天麻鉤藤飲對大鼠氨氯地平代謝的影響以及布比卡因增強大鼠主動脈苯腎上腺素收縮反應的研究.pdf

1、氨氯地平為第三代二氫吡啶類Ca2+通道阻滯藥，是臨床治療高血壓病的一線藥物，作用機制為選擇性地作用于細胞膜上的Ca2+通道，抑制Ca2+內(nèi)流，進而擴張血管平滑肌，達到降壓的目的。氨氯地平適用于伴有慢性心衰的高血壓和冠心病患者的治療；據(jù)報道該藥能改善心衰患者的癥狀并降低死亡率；對于正在使用洋地黃類強心藥、利尿藥和ACEI的嚴重慢性心衰患者，聯(lián)合應用氨氯地平，未見心血管并發(fā)癥和死亡率增加。伴有腎功能受損者使用氨氯地平時，不須調(diào)整用藥劑量。<

2、br>　　天麻鉤藤飲為中藥降壓的經(jīng)典方劑，臨床上經(jīng)常作為輔助降壓藥物使用。據(jù)國外研究報道，80％的高血壓患者需要聯(lián)合應用2種或2種以上的抗高血壓藥物才能起到穩(wěn)定血壓的作用。我國臨床上降壓藥的聯(lián)合應用已成為治療高血壓病的常規(guī)用藥方案。中藥復方制劑聯(lián)合西藥治療高血壓已成為一種較普遍的治療方案。中藥成分復雜，中西藥聯(lián)用時藥代動力學的相互作用更為復雜；因此，研究中西藥聯(lián)用時藥代動力學的改變具有重要的意義。本文利用 LC-MS/MS技術，分析了天

3、麻鉤藤飲復方制劑對氨氯地平及其代謝產(chǎn)物在大鼠體內(nèi)藥物代謝的影響。
　　布比卡因（BUP）是臨床最常用的局麻藥之一。在之前的研究中發(fā)現(xiàn)，大鼠離體胸主動脈暴露于臨床濃度的BUP后，α1受體介導的收縮反應呈現(xiàn)早期增強和長期抑制兩種效應。但BUP增強α1受體介導血管收縮反應的作用機制尚不清楚。本文采用大鼠離體胸主動脈環(huán)，觀察BUP增強α1受體介導血管收縮反應的變化；同時借助藥理學工具藥，分析血管內(nèi)皮舒血管因子在BUP增強α1受體介導血管收

4、縮反應中的作用。
　　第一部分天麻鉤藤飲對大鼠氨氯地平代謝的影響
　　目的：建立抗高血壓藥物氨氯地平及其代謝產(chǎn)物的LC-MS/MS測定方法，分析天麻鉤藤飲中藥復方制劑對氨氯地平及其代謝產(chǎn)物的藥動學影響。
　　方法：將健康雄性SD大鼠隨機分為對照組和實驗組。實驗組大鼠灌胃給予天麻鉤藤飲（0.5 g/kg，1次/日），對照組大鼠給予等體積蒸餾水，連續(xù)灌胃15天。最后一日灌胃后兩組大鼠均灌胃給予氨氯地平1 mg/kg，采血。

5、應用 LC-MS/MS方法測定氨氯地平及其代謝產(chǎn)物不同時間的血藥濃度并計算藥代動力學參數(shù)。
　　結(jié)果：氨氯地平的標準曲線方程為 Y=1.89305X-0.0321939（r2=0.996789）（0.15~60 ng/mL）；氨氯地平低、中、高三種濃度模擬血漿樣品的提取回收率分別為80.16%、69.98%和66.67%，標準偏差（SD）值分別為17.04%、9.58%和12.91%；低、中、高三個濃度在處理后的血漿基質(zhì)中的峰面積

6、，與等量的低、中、高三個濃度對照品溶液峰面積之比分別為100.35%、100.04%和109.81%，標準偏差（SD）值分別為7.11%、4.27%和14.90%.氨氯地平低、中、高三種濃度血漿樣品的日內(nèi)精密度RSD值分別為13.40%、10.00%和9.80%；日間精密度RSD值分別為13.00%、6.80%和14.20%；準確度值分別為2.71%、2.69%和2.64%；
　　對照組大鼠體內(nèi)氨氯地平的主要藥動學參數(shù)如下：AUC

7、0-t，64.40±25.54μg/L·h；AUC0-∞，74.58±29.81μg/L·h；Cmax，5.73±3.16μg/L；Tmax，1.37±0.44 h；t1/2，6.91±1.64 h；Cl，0.02±0.006 L/h/kg；V，222.73±97.80 L/kg；t1/2Ka：0.31±1.88 h。天麻鉤藤組大鼠體內(nèi)主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，49.54±29.66μg/L·h；AUC0-∞，48.45±29.

