中藥新藥藥效學(xué)

1、中藥新藥主要藥效學(xué),研究的基本技術(shù)要求,成都中醫(yī)藥大學(xué),黃國(guó)鈞 教授,成都中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院 中藥學(xué)為國(guó)家級(jí)重點(diǎn)學(xué)科，在全國(guó)最早開(kāi)始招收中藥學(xué)博士研究生；現(xiàn)有博士生導(dǎo)師11名，每年招收博士生20余名、碩士生200多名。中藥制劑、中藥藥理、中藥品質(zhì)為國(guó)家中醫(yī)藥管理局三級(jí)科研實(shí)驗(yàn)實(shí)。具有多臺(tái)、件先進(jìn)的科研儀器及設(shè)備。中藥藥理教研室 教授5人；副教授2人；助教1人 博士生導(dǎo)師：沈映君教授、黃國(guó)鈞教授,

2、成都中醫(yī)藥大學(xué)新區(qū),中藥新藥的基本要求 ——安全、有效、穩(wěn)定、可控新藥有效性的評(píng)價(jià)：（1）試驗(yàn)部分（即主要藥效學(xué)試驗(yàn)）；（2）臨床部分（即臨床研究）。,一、基本要求  （一）試驗(yàn)主要負(fù)責(zé)人 應(yīng)具有醫(yī)藥衛(wèi)生專業(yè)大專以上水平及資歷，具有一定的理論基礎(chǔ)與技術(shù)操作能力。確保試驗(yàn)設(shè)計(jì)合理，結(jié)果判斷準(zhǔn)確，總結(jié)資料可靠。申報(bào)材料應(yīng)有課題負(fù)責(zé)人簽字及單位簽章。 （二）試驗(yàn)條件 實(shí)

3、驗(yàn)室條件、儀器設(shè)備、各種試劑及組織管理均應(yīng)符合規(guī)范化要求。,（三）實(shí)驗(yàn)動(dòng)物 應(yīng)符合國(guó)家規(guī)定的等級(jí)動(dòng)物要求，必要時(shí)可選用特定年齡，性別的動(dòng)物或特殊模型動(dòng)物。    （四）試驗(yàn)記錄 應(yīng)詳細(xì)準(zhǔn)確，不得任意取舍或涂改。試驗(yàn)中出現(xiàn)的新問(wèn)題或特殊現(xiàn)象均應(yīng)詳細(xì)寫(xiě)明情況。    （五）試驗(yàn)結(jié)果 應(yīng)進(jìn)行正確的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，數(shù)據(jù)表格應(yīng)規(guī)范。資料整理應(yīng)簡(jiǎn)明扼要，注

4、意科學(xué)性、嚴(yán)密性、邏輯性，真實(shí)可靠地反映出試驗(yàn)所獲得的各種信息與結(jié)果。,二、中藥藥效學(xué)試驗(yàn)方法的選擇 中藥新制劑大多數(shù)是中藥的復(fù)方制劑，即或是單味中藥的制劑，因含多種有效化學(xué)成分，對(duì)機(jī)體所起的作用常常是多途徑的，其發(fā)揮療效的作用機(jī)理是多方面的，這正是中藥和化學(xué)藥物的最大不同之處?；瘜W(xué)藥物制劑的有效化學(xué)成分比較單一，其作用部位選擇性強(qiáng)，例如強(qiáng)心苷選擇性地作用于心?。豢股剡x擇性地抑殺病原微生物。而中醫(yī)治病是針對(duì)疾病的各種“證”(即

5、辨證施治)，并兼顧全身狀況進(jìn)行藥物配伍組成方劑應(yīng)用。方劑含有多種有效化學(xué)成分，故能從多環(huán)節(jié)、多途徑的作用方式來(lái)達(dá)到防治疾病的目的。 因此，在進(jìn)行中藥新制劑的主要藥效學(xué)研究設(shè)計(jì)時(shí)，如何選擇適合的試驗(yàn)方法和指標(biāo)來(lái),研究和判斷其藥效作用，難度較大，困難較多。但是如果能以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，正確領(lǐng)會(huì)中藥新制劑的功能和主治的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)概念，將中醫(yī)“證”與“病”相結(jié)合并聯(lián)系臨床經(jīng)驗(yàn)考慮，就能制訂出較好的主要藥效學(xué)研究的方案。藥效試驗(yàn)應(yīng)以體內(nèi)試驗(yàn)為

6、主，必要時(shí)配合體外試驗(yàn)，從不同層次證實(shí)其藥效。（一）以中醫(yī)理論為指導(dǎo)，選擇藥理試驗(yàn)方法 中醫(yī)學(xué)是研究人體生理、病理，以及疾病的診斷和防治等的一門科學(xué)。經(jīng)過(guò)了幾千年的醫(yī)療實(shí)踐，中醫(yī)學(xué)具有豐富的臨床經(jīng)驗(yàn)和獨(dú)特的理論體系。 中醫(yī)學(xué)的理論體系是以整體觀念為主導(dǎo)思想，以臟腑經(jīng)絡(luò)的生理和病理為基礎(chǔ)，以辨證論治為診療特點(diǎn)的醫(yī)學(xué)理論體系。中醫(yī)學(xué)理論涉及面廣，內(nèi)容多，主要包括陰陽(yáng)五行、藏象、經(jīng)絡(luò)、氣血津液、病理病機(jī)等。,中醫(yī)治病遣藥

