殺滅魚類指環(huán)蟲天然植物藥的篩選及其活性部位和活性成分研究.pdf

1、【目的】尋找殺滅魚類指環(huán)蟲殺蟲活性較高的植物源藥物，并進行其活性部位的篩選、殺蟲活性成分的初步跟蹤、分離和鑒定。
　　 【方法]1.對20種植物進行殺滅指環(huán)蟲的效果實驗，確定殺蟲活性較高、對魚相對比較安全、且用量也相對較低的獨活作為進一步的研究對象。
　　 2.制備感染指環(huán)蟲的金魚模型。分別用石油醚、乙酸乙酯、丙酮、乙醇提取獨活的有效成分，并檢測其殺滅指環(huán)蟲的生物活性。根據(jù)其殺蟲效果來確定最佳的活性部位。
　　

2、3.采用柱層析分離結(jié)合活性跟蹤的方法，通過并結(jié)合物理常數(shù)、薄層色譜(TLC)、氣相色譜-質(zhì)譜（GC-MS）、一般化學定性實驗等對其進行分類鑒定。
　　 [結(jié)果】1.在20種植物中，對指環(huán)蟲的最高殺滅率依次為：獨活為100％；除蟲菊為90％;兩面針、木通、苦樹皮為80％；走馬芹、半邊蓮、吐根、委陵菜為50％;草果、延胡索、藜蘆、斷腸草、白芷、山柰為30％-10％：在1000mg.L-1范圍內(nèi)，大風子、相思子、仙茅、水黃連、雷打草、

3、瓜蔞沒有明顯殺蟲活性。
　　 最佳殺蟲濃度從低到高依次為：木通為30mg.L-1；獨活為120mg.L-1;白芷為150mg.L-1；走馬芹為200mg.L-1;除蟲菊為240mg.L-1;兩面針為350mg.L-1；藜蘆為400mg.L-1；苦樹皮為500mg.L-1;延胡索為600mg.L-1;草果為700mg.L-1;山柰、斷腸草、半邊蓮、吐根為800mg.L-1。在測試濃度范圍內(nèi)，能夠?qū)е略囼灲痿~在48h死亡的如表2-2

4、所示，其中相思子、瓜萎、斷腸草、半邊蓮、吐根、委陵菜在1000mg.L-1時，試驗金魚仍然未見有死亡現(xiàn)象。
　　 2.獨活殺滅指環(huán)蟲活性部位：乙醇提取物的最佳殺蟲濃度為120mg.L-1（按生藥計），殺蟲率為100％;丙酮提取物最佳殺蟲濃度為70mg.L-1（按生藥計），但最高殺蟲率為72.0％；乙酸乙酯提取物的最佳殺蟲濃度為300mg.L-1（按生藥計），最高殺蟲率只有64.8％；而石油醚提取物的最佳殺蟲濃度為100mg.L-

5、1（按生藥計），最高殺蟲率僅為49.1％。
　　 3.根據(jù)2可知乙醇提取物對指環(huán)蟲具有最佳殺滅效果。采用硅膠柱層析法，以石油醚-乙酸乙酯(40:1、30:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1)，乙酸乙酯-甲醇(100:1、50:1、20:1、10:1、5；1、3:1、2:1、1:1、0；1和水洗柱)作為洗脫系統(tǒng)，進行梯度洗脫，TLC檢測，得到16個流分組A～P，經(jīng)藥效測定F流分和K流分組具有殺蟲活性，且F流分為

6、結(jié)晶體，TLC檢測為單點。以氯仿-甲醇(50:1,25:1,10:1,9:1,8:1,7:1,5:1,3:1,2:1,1:1，甲醇和水洗柱)作為洗脫系統(tǒng)，對K流分組進行硅膠柱層析分離，得到11個流分組K1～K11，經(jīng)藥效測定K1流分組具有殺蟲活性。以石油醚-乙酸乙酯（1:0、50:1、20:1、10:1、5:1、2:1、1:1、0:1、甲醇）作為洗脫系統(tǒng)，對K1流分進行硅膠柱層析分離，得到6個流分組K1.1～K1-6，其中經(jīng)藥效測定K1

7、.1和K1.2具有殺蟲活性，且K1-1為油性成分。以石油醚-氯仿(6:4、6:5、6:6、6:7、氯仿)作為洗脫系統(tǒng)，對K1-2進行梯度洗脫，得到4個流分組K1-2.1～K1-2-4，其中K1-2-3具有殺蟲活性，且為結(jié)晶物質(zhì)，TLC檢測為單點。F和K1-2-3的活性測定結(jié)果顯示，F(xiàn)48h的100％殺指環(huán)蟲濃度為1.6mg.L-1;K1-2-348h在濃度為5mg.L-1時，對指環(huán)蟲的殺滅率為74.4％;K1.148h在濃度為20mg.