8、66μg/L·h；Cmax，4.28±3.05μg/L；Tmax，1.12±0.35 h；t1/2，5.38±1.16 h；Cl，0.42±0.028 L/h/kg；V，3623.3±1952.07 L/kg；t1/2Ka：0.65±0.72 h。與對照組相比，實驗組藥動學參數(shù)t1/2明顯縮短，V、Cl和t1/2Ka明顯增大，且差異具有統(tǒng)計學意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M1（m/z=363.0869）的主要藥動學參數(shù)如下：AU

9、C0-t，43.16±11.99μg/L·h；AUC0-∞，45.09±12.48μg/L·h；Cmax，5.55±1.59μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M1的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，32.56±10.42μg/L·h；AUC0-∞，33.52±11.27μg/L·h；Cmax，5.37±2.00μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組藥動學參數(shù) AUC0-∞明顯減小，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M3（m

10、/z=365.1025）的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，14.85±3.65μg/L·h；AUC0-∞，15.38±3.81μg/L·h；Cmax，1.92±0.54μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M3的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，10.92±3.68μg/L·h；AUC0-∞，11.27±3.72μg/L·h；Cmax，1.73±0.58μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組大鼠的藥動學參數(shù)AUC0-t和AUC0-∞明顯減小，

11、差異具有統(tǒng)計學意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M4（m/z=377.1026）的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，22.23±7.04μg/L·h；AUC0-∞，23.29±7.67μg/L·h；Cmax，2.84±0.91μg/L；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M4的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，16.30±5.39μg/L·h；AUC0-∞，16.55±5.50μg/L·h；Cmax，2.70±1.01μg/L。與對照組相比，天

12、麻鉤藤組大鼠的藥動學參數(shù)AUC0-∞明顯減小，且差異具有統(tǒng)計學意義。
　　對照組大鼠代謝產(chǎn)物 M6（m/z=406.1290）的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，36.46±17.91μg/L·h；AUC0-∞，84.14±63.44μg/L·h；Cmax，3.27±1.90μg/mL；天麻鉤藤組大鼠代謝產(chǎn)物 M6的主要藥動學參數(shù)如下：AUC0-t，10.92±3.68μg/L·h；AUC0-∞，11.27±3.72μg/L；Cm

13、ax，1.73±0.58μg/L。與對照組相比，天麻鉤藤組大鼠的藥動學參數(shù) AUC0-t、AUC0-∞和 Cmax均明顯減小，差異具有統(tǒng)計學意義。
　　結(jié)論：天麻鉤藤飲可抑制氨氯地平的胃腸道吸收，并可能促進氨氯地平及其7種主體代謝產(chǎn)物的排泄，由此造成氨氯地平的t1/2縮短和Cl加快。
　　第二部分布比卡因增強大鼠主動脈苯腎上腺素收縮反應的機制研究
　　目的：分析血管內(nèi)皮在布比卡因（BUP）增強苯腎上腺素（Phe）誘發(fā)血

14、管收縮反應中的作用。
　　方法：制備大鼠離體胸主動脈血管環(huán)，采用機械損傷或工具藥干擾血管內(nèi)皮的舒張功能。記錄Phe作為α1受體激動劑誘發(fā)的動脈收縮反應。
　　結(jié)果：BUP（30μmol/L）與內(nèi)皮完整血管標本孵育20 min后，Phe誘發(fā)的血管收縮 Emax值為2.50±0.05（g），顯著高于對照組標本的Emax值。孵育時間縮短至5、10或15 min時，BUP無此增強效應。在內(nèi)皮損傷動脈標本，同濃度BUP孵育20 min