7、，其中藥的應(yīng)用也是以中醫(yī)學(xué)理論作為基礎(chǔ)的，故有著獨(dú)特的中醫(yī)藥理論體系和應(yīng)用形式。中藥治病的多種多樣的性質(zhì)和作用統(tǒng)稱為中藥的性能，主要包括性、味、歸經(jīng)、升、降、浮、沉及有毒、無(wú)毒等方面。前人在長(zhǎng)期實(shí)踐中對(duì)中藥性能的認(rèn)識(shí)，并以陰陽(yáng)、臟腑、經(jīng)絡(luò)、治療法則等中醫(yī)學(xué)理論為其理論基礎(chǔ)，創(chuàng)造和發(fā)展了中藥的基本理論。 因此，中藥理論是整個(gè)中醫(yī)學(xué)理論體系中一個(gè)重要的組成部分?？梢?jiàn)，在考慮中藥新制劑的藥效學(xué)試驗(yàn)方法時(shí)，首先需要揭示中醫(yī)學(xué)理論體系的本

8、質(zhì)，尋找出中醫(yī)學(xué)理論實(shí)質(zhì)的客觀化和標(biāo)準(zhǔn)化的試驗(yàn)方法與指標(biāo)。 例如延緩衰老藥物“雄獅丸”的藥理作用研究，就是圍繞補(bǔ)腎法則進(jìn)行的。中醫(yī)學(xué)理論認(rèn)為腎氣與衰老密切相關(guān)。作者認(rèn)為在研制抗衰老方劑上，,不應(yīng)沿用國(guó)外研究抗衰老合成藥的模式，而應(yīng)以中醫(yī)抗衰老理論－－補(bǔ)腎法為根據(jù)。在思想方法上，應(yīng)走中西醫(yī)結(jié)合的道路，運(yùn)用近代先進(jìn)科學(xué)技術(shù)，針對(duì)中藥復(fù)方的特點(diǎn)，把中醫(yī)學(xué)的補(bǔ)腎法與近代醫(yī)學(xué)的衰老學(xué)說(shuō)相結(jié)合，以逐步探索建立研制抗衰老中藥的獨(dú)特的模式。

9、 “雄獅丸”的藥理試驗(yàn)，根據(jù)補(bǔ)腎法則，選擇藥物對(duì)改變腎上腺皮質(zhì)功能、免疫功能及促進(jìn)物質(zhì)代謝等三個(gè)方面著手。試驗(yàn)結(jié)果表明，“雄獅丸”能興奮腎上腺皮質(zhì)功能與性腺功能、提高機(jī)體免疫功能及促進(jìn)物質(zhì)代謝，對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)尚有興奮與抑制的雙向調(diào)節(jié)作用，從而闡明該方劑的抗衰老的藥理學(xué)機(jī)制。在臨床驗(yàn)證中，擬按補(bǔ)腎法則設(shè)計(jì)臨床觀察方案，針對(duì)其適應(yīng)癥為腎虛證，能在較短時(shí)間內(nèi)觀察到臨床療效。為中醫(yī)的抗衰老獨(dú)特理論，提供了一些研究思路和線索。,（二）正確領(lǐng)會(huì)

10、中藥新制劑的功能與主治的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)概念，選擇藥理試驗(yàn)方法 中藥新制劑大多數(shù)是中藥的復(fù)方制劑，其藥物的組成是根據(jù)中醫(yī)學(xué)理論為指導(dǎo)，有其組成原則和配伍法度?！秲?nèi)經(jīng)》即提出了制方的君臣佐使學(xué)說(shuō)，凡方應(yīng)君臣有序，各司其職，各味藥物都應(yīng)當(dāng)有明確的職責(zé)，相輔相成?！侗窘?jīng)》中把單味藥的應(yīng)用和藥與藥之間的配伍關(guān)系總結(jié)為7個(gè)方面，稱之為藥物的“七情”。 因此，以中醫(yī)藥學(xué)理論作指導(dǎo)組方的中藥新制劑，能產(chǎn)生更好的治療效果，以適應(yīng)比較復(fù)雜的病證

11、。按中醫(yī)藥學(xué)理論組方的中藥新制劑，都有明確的功能和主治(適應(yīng)癥)，正確理解其現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的概念，有助于正確選擇藥理試驗(yàn)方法和指標(biāo)。,我國(guó)衛(wèi)生部制定發(fā)布的《新藥審批辦法》中“有關(guān)中藥部分的修訂和補(bǔ)充規(guī)定”，在藥理研究的技術(shù)要求中指出：“新藥第一、二、三類的主要藥效研究，應(yīng)能充分證實(shí)其主要治療作用，以及較重要的其他治療作用”。 例如主治痹證的中藥新制劑，中醫(yī)所稱的痹癥，類似于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的自身免疫性疾病的風(fēng)濕病范疇，諸如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕

