白復(fù)凝的制備及初步評(píng)價(jià).pdf

1、白復(fù)凝是以渭北野生羊角蔓中抗白癜風(fēng)有效部位為功效成分制備的一種復(fù)凝膠劑。渭北野生羊角蔓為蘿藦科蘿藦屬蘿藦的一個(gè)變種，渭北民間有人用其白汁治療白癜風(fēng)，《廣濟(jì)方》有同種植物治療白癜風(fēng)的記載。羊角蔓資源十分豐富，多年來一直是自生自滅，為了開發(fā)利用這一自然資源尋求治療頑疾白癜風(fēng)新藥，本文對(duì)其進(jìn)行了有效部位的篩選、成分檢定、制備工藝、劑型制備及初步評(píng)價(jià)四方面的研究。
　　本研究首先采用化學(xué)方法對(duì)羊角蔓所含化學(xué)成分進(jìn)行系統(tǒng)預(yù)測(cè)，依據(jù)檢測(cè)結(jié)果，

2、用植物化學(xué)的研究方法得出單體成分并進(jìn)行結(jié)構(gòu)檢定；其次綜合研究結(jié)果，按極性分為4大類，用4種極性不同的溶劑進(jìn)行分類提取，提取物采用活性導(dǎo)向分離法，篩選出有效部位；再次采用4因子3水平響應(yīng)面法對(duì)有效部位的浸出工藝進(jìn)行優(yōu)化研究；最后采用試驗(yàn)對(duì)比、綜合評(píng)價(jià)的方法進(jìn)行制劑工藝研究，并用生物活性法進(jìn)行藥效學(xué)初步評(píng)價(jià)。主要結(jié)果如下：
　　（1）羊角蔓治療白癜風(fēng)有效部位篩選
　　通過系統(tǒng)預(yù)測(cè)，定性鑒別得出羊角蔓中含有皂苷、三萜類、甾體類、甾

3、醇、黃酮類、生物堿和有機(jī)酸等14類化學(xué)成分。通過驗(yàn)證建立的酪氨酸酶活性測(cè)定法對(duì)石油醚提取物、乙酸乙酯提取物、正丁醇提取物、水提20％、40%、60%、80%、95%醇沉物8類不同極性組合物進(jìn)行生化測(cè)定，得出在試驗(yàn)范圍內(nèi)，羊角蔓正丁醇提取物對(duì)酪氨酸酶激活效果最為顯著，其激活率為30.71%，陽性對(duì)照補(bǔ)骨脂素激活率為39.34%。
　?。?）羊角蔓有效部位的植化研究
　　正丁醇提取物，經(jīng)理化檢測(cè)，富含皂苷，薄層色譜檢測(cè)含2個(gè)皂苷

4、斑點(diǎn)；經(jīng)柱色譜分離、結(jié)晶純化等處理，得到4個(gè)化合物單體，經(jīng)理化、色譜、光譜等方法檢定，得出化合物1為胡蘿卜苷，化合物2為β-谷甾醇，化合物3為刺槐苷（山奈酚-3-O-葡萄糖基-鼠李糖基-7-O-鼠李糖苷），化合物4為肌醇。
　　（3）羊角蔓有效部位的浸出研究
　　經(jīng)顯微觀察得出羊角蔓藤莖組織結(jié)構(gòu)主要為表皮薄壁細(xì)胞、皮層薄壁細(xì)胞、次生韌皮部薄壁細(xì)胞、次生木質(zhì)部薄壁細(xì)胞及髓細(xì)胞；葉片組織結(jié)構(gòu)主要為表皮薄壁細(xì)胞和葉肉細(xì)胞。組織化學(xué)

5、定位得出羊角蔓藤莖中皂苷主要分布在其皮層薄壁細(xì)胞、次生韌皮部薄壁細(xì)胞和髓細(xì)胞中；葉片中皂苷主要分布在葉肉細(xì)胞中。
　　浸出工藝研究，在單因素研究的基礎(chǔ)上，以總皂苷的標(biāo)示量為效應(yīng)指標(biāo)，通過響應(yīng)面中心設(shè)計(jì)試驗(yàn)進(jìn)行工藝優(yōu)化，得出在試驗(yàn)范圍內(nèi)的最佳提取工藝條件為：乙醇濃度76%，液料比10.32:1(mL/g)，回流溫度70.2℃，回流時(shí)間2.52h；5次試驗(yàn)，固形物收率為4.32%，產(chǎn)物中總皂苷的標(biāo)示量為60.39%。經(jīng)驗(yàn)證，該工藝的相

6、對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD為1.50%。
　?。?）制劑研究及藥效初步評(píng)價(jià)
　　以正丁醇提取物的理化性質(zhì)為依據(jù)，以臨床適用性為判定標(biāo)準(zhǔn)，經(jīng)文獻(xiàn)調(diào)研和6種外用劑型對(duì)比分析得出w/o/w復(fù)乳凝膠劑對(duì)本產(chǎn)品較為適合。
　　制劑處方和成型工藝參數(shù)經(jīng)L9(34)正交試驗(yàn)優(yōu)化得出，以1.0g藥物，加1.2g單硬脂酸甘油酯，0.5g白凡士林，2.7g液體石蠟，0.25g硬脂酸，0.2g司盤-80，0.1g吐溫-80，0.1g CMC-Na，0

7、.1g PVA124及少量助劑和適量蒸餾水，80℃乳化，制成的產(chǎn)品呈米黃色，穩(wěn)定性良好，功效成分以刺槐苷計(jì)，其標(biāo)示量不低于8.0%，釋藥性為0～8h內(nèi)，藥物累積釋放率達(dá)75.6%，體外釋藥方式中一級(jí)模型的相關(guān)系數(shù)較高。
　　藥效初步評(píng)價(jià)試驗(yàn)結(jié)果表明，該產(chǎn)品對(duì)皮膚無刺激；對(duì)酪氨酸酶的激活率為30.62%，陽性對(duì)照復(fù)方補(bǔ)骨脂酊激活率為57.34%。
　　由此得出結(jié)論：渭北野生羊角蔓治療白癜風(fēng)有效部位為苷類物質(zhì)，以總皂苷為指標(biāo)，標(biāo)