鴉膽子油微乳的處方研究及質(zhì)量評(píng)價(jià).pdf

1、鴉膽子油是從苦木科植物鴉膽子的干燥成熟果實(shí)中提取而來，具有廣泛的抗腫瘤活性，可以抑制多種癌細(xì)胞增殖，且毒副作用很低。微乳具有增加藥物溶解度、延長藥物釋放時(shí)間、減小注射疼痛等優(yōu)點(diǎn)，是一種應(yīng)用前景良好的注射用載體。本課題通過對(duì)鴉膽子油相關(guān)性質(zhì)的考察，并借助偽三元相圖，著重研究了微乳處方和制備工藝，得到了乳化劑用量較小、增溶效果較好、質(zhì)量較穩(wěn)定的鴉膽子油微乳；借助粒徑/zeta 電位測(cè)定儀、氣相色譜儀等檢測(cè)手段，對(duì)鴉膽子油微乳進(jìn)行了質(zhì)量研究。

2、本課題旨在為水難溶性中藥成分制備成注射用微乳以及微乳走向生產(chǎn)和臨床應(yīng)用的可行性做出有益嘗試。 在研究中選用了注射用大豆磷脂、Cremophor EL、Cremophor RH、吐溫-80、波洛沙姆F68、Solutol HS等為乳化劑，無水乙醇、異丙醇、正丁醇、山梨醇、PEG200、PEG400、甘油等為助乳化劑，肉豆蔻酸異丙酯、中等鏈長脂肪酸三甘油酯（MCT）等為油相。分別選擇不同的乳化劑、助乳化劑及油相組合，運(yùn)用滴定法，初步

3、考察能形成微乳的處方。運(yùn)用滴定法在繪制偽三元相圖的基礎(chǔ)上來考察乳化劑、助乳化劑及油相等對(duì)微乳區(qū)面積和油相增溶量能力的影響，進(jìn)行乳化劑、助乳化劑和油相篩選。單一乳化劑體系中，Solutol HS15/山梨醇/肉豆蔻酸異丙酯/水體系能得到較大面積的微乳區(qū)域，且對(duì)油的增溶能力也較好。因此以Solutol HS15為乳化劑，山梨醇為助乳化劑，以肉豆蔻酸異丙酯為油相，對(duì)其配比Km 值(乳化劑和助乳化劑的質(zhì)量比)及乳化劑相與油相的比例對(duì)微乳區(qū)域面積

4、的影響進(jìn)行了研究，最終確定了微乳的處方為Solutol HS15：山梨醇：肉豆蔻酸異丙酯：鴉膽子油=27：9：9：5。隨后按照微乳處方和制備工藝，進(jìn)行了鴉膽子油微乳的制備，并對(duì)鴉膽子油微乳進(jìn)行了質(zhì)量研究，考察其外觀形態(tài)、粒徑及其分布、粘度、PH 值、電導(dǎo)率等理化常數(shù)。所制鴉膽子油微乳為外觀均一透明、淡藍(lán)色液體，平均粘度為平均粘度為5.5mm3·s-1，平均電導(dǎo)率為23.7μs·cm-1，pH為6.72。用激光粒度分析儀測(cè)定丹鴉膽子油微乳

5、粒徑及其分布情況，所制微乳平均粒徑為23.8 nm?？疾炝锁f膽子油微乳的稀釋穩(wěn)定性，所制微乳用雙蒸水、生理鹽水和5％葡萄糖注射液稀釋后未出現(xiàn)混濁，pH 值幾乎無變化。建立了氣相色譜法測(cè)定鴉膽子油微乳中油酸的含量，在0.115～0.575mg/mL 范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，(R2=0.9996，n=5)。用此法測(cè)得鴉膽子油微乳中油酸的平均含量為84.02mg/mL。運(yùn)用經(jīng)典恒溫法，以外觀、粒徑及其分布、含量等為考察指標(biāo)，對(duì)所制微乳的穩(wěn)定性做了

6、初步評(píng)價(jià)。40、50、60、70℃下放置8天，求出各溫度下的反應(yīng)速率常數(shù)，通過線性回歸，求出25℃下的反應(yīng)速率常數(shù)，得出其有效期約為568天，各指標(biāo)無顯著變化。初步穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，鴉膽子油微乳基本穩(wěn)定。然后對(duì)鴉膽子油微乳的藥效學(xué)和一些毒副作用進(jìn)行了研究。體外培養(yǎng)Hela細(xì)胞，給予不同濃度的鴉膽子油微乳及普通乳劑，作用不同的時(shí)間后，運(yùn)用MTT法檢測(cè)其抑癌率，并繪制抑癌率曲線。在光學(xué)顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài)，考察Hela細(xì)胞在鴉膽子油微乳及

7、普通乳劑處理前后細(xì)胞形態(tài)的變化。結(jié)果表明鴉膽子油微乳比普通乳劑的抑癌效果好，隨著藥物濃度升高，作用時(shí)間增長，抑癌率升高。Hela細(xì)胞經(jīng)鴉膽子油微乳處理后，細(xì)胞形態(tài)發(fā)生顯著改變，隨著作用時(shí)間的延長，細(xì)胞凋亡，在顯微鏡下可見細(xì)胞碎片。為新西蘭大白兔耳靜脈注射考察鴉膽子油微乳的血管刺激性，并與鴉膽子油乳比較，結(jié)果表明鴉膽子油微乳的血管刺激性較鴉膽子油乳的要小。豚鼠過敏性試驗(yàn)和體外溶血性實(shí)驗(yàn)都表明鴉膽子油微乳的安全性要比鴉膽子油乳的要好。