PPAR-α激動劑OEA對LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞炎癥因子表達(dá)的影響及特點(diǎn).pdf

1、研究背景：動脈粥樣硬化(Atherosclerosis，AS)是多種細(xì)胞功能異常導(dǎo)致的全身免疫紊亂性疾病，血管內(nèi)多種細(xì)胞如血管內(nèi)皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、單核細(xì)胞及平滑肌細(xì)胞都參與以上過程。近來，對于AS的研究已從單純的降血脂擴(kuò)展到對多種細(xì)胞和免疫環(huán)節(jié)的控制和預(yù)防。因此，對外周血中的單核細(xì)胞進(jìn)行監(jiān)測和調(diào)控，抑制炎癥性的單核細(xì)胞產(chǎn)生則成為預(yù)防和治療AS病變的重要研究方向。
　　 油酰乙醇胺(OEA)是一種內(nèi)源性脂質(zhì)調(diào)節(jié)物，體外試驗(yàn)證明OE

2、A是過氧化物酶體增殖物激活受體-α(PPAR-α)的一個天然高親和激動劑，可以通過激活PPAR-α受體抑制腫瘤壞死因子誘導(dǎo)的人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞中血管粘附分子-1的表達(dá)，從而發(fā)揮血管內(nèi)皮的保護(hù)作用，對于預(yù)防和治療動脈粥樣硬化有一定的作用。
　　 目的：本論文的目的在于探討油酰乙醇胺對細(xì)菌脂多糖(LPS)誘導(dǎo)的人急性白血病單核細(xì)胞(THP-1)中主要前炎癥因子表達(dá)的影響，并考察其作為PPAR-α激動劑參與對炎癥調(diào)節(jié)的作用機(jī)制，為闡明P

3、PAR-α在AS中作用提供理論依據(jù)。
　　 方法：本論文主要采用體外培養(yǎng)的THP-1細(xì)胞，應(yīng)用實(shí)時定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(Real-time PCR)和酶聯(lián)免疫吸附檢測(ELISA)測定OEA對LPS誘導(dǎo)的THP-1細(xì)胞中TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白的表達(dá)的影響，同時檢測了PPAR-α及Toll樣受體4(TLR4)在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。為了研究OEA的抑制炎癥作用機(jī)理，給與TLR4功能性抗體阻斷TLR

4、4或采用siRNA的方法干擾PPAR-α在THP-1細(xì)胞中的表達(dá)后觀察OEA的抗炎效應(yīng)的變化。
　　 結(jié)果：實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明OEA對TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA和蛋白的表達(dá)有抑制作用，并呈現(xiàn)出一定的劑量依賴性。且OEA在上調(diào)PPAR-α表達(dá)的同時能夠抑制TLR4的表達(dá)。加入TLR4阻斷劑，LPS誘導(dǎo)的TNF-α分泌下調(diào)，給與OEA后抑制作用更加顯著。siRNA干擾PPAR-α表達(dá)后，OEA抑制TNF-α分泌及下調(diào)TLR