犬流感病毒江蘇分離株致病生物學特性研究.pdf

1、犬流感病毒（Canineinfluenzavirus，CIV）是新出現(xiàn)的能引起犬嚴重急性呼吸系統(tǒng)疾病的病原體，對犬的健康構成嚴重危害。犬作為伴侶動物在人類生活中占據特殊地位，因此犬流感病毒的感染也具有重要的公共衛(wèi)生意義。禽源CIV是近年來在亞洲地區(qū)流行的能夠引起犬嚴重呼吸系統(tǒng)疾病的主要病原。目前我國分離到的CIV絕大多數是禽源H3N2亞型。本實驗室先前對禽源H3N2亞型CIV江蘇分離株在小鼠上進行的致病性研究顯示，A/canine/Ji

2、angsu/06/2010(CIV06)能夠對小鼠造成肺外感染并且能夠經腸道排出病毒，暗示CIV06很可能具備不同于現(xiàn)已報道的大多數CIV毒株的致病生物學特性。
　　為了研究CIV06對犬的致病性，在已有CIV06對小鼠致病性研究的基礎上開展了動物回歸實驗。感染組采用9只比格犬，鼻內接種107.95半數雞胚感染量(EID50)的病毒液，對照組接種等量滅菌PBS。感染后第1天犬即出現(xiàn)臨床癥狀，并檢測到病毒排出。呼吸系統(tǒng)疾病臨床癥狀計

3、分發(fā)現(xiàn)，感染組在感染后第4-6天，臨床癥狀得分達到峰值。PCR檢測表明，實驗感染犬經呼吸道和消化道途徑均可排毒。熒光定量PCR檢測表明，病毒RNA在感染犬的多種器官中均可檢出，包括心、肝、脾、氣管、肺、腎、腦和十二指腸。進一步對這些器官進行組織病理學和免疫組織化學分析發(fā)現(xiàn)，除心臟之外，其他組織器官均有明顯損傷;抗原染色顯示，所有組織器官均出現(xiàn)明顯的陽性反應。結果提示，CIV06能夠對犬造成肺外感染，引起廣泛的組織損傷，該結果與之前報道的

4、其他CIV毒株在致病性方面存在明顯差異。
　　為了探討禽源CIV06是否具備感染禽的能力，將白來航雞分為3組:感染組20只，鼻內接種0.1mL107EID50的病毒液;接觸傳播組與對照組各4只，接種等量的滅菌PBS，其中接觸傳播組與感染組同籠，對照組隔離飼養(yǎng)。結果:整個實驗過程中沒有觀察到任何雞出現(xiàn)與疾病相關的臨床癥狀，接觸傳播組和對照組的所有樣品病毒RNA檢測均為陰性。感染后第1-9天，在感染組口咽拭子中檢測到病毒排出。病毒RN

5、A在實驗感染雞的氣管、肺、血液、心、胸肌和脾等組織器官中被檢出。對氣管、肺、心、胸肌和脾進行組織病理學檢查發(fā)現(xiàn)，僅肺和脾有輕微的病理變化。免疫組織化學分析顯示，上述組織均有明顯的抗原染色。此外，僅感染組在感染后第7天開始出現(xiàn)血清轉化。上述結果表明CIV06能夠通過實驗接種感染雞，但是實驗感染雞沒有能力感染與之直接接觸的健康雞。
　　總之，禽源犬流感病毒江蘇分離株06對犬致病力較強，可造成犬系統(tǒng)性感染，而對雞沒有表現(xiàn)出明顯的致病力。