黑加侖花色苷的抗氧化功能研究.pdf

1、本文采用DPPH法研究了加工處理因素對(duì)黑加侖花色苷提取物抗氧化能力的影響。通過紫外-可見吸收光譜、熒光光譜以及圓二色譜,研究比較了兩種糖苷結(jié)構(gòu)不同的花色苷與牛血清白蛋白(BSA)結(jié)合作用的機(jī)制,為從分子水平上研究花色苷在體內(nèi)發(fā)揮抗氧化能力的機(jī)制以及通過結(jié)構(gòu)修飾提高花色苷功能特性等提供理論基礎(chǔ)。利用 Langendorff離體心臟灌流技術(shù),研究了黑加侖花色苷提取物對(duì)大鼠離體心臟缺血再灌注(I/R)損傷的保護(hù)作用,揭示了黑加侖花色苷發(fā)揮抗氧

2、化能力保護(hù)心肌缺血再灌注損傷(MIRI)的機(jī)制。對(duì)于研究花色苷在體內(nèi)吸收、運(yùn)輸、代謝、發(fā)揮抗氧化功能以及研究開發(fā)花色苷保健食品等有著重要的意義。
　　本論文主要分為以下四個(gè)部分:
　　1.第一章綜述了花色苷的結(jié)構(gòu)、生理功能和抗氧化研究方法以及MIRI的機(jī)制和預(yù)防措施,對(duì)當(dāng)前黑加侖花色苷的研究進(jìn)展進(jìn)行了介紹。
　　2.第二章通過使用DPPH法研究了加熱溫度和食品添加劑對(duì)黑加侖花色苷提取物抗氧化能力的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,當(dāng)

3、溫度大于70℃時(shí),隨著時(shí)間的延長(zhǎng)黑加侖花色苷提取物DPPH清除率下降幅度較大,高溫導(dǎo)致黑加侖花色苷提取物抗氧化能力的急劇下降。蔗糖對(duì)黑加侖花色苷提取物具有一定的保護(hù)作用,能夠增強(qiáng)其抗氧化能力。低濃度的苯甲酸鈉能夠增強(qiáng)黑加侖花色苷提取物的抗氧化能力,而高濃度的苯甲酸鈉會(huì)導(dǎo)致黑加侖花色苷提取物抗氧化能力的降低。抗壞血酸會(huì)破壞黑加侖花色苷提取物的結(jié)構(gòu),導(dǎo)致黑加侖花色苷提取物抗氧化能力的嚴(yán)重降低。
　　3.第三章通過使用紫外-可見吸收光譜

4、、熒光光譜及圓二色譜研究了矢車菊素-3-O-葡萄糖苷(Cy-3-glc)、矢車菊素-3-O-半乳糖苷(Cy-3-gal)與牛血清白蛋白(BSA)相結(jié)合的作用機(jī)制。初步判斷出Cy-3-glc、Cy-3-gal與BSA的相互作用屬于靜態(tài)猝滅類型。熒光猝滅光譜顯示Cy-3-glc對(duì)BSA內(nèi)源熒光的猝滅率明顯大于 Cy-3-gal;Cy-3-glc與 BSA相互作用的結(jié)合能力大于 Cy-3-gal。熱力學(xué)參數(shù)的計(jì)算結(jié)果證明,Cy-3-glc、C

5、y-3-gal與BSA結(jié)合作用的作用力主要是氫鍵和范德華力,同時(shí)ΔG<0表明兩種花色苷與BSA之間的相互作用過程屬于自發(fā)的。競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合實(shí)驗(yàn)表明,Cy-3-glc、Cy-3-gal在BSA上的結(jié)合位點(diǎn)均處于site?。非輻射能量轉(zhuǎn)移理論的計(jì)算結(jié)果顯示,Cy-3-glc、Cy-3-gal與色氨酸殘基距離分別為2.56 nm和2.82 nm,表明BSA的熒光猝滅現(xiàn)象與非輻射能量轉(zhuǎn)移有一定的關(guān)系。同步熒光光譜、三維熒光光譜和紫外-可見吸收光譜的研

6、究結(jié)果表明,Cy-3-glc、Cy-3-gal與BSA之間發(fā)生了相互作用,而且使BSA的二級(jí)結(jié)構(gòu)也發(fā)生了相應(yīng)的變化。圓二色譜實(shí)驗(yàn)的結(jié)果進(jìn)一步表明,與Cy-3-glc、Cy-3-gal的結(jié)合作用使BSA二級(jí)結(jié)構(gòu)中的α-螺旋含量減少,β-折疊、β-轉(zhuǎn)角和無規(guī)則卷曲的含量有所增加。
　　4.第四章應(yīng)用Langendorff離體心臟灌流技術(shù)研究了黑加侖花色苷提取物對(duì)MIRI的保護(hù)作用。理化指標(biāo)的檢測(cè)結(jié)果表明,黑加侖花色苷提取物可降低心肌細(xì)