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1、目的:鴉膽子油存在于鴉膽子果實(shí)內(nèi),其主要活性成分是油酸和亞油酸,是一類(lèi)具有抗腫瘤活性的化合物。鴉膽子油乳在臨床被廣泛應(yīng)用于多種惡性腫瘤的輔助治療;鴉膽子油乳的應(yīng)用可以激活凝血系統(tǒng),有活化血小板及促進(jìn)血栓形成的作用;鴉膽子油也能降低血脂水平,顯著增加局部?jī)?nèi)源性前列腺素E2(PGE2)水平,有間接抑制或增強(qiáng)血小板活化及血栓形成作用,因此鴉膽子油能抑制還是促進(jìn)血小板活化以及作用的機(jī)制尚有待于探討。而血小板膜上存在眾多活化受體,與相應(yīng)配體結(jié)合后
2、,通過(guò)信號(hào)-反應(yīng)藕聯(lián)引起血小板活化、聚集以及釋放反應(yīng)。本研究通過(guò)人洗滌血小板模型,比較分析鴉膽子油對(duì)不同致聚劑誘導(dǎo)的血小板活化反應(yīng)的影響,觀察鴉膽子油對(duì)血小板活化的抑制作用,并探討其可能機(jī)制。 材料與方法:25-35歲健康獻(xiàn)血員,10天內(nèi)未服用任何影響血小板的藥物,分為三組:丙酮對(duì)照組(0%鴉膽子油,g/g,A0),低劑量組(9%鴉膽子油,A1),高劑量組(22.5%鴉膽子油,A2)。采集肘靜脈血,ACD抗凝(全血9:1,v/v
3、),離心制成4.5×108/ml洗滌血小板懸液。以比濁法檢測(cè)腎上腺素、二磷酸腺苷(ADP)、花生四烯酸(AA)、膠原及凝血酶誘導(dǎo)的血小板最大聚集率,計(jì)算鴉膽子油對(duì)血小板聚集的抑制率,并觀察血小板聚集水平與鴉膽子油濃度的劑量依賴關(guān)系;以流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)鴉膽子油對(duì)5種致聚劑活化的血小板膜 P-選擇素(CD62p)及纖維蛋白原受體(FIB-R,CD41/CD61)表達(dá)的影響,計(jì)算對(duì)FIB-R表達(dá)的抑制率;以SDS-PAGE法觀察鴉膽子油對(duì)凝血酶
4、和ADP活化的血小板骨架系統(tǒng)肌動(dòng)蛋白聚合體的影響。 結(jié)果和結(jié)論:研究發(fā)現(xiàn)(1)A1和A2組5種致聚劑誘導(dǎo)的血小板最大聚集率明顯低于A0組,A2組血小板最大聚集率明顯低于A1組;A2組對(duì)血小板聚集的抑制作用顯著高于A1組;(2)5種致聚劑誘導(dǎo)的血小板最大聚集水平與鴉膽子油濃度呈顯著負(fù)相關(guān),鴉膽子油濃度越高,對(duì)血小板聚集水平抑制程度越大;(3)A1和A2組對(duì)血小板肌動(dòng)蛋白變化及CD62p表達(dá)的影響與A0組無(wú)明顯差別;(4)A1和A2
5、組都能顯著降低FIB—R表達(dá)水平,A2組顯著抑制FIB—R表達(dá),F(xiàn)IB—R水平的變化與鴉膽子油對(duì)血小板最大聚集水平的影響一致。由此得出以下結(jié)論: (1)鴉膽子油對(duì)各種致聚劑誘導(dǎo)的血小板聚集有抑制作用,這種抑制作用具有劑量依賴性。 (2)鴉膽子油對(duì)活化血小板肌動(dòng)蛋白的改變沒(méi)有影響,對(duì)活化血小板的收縮反應(yīng)沒(méi)有影響。 (3)鴉膽子油對(duì)活化血小板的釋放反應(yīng)沒(méi)有抑制作用。 (4)鴉膽子油抑制活化血小板膜纖維蛋白原受
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