12、性關(guān)節(jié)炎、強(qiáng)直性脊柱炎、骨性關(guān)節(jié)炎等，其中以類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎和風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎為多見(jiàn)。又如銀翹散(銀翹解毒丸、片)是來(lái)源于《溫病條辨》的著名方藥，用治太陰風(fēng)濕，溫?zé)?、溫疫、冬溫、初起，但熱，不惡寒，口渴者。本方是辛涼解表劑，主治外感風(fēng)熱及溫病初起，即類似于現(xiàn)代醫(yī)學(xué)的普通感冒、流感、肺炎、急性咽喉炎等感染性疾病。只有將中醫(yī)的“證”與“病”相結(jié)合(即辨證與辨病相結(jié)合)，并聯(lián)系臨床經(jīng)驗(yàn)綜合考慮，正確地領(lǐng)會(huì)中藥新,制劑的主治(適應(yīng)癥)的現(xiàn)代醫(yī)學(xué)概念，

13、才能制定出較好的主要藥效學(xué)試驗(yàn)方案，即選擇適當(dāng)?shù)乃幚碓囼?yàn)方法和指標(biāo)進(jìn)行研究，以充分證實(shí)其主要治療作用。 周遠(yuǎn)鵬等進(jìn)行銀翹解毒片的藥理研究時(shí)，選擇了抗炎、鎮(zhèn)痛、解熱、抗菌和抗病毒等試驗(yàn)方法進(jìn)行，能反映該藥的主要藥效學(xué)作用。 總之，制定中藥新制劑的主要藥效學(xué)研究的方案時(shí)，要使藥效學(xué)研究回答出3個(gè)問(wèn)題：（1）新藥是否有效；（2）為何有效；（3）新藥與現(xiàn)有同類藥物比較在作用性質(zhì)和強(qiáng)度方面的異同與優(yōu)劣。 必要時(shí)應(yīng)研究

14、什么物質(zhì)(藥物或成分)有效，以及藥物的配伍與相互影響與藥效的關(guān)系。,李連達(dá)認(rèn)為近年新藥的主要藥效學(xué)研究中常見(jiàn)的問(wèn)題是： （1）主要藥效學(xué)研究的方向與新藥的功用主治脫節(jié)，藥證(病)不符，例如某種藥物功能養(yǎng)血生血，主治血虛證，而藥效學(xué)研究卻側(cè)重于耐缺氧、免疫、抗炎等研究，對(duì)血液系統(tǒng)、造血功能的影響，卻未做研究。藥效學(xué)研究結(jié)果不能說(shuō)明新藥的功能主治。在科研設(shè)計(jì)上有原則性錯(cuò)誤； （2）主要藥效學(xué)研究的方向與新藥的功能主治基本相符，但具體

15、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目選擇欠妥，不夠系統(tǒng)、全面，主要實(shí)驗(yàn)少，輔助實(shí)驗(yàn)多，核心實(shí)驗(yàn)少，外圍實(shí)驗(yàn)多，研究結(jié)果能夠說(shuō)明一定問(wèn)題，卻不足以充分證明新藥的主要功能主治。例如治療冠心病的藥物僅做耐缺氧及動(dòng)脈條實(shí)驗(yàn)，清熱解毒藥僅做體外抑菌實(shí)驗(yàn)等；,（3）研究方向及實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目基本符合要求，但實(shí)驗(yàn)方法不科學(xué)，觀測(cè)指標(biāo)不準(zhǔn)確或無(wú)特異性，結(jié)果不可靠，難以確證藥。由于中藥新制劑的研制中，問(wèn)題較多，難度大，要求高。為了提高新藥研究質(zhì)量與科研水平，我國(guó)衛(wèi)生部組織專家編寫(xiě)各種新藥(

16、中藥)研制的指導(dǎo)原則，使研制工作更加規(guī)范化、標(biāo)準(zhǔn)化。三、觀測(cè)指標(biāo)的選擇 選擇客觀可靠的觀測(cè)指標(biāo)，才能準(zhǔn)確無(wú)誤地反映藥物對(duì)實(shí)驗(yàn)對(duì)象的影響。在選擇試驗(yàn)方法時(shí)應(yīng)同時(shí)考慮選擇何種觀測(cè)指標(biāo)的問(wèn)題，總的原則是應(yīng)選用特異性強(qiáng)、敏感性高、重視性好、客觀、定量、半定量的指標(biāo)進(jìn)行觀測(cè)。,（一）特異性 新藥藥效學(xué)研究主要針對(duì)其功能與主治，所選用的試驗(yàn)方法和觀測(cè)指標(biāo)一定要用專屬性好，特異性強(qiáng)，能反映治療疾病本質(zhì)的主要藥效學(xué)方法及觀測(cè)指標(biāo)

