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文檔簡(jiǎn)介
1、指環(huán)蟲(chóng)引起的魚(yú)類(lèi)寄生蟲(chóng)病是魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖中最常見(jiàn)的病害之一,此病流行廣、傳播快、危害大,其發(fā)病率正在逐年上升。目前,國(guó)內(nèi)外對(duì)此病的防治主要通過(guò)人藥、獸藥和農(nóng)藥等化學(xué)藥物,長(zhǎng)期使用此類(lèi)藥物帶來(lái)了環(huán)境污染、藥物殘留、耐藥性等一系列問(wèn)題。從植物中尋找新的殺滅指環(huán)蟲(chóng)活性物質(zhì)或藥物前體,不僅有利于指環(huán)蟲(chóng)病的防治,還是有效創(chuàng)制新藥的經(jīng)濟(jì)、快捷途徑,而且也是對(duì)植物資源的合理開(kāi)發(fā)與利用。為此本研究進(jìn)行了殺蟲(chóng)活性植物篩選、活性部位篩選、殺蟲(chóng)活性成分跟蹤分離、波
2、譜分析與結(jié)構(gòu)解析等研究,得到了以下結(jié)果:
實(shí)驗(yàn)一殺蟲(chóng)活性植物的篩選:通過(guò)藥效試驗(yàn),測(cè)定了20種植物提取物對(duì)指環(huán)蟲(chóng)的殺蟲(chóng)活性。試驗(yàn)結(jié)果表明:48h各種植物提取物對(duì)中型指環(huán)蟲(chóng)的殺滅率分別為:鴉膽子98%;重樓、七葉樹(shù)、龍葵、膽南星、香薷、合歡80%以上;紫花地丁、姜黃、木鱉子、木賊、獨(dú)活、鶴虱50%~80%;馬鞭草、扁桃、南瓜籽、蒼耳20%~50%;在1000mg/L范圍內(nèi),前胡、鵝不食草、射干殺蟲(chóng)活性不明顯。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知,
3、鴉膽子具有最佳的殺蟲(chóng)活性。
實(shí)驗(yàn)二鴉膽子殺滅指環(huán)蟲(chóng)活性部位的研究:分別用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇和水,等極性不同的溶劑對(duì)鴉膽子進(jìn)行回流提取,并測(cè)定各提取物的殺指環(huán)蟲(chóng)活性。結(jié)果顯示:三氯甲烷提取物、乙醇提取物和水提取物對(duì)指環(huán)蟲(chóng)有良好的殺蟲(chóng)活性,殺蟲(chóng)率均達(dá)到95%以上。乙醇提取物的殺蟲(chóng)率最高達(dá)到98%,石油醚提取物殺蟲(chóng)率為48.6%,乙酸乙酯提取物沒(méi)有殺蟲(chóng)效果。
實(shí)驗(yàn)三鴉膽子乙醇提取物對(duì)金魚(yú)的急性毒性試驗(yàn)
4、:通過(guò)試驗(yàn)發(fā)現(xiàn),鴉膽子乙醇提取物濃度為1500mg/L時(shí),作用48h后,對(duì)金魚(yú)開(kāi)始產(chǎn)生毒性作用,致死率為43.3%。24h、48h和96h時(shí)的LC0依次為1541.3、1500.3和1333.5mg/L,安全濃度為426.4mg/L。
實(shí)驗(yàn)四鴉膽子殺滅指環(huán)蟲(chóng)活性成分跟蹤分離與結(jié)構(gòu)鑒定:依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯和甲醇對(duì)鴉膽子的乙醇提取物進(jìn)行固液萃取,分別測(cè)定各萃取部分的殺蟲(chóng)效果,其中氯仿萃取物對(duì)指環(huán)蟲(chóng)殺滅效果最好,9
5、6.9%。采用硅膠柱層析法對(duì)鴉膽子殺滅指環(huán)蟲(chóng)活性成分進(jìn)行分離,依次用石油醚、石油醚:乙酸乙酯(50:1、25:1、10:1、5:1、2:1、1:1)、乙酸乙酯、乙酸乙酯:甲醇(10:1、5:1、2:1、1:1)、甲醇和水為洗脫體系進(jìn)行梯度洗脫,合并相似流分,得到10個(gè)流分組A~J,經(jīng)藥效測(cè)定C流分組具有殺蟲(chóng)活性。以石油醚:乙酸乙酯(2:1、1:1)、乙酸乙酯、乙酸乙酯:甲醇(5:1、2:1、1:1)、甲醇作為梯度洗脫系統(tǒng),對(duì)C流分組進(jìn)行
6、硅膠柱層析分離,得到6個(gè)流分組Ca~Ce,藥效測(cè)定Cb和Cd流分組具有殺蟲(chóng)活性。對(duì)Cb流分用熱甲醇和乙酸乙酯反復(fù)重結(jié)晶得無(wú)色梳妝晶體,命名為化合物Ⅰ。以乙酸乙酯、乙酸乙酯:甲醇(20:1、16:1、12:1、8:1、4:1)作為梯度洗脫系統(tǒng),對(duì)Cd流分進(jìn)行硅膠柱層析分離,得到7個(gè)流分組Cd1~Cd7,經(jīng)測(cè)定Cd3流分組具有殺蟲(chóng)活性。Cd3用甲醇和氯仿反復(fù)重結(jié)晶得無(wú)色短棒狀結(jié)晶體,命名為化合物Ⅱ?;衔铫駶舛葹?.5mg/L時(shí),殺蟲(chóng)率為9
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