Bartha--k61株疫苗對豬偽狂犬病病毒變異株的免疫保護及變異株生物學特性的初步研究.pdf

1、分類號UDCIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY3375463學號密級埸H1大季YANGZHOUUNlVERSITY博士學位論文D13047Barthak61株疫苗對豬偽狂犬病病毒變異株的免疫保護及變異株生物學特性的初步研究周金柱指導教師姓名：亟盛塾撞：塹劌盤芏：蘭蒸塹劌：22主QQ窆申請學位級別：譴學科專業(yè)名稱：亟墮簦匿芏論文提交日期：2Q12壘!Q旦論文答辯日期：壟Q!Z生12旦學位授予單位：塹劌盤堂學位授予日期：呈Q!Z生

2、!星且答辯委員會主席：丁鏟研究員2017年12月周金柱Barthak61株疫苗對豬偽狂犬病病毒變異株的免疫保護及變異株生物學特性的初步研究IBarthak61株疫苗對豬偽狂犬病病毒變異株的免疫保護及變異株生物學特性的初步研究中文摘要偽狂犬病是由偽狂犬病病毒(pseudorabiesvirus，PRV)引起的一種重要傳染病，PRV屬于皰疹病毒科，0【皰疹病毒亞科，其學名為豬皰疹病毒1型(suidherpesvirus1，SuHV1)，又名

3、奧耶斯基氏病病毒(AujeszkySDiseasevirus，ADV)，目前該病毒僅有一個血清型。眾所周知，疫苗免疫是預防和控制該病的重要手段。包括歐洲在內(nèi)的一些國家已經(jīng)從家豬中成功凈化PRV，近年仍有在已經(jīng)凈化國家的野豬中發(fā)生PR的報道。在我國，從2011年開始，豬偽狂犬病再次在Barthak61株疫苗免疫的豬場發(fā)生，感染后的主要臨床癥狀有高熱、呼吸衰竭、腹瀉、精神沉郁、厭食、神經(jīng)癥狀等，造成新生仔豬50％及以上的死亡率，保育和育肥豬

4、亦可見1030％的死亡。發(fā)病豬場血清學檢測結(jié)果顯示，發(fā)病豬場豬偽狂犬病病毒gE抗體陽性率超過50％。該病在中國多地發(fā)生，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴重的損失。對分離的豬偽狂犬病病毒進行分析，結(jié)果顯示該病毒較之前的分離株發(fā)生抗原變異且對小鼠和不同日齡的豬均有較高的毒力。目前對變異株毒力增強的機制還不清楚，本研究以本室分離的變異株為研究對象，對病毒的生物學特性、全基因組序列以及感染PK。15細胞的轉(zhuǎn)錄組學進行研究，為了解變異株毒力增強機制提供參考，同

5、時也對我國豬偽狂病的防控具有實際意義。1、豬偽狂犬病病毒的分離及鑒定20142016年間，從江蘇和上海地區(qū)的疑似發(fā)病豬的病料中共分離和鑒定出5株豬。偽狂犬病病毒變異株，分別命名為XJ5、CM、NT、HA和TX，通過PCR、IFA和電鏡觀察等對病毒進行了鑒定。通過對5個毒株的5個糖蛋白基因gE、gc、西、gD、gB和毒力基因TK的全序列分析，顯示5個分離株的序列同源性較高。依據(jù)gE基因和gc基因構(gòu)建遺傳進化樹，結(jié)果表明5個分離株與HeNl

6、、JS2012等毒株遺傳進化距離較近，屬于同一分支。5株病毒對小鼠的LD50測定結(jié)果顯示，XJ5、CM、NT、HA和TX的LD50分別為10”、1025、10”、1049和1039TCID50，表明盡管5個分離株在遺傳進化距離相似，但不同毒株對小鼠的毒力存在差異，預示分離毒株的毒力存在多樣性。2、Barthak61株疫苗對豬偽狂犬病病毒變異株和經(jīng)典株的免疫保護試驗2011年以來，豬偽狂犬病在我國許多大型養(yǎng)殖場重新爆發(fā)，給我國的的養(yǎng)豬業(yè)帶