氧化異阿樸菲衍生物8-1減少AD細(xì)胞模型和線蟲模型Aβ1-42分泌和毒性作用及機(jī)制研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探究氧化異阿樸菲衍生物8-1對(duì) AD細(xì)胞模型和線蟲模型的抗AD作用及其可能的機(jī)制,為找到一種延緩AD發(fā)生和發(fā)展的新藥提供了前期研究基礎(chǔ)。
  方法:用濃度分別為(0.1,0.5,1,5,10,20μM)的氧化異阿樸菲衍生物8-1溶液,處理SH-SY5Y細(xì)胞,利用MTT實(shí)驗(yàn)檢測(cè)化合物8-1的細(xì)胞毒性;通過(guò)ELISA實(shí)驗(yàn)來(lái)檢測(cè)SH-SY5Y細(xì)胞Aβ1-42的分泌水平;采用Western blot技術(shù)分析化合物8-1對(duì)細(xì)胞Aβ前體

2、蛋白基因APP表達(dá)的影響。將Aβ1-42轉(zhuǎn)基因線蟲GMC101隨機(jī)分成對(duì)照組和不同濃度給藥組(0.1,1,10μM),觀察以下指標(biāo):(1)癱瘓率;(2)抗氧化應(yīng)激能力。應(yīng)用RT-PCR的方法來(lái)檢測(cè) Aβ1-42轉(zhuǎn)基因線蟲體內(nèi) ace-1和 Aβ基因的相對(duì)表達(dá)量,并采用2-ΔΔCt來(lái)計(jì)算結(jié)果。AChE測(cè)定通過(guò)膽堿與二硫?qū)ο趸郊姿岱磻?yīng)的原理來(lái)檢測(cè)。用熒光檢測(cè)法來(lái)評(píng)估線蟲的自噬活性。
  結(jié)果:通過(guò)此次研究,我們對(duì)合成的14種氧化異阿

3、樸菲衍生物的抗AD活性和能力進(jìn)行了評(píng)估和篩選。結(jié)果發(fā)現(xiàn),這14種化合物中8-1在減少SH-SY5Y細(xì)胞的Aβ1-42分泌水平作用中有最為顯著的效果。而且,我們還發(fā)現(xiàn)化合物8-1能下調(diào)細(xì)胞APP蛋白的表達(dá)。我們還進(jìn)一步觀察到化合物8-1能延緩Aβ1-42轉(zhuǎn)基因線蟲的癱瘓率,而且發(fā)現(xiàn)其可能的機(jī)制是8-1減弱了線蟲的AChE活性或增強(qiáng)了線蟲的自噬活性。
  結(jié)論:我們的研究數(shù)據(jù)表明,氧化異阿樸菲衍生物8-1有利于降低AD的發(fā)病率,為研發(fā)

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