白藜蘆醇脂質體的制備及評價.pdf

1、白藜蘆醇（RES）具有優(yōu)越的抗腫瘤性能，可作為健康食品和新藥開發(fā)特別是抗腫瘤藥物開發(fā)的原料，被喻為繼紫杉醇之后的又一新的綠色抗癌藥物。但是白藜蘆醇是脂溶性藥物，水溶性差，口服吸收差，沒有靶向性，靶部位幾乎不可能達到有效治療濃度，體內代謝不穩(wěn)定，故臨床應用受到很大限制。為此，本論文研制了RES脂質體和脂質體凍干粉針，以達到延長藥物的半衰期，提高藥物的抗腫瘤效果，提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的毒副作用，增強藥物的臨床應用性的目的[1-3]。

2、
　　首先建立了RES樣品HPLC測定方法，得到RES甲醇溶液濃度的標準曲線：y=166.13x+1.0476(R2=0.9996)；并對其線性范圍、精密度、回收率等參數(shù)進行了考察，結果表明該方法符合分析要求。并采用了透析法，用pH7.4 PBS作為透析介質分離脂質體和游離藥物，以甲醇破壞脂質體結構，用HPLC法測定脂質體內藥物濃度，最終計算包封率。通過考察空白脂質體和游離藥物的透析情況，證明采用透析法分離脂質體和游離藥物的方法可

3、靠[4-5]。
　　以大豆磷脂和膽固醇為原料，采用逆相蒸發(fā)法制備RES脂質體。在處方篩選過程中，以脂質體包封率和粒徑為考察指標，先進行單因素考察，包括磷脂用量、膽固醇磷脂比、藥物磷脂比和有機相水相體積比等；然后采用了正交實驗設計，以包封率為指標，選擇最佳處方：RES10mg，磷脂400mg，膽固醇40mg，無水乙醚20mL，pH7.4 PBS10mL，其包封率為95％,同時在試驗中發(fā)現(xiàn)在處方中加入5mol%的二硬脂酰磷脂酰乙醇胺-

4、聚乙二醇（DSPE-PEG2000），能夠有效提高包封率并且在一定程度上降低粒徑。通過乙醚揮發(fā)速度、梨形瓶傾斜度和細胞超聲粉碎儀功率及時間等工藝條件的調整，對逆相蒸發(fā)法進行了工藝優(yōu)化。為了提高RES脂質體的穩(wěn)定性，采用冷凍干燥法將其制成凍干粉針，在實驗過程中考察了不同凍干保護劑對冷凍干燥效果的影響，最后選擇2.5%乳糖+2.5%海藻糖作為凍干保護劑[6-7]。
　　同時對RES脂質體以及DSPE-PEG2000修飾的RES脂質體（

5、RES-PEG）的體外釋放行為進行了考察。首先建立了用紫外分光法測定在不同pH(5.5,6.5,7.4)的磷酸緩沖鹽溶液中RES濃度的分析方法，得到三條不同的標準曲線。對比RES脂質體在不同pH(5.5,6.5,7.4)的磷酸緩沖鹽溶液中的釋放結果，發(fā)現(xiàn)實驗所得RES脂質體在體外釋放沒有pH依賴性，在三種pH環(huán)境下釋放速度接近；又對比了RES脂質體、RES-PEG脂質體和RES游離藥物在pH7.4的磷酸緩沖鹽溶液中的釋放結果，我們可以看

6、出釋放速度：RES游離藥物>RES脂質體>RES-PEG脂質體[8]。
　　大鼠尾靜脈注射后，考察了RES原料藥溶液、RES脂質體和RES-PEG脂質體的體內藥動學參數(shù)。首先，建立了HPLE法，以染料木黃酮為內標，測定大鼠體內血漿中血藥濃度，同時用DAS2.0統(tǒng)計學分析軟件計算藥動學參數(shù)。通過大鼠體內藥動學實驗表明，在相同劑量下，脂質體組的血漿半衰期比溶液組的要長，AUC是溶液組的4倍，說明直至提足的消除比脂質體組慢得多，脂質體組