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1、以17個(gè)不同基因型的不結(jié)球白菜為試材,采用游離小孢子培養(yǎng)方法,對(duì)影響小孢子成胚的因素,促進(jìn)小孢子胚進(jìn)一步發(fā)育成苗的方法以及小孢子植株倍性及其鑒定方法進(jìn)行了研究,建立了高效的不結(jié)球白菜游離小孢子胚誘導(dǎo)的技術(shù)體系。 研究表明,在不結(jié)球白菜初花期取2.0~3.0mm長(zhǎng)的花蕾最適合進(jìn)行培養(yǎng)。對(duì)花蕾4℃低溫預(yù)處理的最佳時(shí)間為12~24h:接種后小孢子在33℃高溫條件下預(yù)培養(yǎng)24~30h,可以大大提高胚狀體產(chǎn)量。NLN-13和1/2NLN-
2、13是小孢子培養(yǎng)的最佳培養(yǎng)基,對(duì)于產(chǎn)胚量低及難成胚的基因型,NB-13培養(yǎng)基更為適宜,外源激素、活性炭和甘露醇對(duì)小孢子胚發(fā)生及發(fā)育沒(méi)有明顯的促進(jìn)作用。在接種的17個(gè)基因型材料中,誘導(dǎo)成功率為71%,產(chǎn)胚量最高達(dá)到35.78個(gè)/蕾,冬性弱的材料產(chǎn)胚能力大于冬性強(qiáng)的材料。適于小孢子胚進(jìn)一步分化的培養(yǎng)基為B<,5>+GA<,3>0.1mg/L+蔗糖3%+瓊脂1.2%,在此培養(yǎng)基上子葉形胚狀體的出芽率最高達(dá)到85.24%;最適宜的生根培養(yǎng)基為M
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