17、。 例如治療急性腦出血的中藥制劑，宜選擇膠原酶誘發(fā)動(dòng)物腦出血模型、動(dòng)物自體血腦內(nèi)注射造成腦血腫模型、動(dòng)物腦水腫模型、自發(fā)性高血壓卒中型(SHR/SP)大鼠腦出血模型。在這些疾病動(dòng)物模型上觀測(cè)藥物防治腦出血的作用。其主要指標(biāo)是：①動(dòng)物出現(xiàn)中風(fēng)時(shí)間及中風(fēng)后存活時(shí)間；②血壓增高的變化；③腦切片上觀測(cè)腦出血程度(面積)、腦出血吸收(修復(fù))程度、出血灶周圍神經(jīng)細(xì)胞受損程度、腦組織水腫程度、出血灶血管新生程度；④降顱內(nèi)壓作用；⑤腦組織能量代

18、謝等。只有在選擇這些最主要的藥效學(xué)試驗(yàn)及特異性高的觀測(cè)指標(biāo)的,基礎(chǔ)上，才有必要再對(duì)藥物的功能主治開(kāi)展一些相關(guān)藥效指標(biāo)試驗(yàn)，充分闡明其治療作用及其作用機(jī)理。如果治療急性腦出血的藥物僅進(jìn)行一系列活血化瘀藥效指標(biāo)測(cè)定，如抗血栓形成、抗血小板聚集、影響血小板機(jī)能，影響血液凝固－抗凝系統(tǒng)的多個(gè)環(huán)節(jié)等，甚至選用血小板中cAMP與cGMP等指標(biāo)，顯然這些指標(biāo)特異性不強(qiáng)。 （二）敏感性 選擇觀測(cè)指標(biāo)應(yīng)注意是否敏感性高，是否具有檢測(cè)可操作性和

19、可靠性。任何疾病，尤其在經(jīng)過(guò)藥物防治后，均有不同的變化，疾病的許多病理、生理指標(biāo)都可能出現(xiàn)不同的變化。一定應(yīng)在某項(xiàng)觀測(cè)指標(biāo)變化最明顯時(shí)，用最先進(jìn)的觀測(cè)手段(儀器)將其變化記錄下來(lái)。,如在觀測(cè)藥物對(duì)家兔實(shí)驗(yàn)性腦血腫治療作用的實(shí)驗(yàn)中，在腦血腫形成的1周以后，病變周圍炎性反應(yīng)開(kāi)始較為明顯減輕、膠質(zhì)細(xì)胞增生、單核細(xì)胞增多、神經(jīng)細(xì)胞水腫性減輕、神經(jīng)細(xì)胞尼氏小體出現(xiàn)等。如在病變形成的1周內(nèi)就進(jìn)行觀測(cè)，由于穿刺損傷的腦組織和注入的動(dòng)物自體血液混合于損

20、傷處，周圍腦組織水腫等病變嚴(yán)重，病變修復(fù)過(guò)程的各項(xiàng)指標(biāo)均不易明顯觀測(cè)出來(lái)，不能靈敏和可靠地觀測(cè)到藥物的作用。,（三）重現(xiàn)性 選擇的實(shí)驗(yàn)觀測(cè)指標(biāo)應(yīng)穩(wěn)定，重現(xiàn)性好，結(jié)果才可靠，若重現(xiàn)性差，應(yīng)分析其原因。在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，諸多因素均可影響觀測(cè)指標(biāo)的重現(xiàn)性，如動(dòng)物(品種、體重、性別不同)、模型復(fù)制方法、實(shí)驗(yàn)室溫度、濕度、噪音、儀器性能、實(shí)驗(yàn)人員操作技術(shù)能力的差異等，均可引起試驗(yàn)指標(biāo)數(shù)值大小出現(xiàn)差異。實(shí)驗(yàn)指標(biāo)若重現(xiàn)性差，其結(jié)果肯定不可靠，不能

21、作為試驗(yàn)藥物有效性評(píng)價(jià)的指標(biāo)。,（四）客觀性 選擇的觀測(cè)指標(biāo)應(yīng)能客觀反映藥物的藥效作用，盡量不用主觀的，似是而非的指標(biāo)。尤其在觀測(cè)動(dòng)物生理機(jī)能(如心率、呼吸頻率、清醒動(dòng)物血壓、尿量等)指標(biāo)，易受實(shí)驗(yàn)環(huán)境、條件等許多因素的影響，更應(yīng)注意假性結(jié)果的出現(xiàn)。在避免多種因素影響的前提下，盡量使用先進(jìn)儀器進(jìn)行測(cè)量工作，盡量避免主觀的、簡(jiǎn)單的檢測(cè)手段。例如采用光電監(jiān)測(cè)記錄裝置觀測(cè)藥物對(duì)體外培養(yǎng)心肌細(xì)胞搏動(dòng)的速率、節(jié)律和強(qiáng)度的影響，較用肉眼觀察

22、其變化更為客觀和精確。,（五）定量、半定量 在評(píng)價(jià)藥物作用和療效的觀測(cè)指標(biāo)時(shí)，應(yīng)盡量選擇能定量或半定量的觀測(cè)指標(biāo)。應(yīng)用先進(jìn)的科研儀器，能客觀定量地記錄實(shí)驗(yàn)指標(biāo)的變化。如采用核磁共振成像技術(shù)或晶體圖像計(jì)算機(jī)系統(tǒng)，能客觀、定量評(píng)價(jià)藥物防治白內(nèi)障的療效。再如在觀測(cè)中藥制劑治療膠原酶誘發(fā)大鼠腦出血模型的試驗(yàn)中，為了科學(xué)評(píng)價(jià)藥物保護(hù)腦神經(jīng)細(xì)胞的作用，我們采用將顯微鏡下將圖像用電腦“圖像分析系統(tǒng)”和“MIAS-2000圖形分析儀”處理圖像資

