利多卡因?qū)PS誘導(dǎo)的肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:探討利多卡因?qū)?nèi)毒素誘導(dǎo)的大鼠肺泡Ⅱ型上皮細(xì)胞(AT-Ⅱ細(xì)胞)炎癥因子表達(dá)的影響。
   方法:成年雄性SD大鼠,體重180~200g,放血處死后提取AT-Ⅱ細(xì)胞,經(jīng)分離、純化、培養(yǎng)和鑒定后,隨機(jī)分為4組(n=6):空白對(duì)照組(C組)、LPS組、利多卡因+LPS(L+LPS組)、利多卡因組(L組),L+LPS組在給予LPS30min后加入利多卡因,LPS的終濃度為1ug/ml,利多卡因的終濃度為20ug/ml,各組分別在孵

2、育4h,12h,24h結(jié)束后用蛋白免疫印跡法(WesternBlot)檢測(cè)AT-Ⅱ細(xì)胞Toll樣受體4(TLR4),核轉(zhuǎn)錄因子-kB(NF-kB)蛋白表達(dá)水平,酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中腫瘤壞死因子-a(TNF-a),白細(xì)胞介素-6(IL-6)的水平。
   結(jié)果:1.WesternBlot結(jié)果顯示,C組AT-Ⅱ細(xì)胞上有TLR4蛋白的表達(dá),但表達(dá)量較低;LPS組AT-Ⅱ細(xì)胞在4h,12h,24h點(diǎn)TLR4及N

3、F-kB蛋白的表達(dá)量明顯高于C組(P<0.05);與LPS組比較,L+LPS組AT-Ⅱ細(xì)胞4h,12h,24h點(diǎn)TLR4及NF-kB蛋白表達(dá)明顯下降(P<0.05),C組AT-Ⅱ細(xì)胞的TLR4及NF-kB蛋白表達(dá)量與L組相比,無(wú)明顯差異(P>0.05)。
   2.ELISA結(jié)果顯示,與C組比較,LPS組AT-Ⅱ細(xì)胞4h,12h,24h點(diǎn)TNF-a及IL-6釋放量均明顯升高(P<0.05)。L+LPS組AT-Ⅱ細(xì)胞4h,12h,

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