漢坦病毒疫苗株Z10（HTNV）與Z37（SEOV）核蛋白表達及生物學功能研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、該論文主要研究了漢坦病毒疫苗株Z10和Z37核蛋白體內、體外表達,核蛋白與基因組末端反向重復序列相互作用以及核蛋白對鼠源性巨噬細胞生長的影響.核蛋白相對保守,常作為漢坦病毒分子進化親緣性分析的依據.為了解漢坦病毒疫苗株Z10與Z37基因分型及與其他毒株在進化上的親緣性,克隆并序列測定了Z10和Z37核蛋白全基因.為了獲得純化的可溶性重組核蛋白,構建了Z10和Z37株核蛋白原核表達載體并在大腸桿菌中表達,我們發(fā)現在較低的溫度(18℃)和較

2、低濃度IPTG(100mM)條件下誘導表達過夜可提高可溶性核蛋白的產量.為了解內源性核蛋白的表達及細胞內的分布情況,構建了漢坦病毒Z10株核蛋白基因與鼠干細胞反轉錄病毒(MSCV)重組載體,通過磷酸鈣轉染法導入產病毒的包裝細胞系BOSC23中產生完整的重組MSCV-FlagNP病毒.然后以重組病毒直接感染NIH 3T3細胞,利用Puromycin對感染細胞進行連續(xù)壓力篩選,獲得了轉核蛋白抗性細胞.互補可形成雙鏈發(fā)夾結構.為了研究該雙鏈結

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