23、料，能定量地測(cè)定用藥治療動(dòng)物和模型對(duì)照動(dòng)物腦組織切片、最大出血面積、肉芽組織面積及固定位置在相同面積的神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量和神經(jīng)細(xì)胞胞質(zhì)中虎斑小體(尼氏小體)的含量。尼氏小體分布于神經(jīng)細(xì)胞胞體及樹(shù)突內(nèi)，其機(jī)能與神經(jīng)元的新陳代謝特別與胞質(zhì)中的蛋白質(zhì)的合成有關(guān)。神經(jīng)元受,損害時(shí)尼氏小體很快溶解或消失。以往測(cè)量尼氏小體含量的方法僅用肉眼觀察根據(jù)尼氏小體染色深淺、色斑大小分級(jí)判定，不能定量測(cè)定，主觀性判斷誤差大。四、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物與疾病動(dòng)物模型（一）醫(yī)學(xué)

24、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的分級(jí)（四級(jí)） 一級(jí)：為普通動(dòng)物(CV)，要求必須不帶有人獸共患病的病原體及體外寄生蟲(chóng)。 二級(jí)：為清潔動(dòng)物(CL) ，要求在CV的基礎(chǔ)上，還須不帶有動(dòng)物傳染病的病原體。 三級(jí)：為無(wú)特定病原體動(dòng)物(SPF)，要求在CL基礎(chǔ)上還須不帶有干擾實(shí)驗(yàn)的微生物。 四級(jí)：為無(wú)菌動(dòng)物和悉生動(dòng)物。無(wú)菌動(dòng)物 (GF) 要求不帶有任何用現(xiàn)有的方法可以檢出的微生物。悉生動(dòng)物(GN)要求在無(wú)菌動(dòng)物體上植入一種或數(shù)種已知的微

25、生物。,（二）動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的優(yōu)點(diǎn) 1.動(dòng)物實(shí)驗(yàn)可以把人體上非常復(fù)雜的問(wèn)題簡(jiǎn)單化，可以進(jìn)行各種因素的細(xì)微探討，而這些是臨床研究難于做到的。 臨床試驗(yàn)中，病人的年齡、性別、體重、遺傳、病情程度、精神因素、生活條件、活動(dòng)范圍、病人對(duì)醫(yī)護(hù)人員的信賴程度及合作程度，都難于控制一致。在治療時(shí)間上，因病人是陸續(xù)發(fā)病、陸續(xù)進(jìn)入試驗(yàn)，逐漸積累的試驗(yàn)結(jié)果資料，前后可能摻入不少干擾因素，有時(shí)難以區(qū)分，會(huì)影響試驗(yàn)結(jié)果。在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，動(dòng)物的品種、性別

26、、年齡、體重、活動(dòng)性、健康狀態(tài)、甚至遺傳和微生物等方面均可控制一致。實(shí)驗(yàn)室的條件如溫度、濕度、光線、聲音、動(dòng)物的飲食也可控制一致。即動(dòng)物實(shí)驗(yàn)可在各組動(dòng)物(給藥組、陽(yáng)性藥物對(duì)照組、陰性對(duì)照組)條件一致的情況下觀察比較,藥物的作用和毒理。這樣實(shí)驗(yàn)得出的結(jié)果較可靠，可比性強(qiáng)，可比較藥物劑量不同的效應(yīng)(即量效關(guān)系)以及比較同類型藥物的作用強(qiáng)度或效價(jià)。 2.動(dòng)物試驗(yàn)可觀察藥物的長(zhǎng)期療效或毒性，干擾的因素較少，而病人難于做到。 如病人多

27、吃或少吃藥物，病人自動(dòng)停藥，病人另外求醫(yī)，病人又患其他疾病等，可影響療效和毒性評(píng)定。 3.臨床上潛伏期長(zhǎng)或病程長(zhǎng)的疾病，研究周期很長(zhǎng)。用動(dòng)物復(fù)制疾病模型，可以大大縮短其潛伏期或病程。 例如腫瘤和遺傳性疾病等。動(dòng)物實(shí)驗(yàn)從而,有力地推動(dòng)了人類疾病的病因?qū)W、發(fā)病學(xué)和防治方法的研究，其病理變化以及研究藥物的防治作用。 4.臨床上平時(shí)不易遇到的疾病。 如放射病、毒氣中毒等，應(yīng)用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)則可隨時(shí)進(jìn)行研究，其病理變化以及研究藥

