不結球白菜花色苷抗氧化功能及其合成調(diào)控分析.pdf

1、不結球白菜（Brassica campestris ssp.chinensis Makino）是一種蕓薹屬蔬菜，原產(chǎn)中國。紫色不結球白菜是近年育成的新品種，色彩艷麗，富含花色苷等抗氧化物質(zhì)，可以為人體提供所需的維生素和礦物質(zhì);另外，因其富含花色苷還具有良好的保健功能。目前，有關紫色不結球白菜保健功能和控制花色苷合成相關基因的研究鮮有報道。因此，本研究以6個不結球白菜品種為材料，比較品種間葉片色素含量和抗氧化活性的差異;篩選控制花色苷合成

2、的候選基因;并探討植物生長調(diào)節(jié)劑（水楊酸和脫落酸）、干旱、遮陰等脅迫處理對不結球白菜花色苷合成候選基因、總花色苷和總酚含量及抗氧化活性的影響。結果如下:
　　1、在不同葉色的白菜葉片中，紫色葉片總花色苷含量極顯著高于綠色葉片，類胡蘿卜素的含量無顯著差異，而蘇州青中葉綠素的含量和葉綠素a與葉綠素b的比值極顯著高于其他5個材料;以上結果證明，6個材料中總花色苷含量和葉綠素含量的差異是導致不同品種葉色呈色差異的主要原因。紫色葉片總酚含量

3、極顯著高于綠色葉片;紫色葉片DPPH自由清除率和FRAP抗氧化能力亦顯著高于綠色葉片;總花色苷和總酚含量與DPPH自由基清除率和FRAP抗氧化能力均存在極顯著相關性，總花色苷含量與總酚含量間也存在極顯著相關性;表明葉片總花色苷的含量在抗氧化活性中起著中作用。
　　2、在紫色葉片中，結構基因BrcF3H、BrcDFR和BrcANS表達極顯著高于綠色葉片，且表達量與總花色苷含量呈正相關。轉錄因子BrcGL3、BrcEGL3.1和Brc

4、TT8在所有材料中均有表達，其中，BrcTT8表達隨著總花色苷含量的增加而上調(diào);轉錄因子BrcMYB75只在深紫色NJZX1-3葉片中才表達;轉錄因子BrcTTG1在深紫色NJZX1-3中的表達要明顯高于蘇州青。表明BrcGL3、BrcEGL3.1、BrcTT8、BrcMYB75和BrcTTG1可能通過調(diào)節(jié)BrcF3H、BrcDFR和BrcANS的表達來影響不結球白菜中花色苷的積累。
　　3、花色苷合酶基因BrcANS的核苷酸和氨

5、基酸序列在NJZX1-3、NJZX1-0和大白菜中完全一致，其第211-307肽段具有2OG-Fe(Ⅱ)雙加氧酶家族基因的結構域。BrcANS蛋白與同科芥菜的同源性高達99％，進化關系亦與其最相近。在不結球白菜葉片中，BrcANS表達量與總花色苷含量呈正相關。BrcANS的mRNA在不結球白菜中存在組織特異性表達，即在葉片中高度表達，而在其他組織中表達較弱;另外，隨著葉齡的增大，紫色白菜葉片紫色變淺，BrcANS的表達量下降，且在紫色材

6、料和綠色材料間BrcANS的表達差異亦顯著減小;外源水楊酸(SA)、外源脫落酸(ABA)和干旱均正向調(diào)控BrcANS基因的表達，遮陰處理對BrcANS基因表達的調(diào)控可能存在不同的途徑。以上結果表明，BrcANS基因可能在其轉錄水平上調(diào)控葉片中紫色的形成，其表達受不同脅迫信號轉導調(diào)控途徑的影響。
　　4、在4種脅迫處理下，綠色材料NJZX1-0葉片中總花色苷含量都未檢測到。在處理前期，外源水楊酸(SA)和外源脫落酸(ABA)極顯著增

7、加紫色材料NJZX1-3葉片中總花色苷的含量，SA極顯著增加白菜葉片中總酚的含量，而ABA對總酚含量的影響不顯著;干旱處理能夠極顯著增加紫色材料葉片中總花色苷的含量，還可以增加白菜葉片中總酚的含量;遮陰處理顯著降低紫色葉片中總花色苷和總酚的含量;2種植物生長調(diào)節(jié)劑和干旱處理均會增強白菜葉片抗氧化活性，而遮陰處理顯著降低白菜葉片中抗氧化活性。在2種植物生長調(diào)節(jié)劑和干旱處理下，紫色葉片中總花色苷含量的變化均與BrcANS基因表達模式同步;而