合酶(E2)和泛素連接酶(E3)的兩個組分(cullin和Skp1)，SLF以及S-RNase編碼基因。目前，獲得了泛素激活酶E1的部分CDS序列和其余基因的CDS全長序列，為進一步研究它們的功能奠定了基礎(chǔ)?！ ∑浯?，利用
2、RT-PCR技術(shù)，研究了上述各基因在扁桃花藥、雌蕊、花瓣、萼片及葉片中的表達情況。結(jié)果顯示：SLF基因在花藥中專一性表達，S-RNase基因在雌蕊中專一性表達，這為它們作為自交不親和相關(guān)的基因提供了佐證?！ ∽詈螅瑸榱蓑炞CSLF蛋白與它可能的底物——S-RNase之間是否存在相互作用，進行了酵母雙雜交實驗。首先，擴增了兩個基因的編碼區(qū)全長，分別命名為PdSLF1和PdSm。然后，將PdSLF1基因作為誘餌，克隆到酵母表達載體pSos上
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