28、物的防治作用。,（三）常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在藥效學(xué)研究中的應(yīng)用1.小鼠：小鼠是實(shí)驗(yàn)室最常用的一種動(dòng)物。小鼠屬于脊椎動(dòng)物門，哺乳綱，嚙齒目，鼠科，小鼠屬動(dòng)物。（1）小鼠適合用于需要用大量動(dòng)物的試驗(yàn)，例如藥物篩選、半數(shù)致死量測(cè)定、藥物效價(jià)比較等。（2）小鼠對(duì)多種病原體具有易感性，適合于研究感染血吸蟲(chóng)、瘧原蟲(chóng)、馬錐蟲(chóng)、流行性感冒、蛇毒、腦炎、狂犬病、鉤體病和一些細(xì)菌感染性疾病。（3）小鼠已廣泛地用于腫瘤和白血病的研究，選用小鼠的各種自發(fā)性腫瘤

29、，或用人工移植性腫瘤，或用化學(xué)致癌物誘發(fā)小鼠腫瘤模型，進(jìn)行腫瘤病因?qū)W、發(fā)病學(xué)和藥物防治研究。如C3H小鼠自發(fā)乳腺癌高達(dá)90%，AKR小鼠白血病自發(fā)率很高。小鼠自發(fā)腫瘤從腫瘤發(fā)生學(xué)上來(lái)看，,與人體腫瘤接近，進(jìn)行藥物篩選比移植性腫瘤可更為理想。（4）小鼠繁殖能力很強(qiáng)，妊娠期僅21天，生長(zhǎng)速度很快，所以很適合避孕藥和營(yíng)養(yǎng)學(xué)實(shí)驗(yàn)研究。（5）鎮(zhèn)咳、祛痰、鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜、止血、益智及免疫功能等藥效學(xué)研究。2.大鼠：豚鼠屬哺乳綱，嚙齒目，鼠科、大

30、鼠屬動(dòng)物。（1）大鼠無(wú)膽囊，肝臟分泌的膽汁通過(guò)總膽管而進(jìn)入十二指腸，常用大鼠作膽管插管收集膽汁觀察藥物的利膽作用。（2）大鼠是研究降壓藥及檢測(cè)升壓物質(zhì)含量的,常用動(dòng)物。應(yīng)用遺傳學(xué)培育成功的自發(fā)性高血壓大鼠(SHR)、腦卒中易感型自發(fā)性高血壓大鼠(SHRsp)、糖尿病型和肥胖型SHR、新西蘭種高血壓大鼠(GHR)、米蘭高血壓種大鼠(MHR)以及鹽敏感性高血壓大鼠，也是研究降壓藥常用的高血壓病理模型。 （3）大鼠又是制造發(fā)熱病理模型

31、和踝關(guān)節(jié)腫模型的常用動(dòng)物。3.豚鼠：豚鼠屬哺乳綱、嚙齒目，豚鼠科動(dòng)物，又名天竺鼠、海豬、荷蘭豬。 （1）豚鼠對(duì)組織胺極敏感，很適合做平喘藥和抗組織胺藥的研究。,（2）豚鼠對(duì)人型結(jié)核桿菌具有高度的敏感性，常用于抗結(jié)核病藥物的研究。豚鼠易于過(guò)敏，是研究抗過(guò)敏反應(yīng)藥物的常用動(dòng)物，如給豚鼠注射馬血清很容易復(fù)制成過(guò)敏性休克的動(dòng)物模型。（3）豚鼠和家兔的皮膚對(duì)毒物刺激反應(yīng)靈敏，常用于藥物對(duì)皮膚的刺激性及過(guò)敏性試驗(yàn)。（4）豚鼠的耳窩管對(duì)聲

32、波極為敏感，常用豚鼠作內(nèi)耳疾病模型及聽(tīng)力損害的模型。（5）豚鼠體內(nèi)不能合成維生素C，對(duì)維生素C缺乏十分敏感，是目前唯一用于研究實(shí)驗(yàn)性壞血病的動(dòng)物。,4.家兔：家兔屬哺乳綱、嚙齒目、兔科，草食性哺乳動(dòng)物。（1）復(fù)制高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化癥模型（喂食膽固醇）：與人類的病變基本相似，而大鼠或雞模型與人類病變相比，則差異較為突出。（2）避孕藥研究：成年雌兔是誘發(fā)性排卵動(dòng)物，排卵的時(shí)間可準(zhǔn)確判定。（3）復(fù)制角膜炎癥模型及角膜瘢痕模型。（

33、4）研究解熱藥物和檢查熱原：家兔體溫變化十分靈敏，最易復(fù)制發(fā)熱的動(dòng)物模型，且發(fā)熱反應(yīng)典型、恒定，是的動(dòng)物。 （5）用家兔皮膚觀察毒物、藥物、化妝品等對(duì)皮膚局部作用的影響。,5.貓 （1）降壓藥研究：貓的循環(huán)系統(tǒng)發(fā)達(dá)、血壓穩(wěn)定、對(duì)藥物反應(yīng)靈敏，且與人基本一致，是研究的常用動(dòng)物。特別適合于藥物對(duì)循環(huán)系統(tǒng)作用機(jī)理的分析。（2）鎮(zhèn)咳藥研究：貓?jiān)谡Ｇ闆r下很少咳嗽，但受到電刺激、機(jī)械刺激或化學(xué)刺激后易誘發(fā)咳嗽，是的常用動(dòng)物。 6.狗：B

