利多卡因?qū)夏甏笫笮g(shù)后認(rèn)知功能障礙炎癥反應(yīng)的影響.pdf

1、第一部分:不同劑量利多卡因?qū)夏甏笫驪OCD行為學(xué)影響
　　目的:通過(guò)脾切除構(gòu)建老年大鼠術(shù)后認(rèn)知功能障礙(POCD)模型,探索老年大鼠 POCD模型形成及維持時(shí)間,并以局部麻醉藥利多卡因作為研究工具,研究利多卡因?qū)W(xué)習(xí)記憶功能損傷的改善作用,確定利多卡因改善POCD的最佳劑量。
　　方法:將50只老年SD大鼠,使用CHISS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件隨機(jī)分成5組,組別分別為:對(duì)照組、POCD模型組、利多卡因1組(1mg/kg/h)、利多卡因

2、2組(2mg/kg/h)、利多卡因3組(4mg/kg/h),每組10只。進(jìn)行連續(xù)5天的空間獲得性實(shí)驗(yàn)后,第6天對(duì)各組老年SD大鼠進(jìn)行模型構(gòu)建和利多卡因干預(yù)。所有老年SD大鼠均在術(shù)后第1、3、7、14天利用Morris水迷宮對(duì)老年大鼠的空間記憶能力進(jìn)行測(cè)試。
　　結(jié)果:空間獲得性實(shí)驗(yàn)會(huì)使老年大鼠的學(xué)習(xí)記憶能力隨著時(shí)間的延長(zhǎng)而逐漸提高(P<0.01)、并在第5天趨于穩(wěn)定,且每天各組之間的沒(méi)有明顯差異。參考記憶的測(cè)試結(jié)果顯示,與對(duì)照組相

3、比, POCD模型組和利多卡因3組(4mg/kg/h)的參考記憶能力明顯降低(P<0.05);與POCD模型組相比,利多卡因1組(1mg/kg/h)和利多卡因3組(4mg/kg/h)的參考記憶能力明顯增強(qiáng)(P<0.05)。
　　工作記憶的測(cè)試結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比, POCD模型組、利多卡因1組(1mg/kg/h)術(shù)后第1、3天,利多卡因3組(4mg/kg/h)術(shù)后第1、3、7天的工作記憶能力有顯著差異(P<0.05);與POCD

4、模型組比較,利多卡因1、2組(1、2mg/kg/h)的術(shù)后第1、3天和利多卡因3組(4mg/kg/h)的術(shù)后第1天的工作記憶能力有顯著差異(P<0.05)。
　　結(jié)論:麻醉狀態(tài)下脾切除能夠成功建立 POCD模型,且空間記憶能力的損害在術(shù)后第3天最明顯,術(shù)后第7天基本恢復(fù)正常,而圍術(shù)期尾靜脈持續(xù)泵注1h的1mg/kg/h利多卡因?qū)?gòu)建POCD模型后的老年大鼠空間記憶能力的改善作用最明顯,被確定為最佳治療劑量。
　　第二部分:最

5、佳劑量利多卡因?qū)OCD老年大鼠海馬組織和外周血炎癥反應(yīng)的影響
　　目的:通過(guò)分子生物學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù),觀察最佳劑量利多卡因?qū)OCD老年大鼠海馬和外周血炎癥反應(yīng)的影響,探索中樞和外周炎癥反應(yīng)與海馬星形膠質(zhì)細(xì)胞激活和表達(dá)變化的機(jī)制。
　　方法:確定量效關(guān)系和利多卡因的最佳劑量后,將72只老年SD大鼠,使用CHISS統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件隨機(jī)分成3組,組別分別為:對(duì)照組、POCD模型組、利多卡因組(1mg/kg/h)。使用54只進(jìn)行M

6、orris水迷宮實(shí)驗(yàn),每組18只,進(jìn)行連續(xù)5天的空間獲得性實(shí)驗(yàn)后,第6天對(duì)各組老年SD大鼠進(jìn)行模型構(gòu)建和利多卡因干預(yù),術(shù)后第1、3、7天對(duì)老年大鼠的空間記憶能力進(jìn)行測(cè)試。使用18只進(jìn)行新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn),每組6只,術(shù)后第1天對(duì)老年大鼠的非空間記憶能力進(jìn)行測(cè)試。所有老年大鼠均在術(shù)后第1、3、7天取材,采用ELISA的方法對(duì)老年大鼠海馬組織和外周血漿炎癥細(xì)胞因子進(jìn)行檢測(cè),采用組織免疫熒光染色和蛋白免疫印跡的方法觀察老年SD大鼠海馬組織中星形膠質(zhì)

7、細(xì)胞激活和GFAP表達(dá)的情況。
　　結(jié)果:確定利多卡因的最佳治療劑量為1mg/kg/h后,不僅使用Morris水迷宮實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)老年大鼠的空間記憶能力,還用新物體識(shí)別實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)非空間記憶能力,其結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,POCD模型組老年大鼠識(shí)別指數(shù)有顯著差異(P<0.05);與 POCD模型組對(duì)比,利多卡因組(1mg/kg/h)老年大鼠新物體識(shí)別指數(shù)有顯著差異(P<0.05)。
　　測(cè)定炎癥細(xì)胞因子結(jié)果顯示,關(guān)于促炎因子,與對(duì)照組

8、相比,POCD模型組術(shù)后第1天和第3天老年大鼠海馬和血漿中的TNF-α、IL-1β和IL-6濃度分別有顯著差異(P<0.05);與POCD模型組相比,1mg/kg/h利多卡因干預(yù)后,術(shù)后第1天和第3天老年大鼠海馬和血漿中的TNF-α、IL-1β和IL-6濃度分別有顯著差異(P<0.05)。而抗炎因子IL-10,與對(duì)照組相比,POCD模型組在術(shù)后第1、3天的海馬和血漿中的IL-10濃度分別有顯著差異(P<0.05);與POCD模型組相比,

9、利多卡因組(1mg/kg/h)術(shù)后第3天海馬和血漿中的IL-10濃度有顯著差異(P<0.05)。
　　組織免疫熒光染色法和蛋白免疫印跡法測(cè)定老年大鼠海馬組織星形膠質(zhì)細(xì)胞標(biāo)志物GFAP的結(jié)果顯示,與對(duì)照組相比,POCD模型組術(shù)后第1天和第3天海馬組織中GFAP的表達(dá)有顯著差異(P<0.05),且GFAP免疫熒光強(qiáng)度增加;與POCD模型組相比,利多卡因組(1mg/kg/h)術(shù)后第3天海馬組織中GFAP的表達(dá)有顯著差異(P<0.05),