殺菌植物篩選及其活性成分鑒定.pdf

1、農藥作為農業(yè)生產的重要投入物質,對農業(yè)發(fā)展和人類糧食供給作出了巨大的貢獻.然而化學農藥的過度使用引發(fā)了人們對環(huán)境和農產品安全的憂慮.研究開發(fā)低毒、高效、環(huán)境友好的新型生物農藥迫在眉睫.我國有豐富的藥用植物資源,以它們?yōu)檠芯繉ο?篩選出對植物病原真菌抑制效果較好的藥用植物,在活性追蹤指導下,對其主要抑菌成分進行分離純化和結構鑒定,為生物農藥的開發(fā)提供先導化合物.本文對28種藥用植物丙酮提取物抑制常見植物病原真菌效果進行篩選,對抑菌活性較好

2、,研究較少的藥用植物虎杖的主要抑菌成分在活性追蹤指導下進行分離純化和結構鑒定.研究結果如下:
　　1.根據中藥藥理選取有清熱解毒、驅風利濕以及驅蟲、殺蟲等功效的28種藥用植物,用丙酮浸提,以瓜果腐霉(Pythium aphanidermatum)、辣椒疫霉(Phytophthora capsici)、尖鐮孢菌(Fusarium oxysporium)、茄鐮孢菌(Fusarium solani)、灰葡萄孢(Botrytis cine

3、rea)、禾谷鐮孢菌(Fusarium graminearum)6種植物病原真菌為供試菌株,采用菌絲生長法對28種藥用植物的丙酮提取物進行了抑菌活性的測定.結果表明:丁香(Eugenia caryophyllata)對6種植物病原真菌的抑制率均達100％,烏梅(Armeniaca mume)、百部(Stemona sessilifolia)和木香(Aucklandia lappa)對5種植物病原真菌的抑制率均在70％以上.利用孢子萌發(fā)法

4、對抑菌效果好的藥用植物進一步研究,發(fā)現這幾種藥用植物對灰葡萄孢孢子萌發(fā)抑制率均在90％以上.
　　2.應用菌絲生長法,測定虎杖乙醇提取物對6種植物病原真菌的抑菌活性。粗提物濃度為1 g/L時,對6種植物病原真菌均有一定的抑菌活性,其中對P. aphanidermatum和P. capsici效果較好,抑制率為40.78％和40.65％.EC50實驗表明,虎杖乙醇提取物對P. capsici的抑菌活性最好,EC50為1.18 g/L

5、,對F. solani的活性次之,EC50為1.34 g/L.將虎杖乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯和正丁醇萃取,并對各萃取物進行活性測定.其中虎杖乙酸乙酯萃取物對6種植物病原真菌活性最高,且均高于乙醇浸膏,說明抑菌活性物質主要存在于乙酸乙酯萃取物中.
　　3.在活性追蹤指導下,通過薄層層析、硅膠柱層析和Sephadex LH-20葡聚糖凝膠柱層析對虎杖乙酸乙酯萃取物抑菌活性物質進行分離純化,得到編號為REd-5-a和REd-6-

6、d兩種主要的抑菌活性物質.REd-5-a對P. capsici和F. oxysporium的EC50分別為0.17 g/L和7.99 g/L.REd-6-d對P. capsici和F. oxysporium的EC50分別為0.009 g/L和0.013 g/L.REd-5-a為橙色針狀結晶,幾乎不溶于水,溶于乙醇及堿溶液.REd-6-d為白色晶體,難溶于水,易溶于乙醇,丙酮等有機溶劑.應用UV、IR、1H-NMR和13C-NMR等有機波