34、eagle犬（1）藥物長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)：狗也是常用動(dòng)物之一。（2）復(fù)制心血管疾病模型：失血性休克、感染中毒性休克、急性心肌缺血、急性心肌梗塞、犬心臟血流動(dòng)力學(xué)試驗(yàn)（抗休克藥、抗心絞痛藥、強(qiáng)心藥）。（3）降壓藥研究：狗是急性降壓試驗(yàn)和復(fù)制腎性高血壓模型進(jìn)行高血壓實(shí)驗(yàn)治療的常用動(dòng)物。,五、受試藥物 在中藥新制劑的研究工作中，首先要由藥劑學(xué)等科學(xué)工作者研制出有效、安全、性質(zhì)穩(wěn)定和使用方便的中藥新制劑來(lái)，該制劑的生產(chǎn)工藝科學(xué)

35、，適合于工業(yè)生產(chǎn)，并制定有質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)以控制其質(zhì)量，其劑型應(yīng)與臨床研究用藥基本相同。提供這樣制備的中藥新制劑再進(jìn)行主要藥效學(xué)、一般藥理、藥代動(dòng)力學(xué)、毒理學(xué)及臨床療效研究。在整個(gè)研究過(guò)程中，各學(xué)科始終是相互滲透、密切聯(lián)系的，各學(xué)科研究工作者應(yīng)密切配合，相互協(xié)作，彼此促進(jìn)。 （一）基本要求 受試藥物應(yīng)處方固定，組成處方的各味藥材經(jīng)過(guò)品種鑒定，生產(chǎn)工藝基本定型，質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)及穩(wěn)定性試驗(yàn)基本符合要求，與臨床用藥基本相同的劑型與質(zhì)量。

36、,凡是藥材未經(jīng)鑒定，處方、生產(chǎn)工藝、質(zhì)量、劑型等尚未固定，或有變動(dòng)者，不宜用作藥效學(xué)試驗(yàn)，其結(jié)果也不能用作新藥有效性評(píng)價(jià)的根據(jù)。（二）具體要求 1.消化道給藥：包括灌胃、胃管、十二指腸給藥等，可用制劑或提取物進(jìn)行藥效學(xué)試驗(yàn)。 2.注射給藥及試管內(nèi)給藥：應(yīng)是化學(xué)純品或精制的中藥制劑。 3.外用藥：包括擦劑、洗劑、貼劑、膏藥等。一類是用于治療體表或局部疾患；另一類是局部用藥治療遠(yuǎn)隔部位或全身

37、性疾患，如局部或穴位貼藥。兩者均可用制劑或中藥提取物，應(yīng)盡量進(jìn)行透皮吸收試驗(yàn)。,4.其他：眼、耳、鼻、吸入劑及體腔給藥（如直腸、陰道、氣管內(nèi)、腹腔、胸腔等給藥）。供拭藥物的要求基本與注射劑相同。六、陽(yáng)性對(duì)照藥物 陽(yáng)性對(duì)照藥物可選用藥典收載或正式批準(zhǔn)生產(chǎn)的中藥或西藥，選用的藥物應(yīng)力求與新藥的主治相同，功能相似，劑型及給藥途徑相同者。 （1）可檢查試驗(yàn)方法及觀測(cè)指標(biāo)的可靠性，應(yīng)有“陽(yáng)性” 作用結(jié)果。 （2）評(píng)價(jià)新藥與

38、陽(yáng)性對(duì)照藥物(已知同類藥)在作用強(qiáng)度、發(fā)生作用快慢、維持作用時(shí)間等方面的優(yōu)劣和特點(diǎn)。,六、給藥劑量與給藥途徑（一）給藥劑量 給藥劑量就是用藥的份量。在一定的劑量范圍內(nèi)，藥物的作用與給藥劑量呈正比例關(guān)系變化。即劑量愈大，藥物在機(jī)體內(nèi)的濃度愈高，作用也愈強(qiáng)。劑量過(guò)小，不出現(xiàn)作用；劑量過(guò)大，超過(guò)一定范圍，治療作用不再增加，而常出現(xiàn)不良反應(yīng)或毒性反應(yīng)，直至引起死亡。在中藥新制劑的藥效和毒性研究中，給藥劑量是一個(gè)重要的概念。祖國(guó)

39、醫(yī)學(xué)對(duì)用藥劑量是比較講究的，前人說(shuō)“中醫(yī)不傳之秘在用量上”。在中藥復(fù)方中，常因1種藥物劑量的增減，其作用就會(huì)向另一方面轉(zhuǎn)化，其適應(yīng)癥就會(huì)不同。,如桂枝湯中，（1）桂枝和白芍的用量相等，有調(diào)和營(yíng)衛(wèi)、解肌的功效，主治太陽(yáng)中風(fēng)，頭痛發(fā)熱，汗出惡風(fēng)等證。（2）而桂枝加芍藥湯中，白芍的用量比桂枝多1倍，就成為治太陽(yáng)病誤下而引起的腹?jié)M時(shí)痛的藥方；（3）如果重加桂枝，就成了解肌散寒，降逆平?jīng)_的藥方了。 又如厚樸三物湯、小承氣湯和厚樸大黃湯這3

