雞4種艾美耳球蟲免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗交叉免疫保護(hù)性研究.pdf

1、雞球蟲病(Coccidiosis)是由艾美耳球蟲（Eimeria）引起的一種嚴(yán)重危害養(yǎng)禽業(yè)發(fā)展的寄生原蟲病。傳統(tǒng)的藥物防制方法存在耐藥性、藥物殘留等問題。而DNA疫苗具有保存時(shí)間長(zhǎng)，不涉及致病核酸序列，能誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生全面的免疫應(yīng)答等優(yōu)點(diǎn)。因而雞球蟲DNA疫苗的研究受到眾多研究者的關(guān)注，并獲得了很多對(duì)球蟲具有保護(hù)性的抗原基因。
　　 本實(shí)驗(yàn)室已從柔嫩艾美耳球蟲（E.tenella）、毒害艾美耳球蟲（E.necatrix）和堆型艾美

2、耳球蟲（E.acervulina）孢子化卵囊分別克隆得到免疫保護(hù)性抗原基因TA4、NA4和3-1E，并利用DNA重組技術(shù)成功構(gòu)建了免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-y、pVAX1.0-NA4-IL-2和pVAX1.0-3-1E-IFN-y，且試驗(yàn)表明這三種DNA疫苗對(duì)本種球蟲感染均具有較好的免疫保護(hù)作用。同時(shí)也已從巨型艾美耳球蟲（E.maxima）孢子化卵囊中克隆得到免疫保護(hù)性抗原基因EmTFP250的全長(zhǎng)8個(gè)片段，并

3、用DNA重組技術(shù)將各片段的pcDNA4.0連接成免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗，并證明各片段對(duì)巨型艾美耳球蟲都具有一定的免疫保護(hù)作用.本實(shí)驗(yàn)利用其中Em8片段構(gòu)建了免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2.
　　 將E.tenella免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-y經(jīng)腿部肌肉分別于14、21日齡兩次免疫雛雞，28日齡經(jīng)口接種新鮮的E.tenella、E.maxima、E.necatrix和E.acervu

4、lina孢子化卵囊5×104個(gè)/羽、10×104個(gè)/羽、5×104個(gè)/羽和10×104個(gè)/羽.7日后宰殺全部實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，分別作增重、存活率、腸道病變計(jì)分、腸道卵囊計(jì)數(shù)指標(biāo)測(cè)定，以抗球蟲指數(shù)(ACI)綜合判定其綜合免疫交叉保護(hù)性.結(jié)果表明，E.tenella DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFNy對(duì)E.maxima和E.acervulina感染有部分交叉免疫保護(hù)作用，對(duì)感染E.necatrix沒有交叉免疫保護(hù)作用.
　　 用上述

5、同樣的方法將E.maxima免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2對(duì)E.tenella、E.necatrix和E.acervulina感染的交叉免疫保護(hù)行進(jìn)行了研究.結(jié)果表明，E.maxima DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2對(duì)E.tenella感染有部分交叉免疫保護(hù)作用，對(duì)感染E.necatrix和E.acervulina沒有交叉免疫保護(hù)作用.
　　 用上述同樣的方法將E.necatrix免疫調(diào)節(jié)型DN

6、A疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2對(duì)E.tenella、E.maxima和E.acervulina感染的交叉免疫保護(hù)行進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，E.necatrix DNA疫苗pVAX1.0-NA4-IL-2對(duì)E.tenella、E.maxima和E.acervulina感染有部分交叉免疫保護(hù)作用.
　　 用上述同樣的方法將E.acervulina免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IFN-γ對(duì)E.tenella、E.

7、maxima和E.necatrix感染的交叉免疫保護(hù)行進(jìn)行了研究。結(jié)果表明，堆E.acervulina DNA疫苗pVAX1.0-3-1E-IFN-γ對(duì)E.tenella、E.maxima和具有部分交叉免疫保護(hù)作用，而對(duì)E.necatrix沒有交叉免疫保護(hù)作用.
　　 用上述同樣的方法將E.tenella免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-TA4-IFN-y、E.maxima免疫調(diào)節(jié)型DNA疫苗pVAX1.0-Em8-IL-2、