鴉膽子化學(xué)成分及生物活性研究.pdf

1、系統(tǒng)分析傳統(tǒng)藥用植物的化學(xué)成分，是發(fā)現(xiàn)具有生物活性先導(dǎo)化合物的重要途徑之一?？嗄究?Simaroubaceae)鴉膽子屬（Brucea）植物共有6種，主要分布在東半球熱帶地區(qū)，為灌木或小喬木，生于海拔950～1000m之間的石灰山疏林中。我國(guó)有2種，為柔毛鴉膽子和鴉膽子，均產(chǎn)自東南部、南部和西南部的福建、臺(tái)灣、兩廣、海南、貴州和云南等地。鴉膽子(Brucea javanica L.Merr)在我國(guó)民間主要以種子入藥，可清熱解毒，主要治療

2、痢疾、瘧疾，贅疣、雞眼及腫瘤等。
　　我們對(duì)鴉膽子進(jìn)行了系統(tǒng)的化學(xué)成分研究，并對(duì)得到的部分苦木素類化合物進(jìn)行了抑制腫瘤細(xì)胞增殖作用的活性評(píng)價(jià)。通過硅膠柱色譜、Sephadex LH-20柱色譜、RP-18柱色譜、半制備HPLC等方法，從鴉膽子種子乙醇提取物中分離得到30個(gè)化合物，通過波譜學(xué)技術(shù)將得到的化合物進(jìn)行鑒定為:12個(gè)苦木素類化合物:brusatol(1),bruceanic acid E(2),dehydrobrucein

3、e B(3),dehydrobrusatol(4),dehydrobruceantinol(5),dehydrobruceine A(6),bruceine B(7),bruceine D(8),bruceoside A(9),yadanzioside M(10),yadanzioside G(11),yadanzioside A(12);4個(gè)木脂素類化合物:cleomiscosin A(13)，cleomiscosin B(14)，c

4、leomiscosin C(15)，spicatolignan B(16);1個(gè)黃酮類化合物:luteolin(17);2個(gè)生物堿類化合物:aurantiamide acetate(18)，11-hydroxycanthin-6-one(19);4個(gè)甾體類化合物:β-sitosterol(20)，daucosterol(21)，stigmasterol-β-D-glycoside(22)，7-oxositosteryl-β-D-gluc

5、opyranoside(23);4個(gè)苯丙素類化合物:2,3-dihydroxy-1-(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propan-1-one(24),vanillin(25),vanillic acid(26)，hydroxybenzoic acid(27);兩個(gè)脂肪酸類化合物:laportoside A(28)，1-oleoyl-glycerol(29)，9，10-dihydroxystearic acid(3

6、0)。其中化合物16，18，22，23，24，28，29，30為首次從鴉膽子中分離得到。
　　采用MTT法檢測(cè)了部分化合物的腫瘤細(xì)胞增殖抑制活性，結(jié)果表明，苦木素類化合物1-8對(duì)A549，NCI-H292，MSTO-211H細(xì)胞株均表現(xiàn)出一定的細(xì)胞增殖抑制活性。其中化合物1具有很強(qiáng)的A549細(xì)胞增殖抑制活性(IC502.83μM);化合物3和5對(duì)NCI-H292和MSTO-211H細(xì)胞比較敏感，其IC50范圍在0.3～1.0μM;

7、化合物2，4，6-8，15對(duì)NCI-H292和MSTO-211有不同程度的劑量依賴性細(xì)胞增殖抑制活性，IC50范圍為0.47～19.1μM。
　　我們選擇化合物dehydrobruceine B(DHB)進(jìn)行了進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)研究。采用Annexin V/FITC-PI雙染法通過流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)結(jié)果表明，DHB可以誘導(dǎo)A549和NCI-H292細(xì)胞凋亡產(chǎn)生，進(jìn)一步研究結(jié)果表明，化合物DHB可以誘導(dǎo)細(xì)胞內(nèi)ROS的產(chǎn)生和線粒體膜電位的降低，這

8、提示該化合物可能通過作用于細(xì)胞線粒體引起腫瘤細(xì)胞凋亡。通過Western blot檢測(cè)Bcl-2家族部分成員的蛋白表達(dá)水平，結(jié)果發(fā)現(xiàn)DHB可以誘導(dǎo)促凋亡蛋白Bax的表達(dá)增加，抗凋亡蛋白Bcl-2、Bcl-xL表達(dá)的減少，細(xì)胞色素c釋放，凋亡執(zhí)行蛋白Caspase-3激活，從而啟動(dòng)細(xì)胞凋亡。此外，我們采用細(xì)胞實(shí)時(shí)檢測(cè)系統(tǒng)，檢測(cè)了DHB與順鉑(cisplatin)聯(lián)用對(duì)A549細(xì)胞增殖的影響，結(jié)果表明，DHB在幾乎不影響細(xì)胞生長(zhǎng)的低毒性濃度