40、個(gè)藥方都是厚樸、枳實(shí)和大黃3味藥物組成的。因3藥的用量在各方中不同，不僅方名不同，而且治證也不同。 在中藥新制劑的藥效學(xué)研究中選擇適合的給藥劑量是很重要的。實(shí)驗(yàn)者總希望得到陽(yáng)性的試驗(yàn)結(jié)果，有時(shí)將藥物劑量及濃度用得很高，往往就得出了該藥物具有多種藥理作用的結(jié)果，,尤其是一些離體器官試驗(yàn)，在較高濃度下才出現(xiàn)的作用，與整體條件下的結(jié)果常有較大差別，值得注意。中藥新制劑中大多數(shù)含天然藥物，其中大多為植物藥，含有多種有效成分，甚至有效物質(zhì)

41、可能僅為微量，如按化學(xué)藥物那樣去嚴(yán)格規(guī)定最小有效量、極量、最小中毒量等往往是困難的。 臨床前藥效研究時(shí)人體的用藥劑量還沒(méi)有取得，因而在一定劑量下所取得的藥理作用到底有無(wú)實(shí)際治療價(jià)值還無(wú)法確定。在臨床試用時(shí)劑量的選擇也很重要，藥物的劑量與臨床療效也有密切關(guān)系。如一葉秋堿，曾因?yàn)閯┝窟x擇不當(dāng)，其對(duì)小兒麻痹后遺癥的療效被否定。后來(lái)，研究人員深入實(shí)踐，加大劑量，并采取了穴位注射，獲得較好療效。又如羥基喜樹(shù)堿，,經(jīng)動(dòng)物試驗(yàn)的毒性較大，最初

42、臨床試用時(shí)不敢應(yīng)用較大劑量，只用0.5～1mg，不顯效，后來(lái)發(fā)現(xiàn)在人身上其毒性較喜樹(shù)堿低，用至4mg甚至5～10mg每天靜注1次而顯效。又如用補(bǔ)骨脂素治療口服避孕藥引起的月經(jīng)過(guò)多，開(kāi)始用40mg以下，不顯效，用至60mg才收到滿意效果?？梢?jiàn)藥物劑量對(duì)藥效和臨床療效的研究與評(píng)價(jià)都是一個(gè)值得注意的重要問(wèn)題。 在藥效學(xué)試驗(yàn)中，劑量-藥效關(guān)系（量效關(guān)系）常以表現(xiàn)出來(lái)，有時(shí)甚至相反。例如文獻(xiàn)報(bào)道：小劑量（2mg/日）甘草甜素：使動(dòng)脈粥樣硬化

43、家兔的動(dòng)脈粥樣硬化程度減輕，血膽固醇含量降低；大劑量（20mg/日）能抑制大動(dòng)脈及冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)展；更大劑量（40mg/日）時(shí)反而無(wú)效。,又如：一種含有白術(shù)的治療“腸激惹綜合征” 的復(fù)方中藥制劑，藥效試驗(yàn)小劑量具有“止瀉”作用，但大劑量反而有“致瀉” 作用。由于白術(shù)在低濃度0.1μmol/L對(duì)離體豚鼠回腸有抑制作用；但在較大濃度1～10μmol/L以上時(shí)則呈現(xiàn)興奮作用，并呈量效關(guān)系變化。（二）給藥途徑 中藥新制

44、劑的藥效學(xué)試驗(yàn)要求給藥途徑應(yīng)與臨床相同，如確有困難，也可選用其他給藥途徑進(jìn)行試驗(yàn)，但應(yīng)說(shuō)明原因。急性毒性試驗(yàn)進(jìn)行半數(shù)致死量(LD50)測(cè)定或最大給藥量（最大耐受量）測(cè)定時(shí)，應(yīng)選用擬推薦臨床試驗(yàn)的給藥途徑，水溶性好的藥物還應(yīng)測(cè)定注射給藥的LD50。而長(zhǎng)期毒性試驗(yàn)則要求給藥途徑應(yīng)與推薦臨床試驗(yàn)的給藥途徑相一致。,不同的給藥途徑對(duì)藥物的吸收、分布、代謝和排泄都有很大影響，因而常常能影響藥物的作用強(qiáng)度，有時(shí)甚至影響到藥物作用的有無(wú)、作用部位和作

45、用性質(zhì)等。硫酸鎂是一個(gè)典型的例子，由于給藥途徑不同，其藥理作用和適應(yīng)癥不同。硫酸鎂口服給藥后，發(fā)揮導(dǎo)瀉作用和利膽作用，用于治療便秘或膽囊炎等。如采用肌肉注射或靜脈給藥，則能抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)，有鎮(zhèn)靜止痙作用，并有橫紋肌及血管平滑肌馳緩、舒張周圍血管及降低血壓的作用，而用于子癇、破傷風(fēng)、高血壓腦病、尿毒癥及低鎂血癥的治療。此外，硫酸鎂靜脈給藥，還可使心室復(fù)極趨于一致，用于尖端扭轉(zhuǎn)型室速，尤適用于高血壓、心室激惹、不宜用異丙腎上腺素又不便電刺