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文檔簡介
1、目的:探討細胞膜和細胞骨架之間的連接蛋白Ezrin在皮膚癌中的表達,明確Ezrin蛋白對人表皮癌A431生長和運動能力的影響,考察黃芩素通過Ezrin蛋白的對A431細胞生長的影響。 方法: 1、為明確Ezrin蛋白在皮膚癌組織中的表達,采用免疫組化法檢測36例鱗狀細胞癌(Squamous Cell Carcinoma,SCC)、27例基底細胞癌(Basal cell carcinoma,BCC)和20例脂溢性角化?。⊿
2、eborrheic Keratosis,SK)、10例正常人皮膚(normal skin,NS)中Ezrin及phos-Ezrin蛋白表達水平。 2、為探討Ezrin蛋白在癌變中的生物學作用,選取人表皮癌A431細胞作為研究材料,先運用四甲基偶氮唑藍(MTT)法分析黃芩素(Baicalein,BAI)對A431細胞生長的影響,選用BAI細胞無毒性濃度(non-cytotoxic concentration,NCC)進行實驗;免疫
3、印跡(Western-blotting,WB)分析A431細胞中Ezrin和phos-Ezrin的表達;掃描電鏡觀察BAI對A431細胞偽足形成,細胞劃痕實驗檢測BAI對A431細胞爬行運動的作用,明確Ezrin蛋白在細胞偽足形成和細胞爬行中的作用。 結(jié)果: 1、Ezrin,phos-Ezrin在NS、SK、BCC、SCC中的陽性表達率分別為20.0%,10.0%; 25.0%,15.0%; 66.7%,77.7%和91
4、.3%,97.2%,各組之間比較差異有顯著性(P<0.01)。 2、Ezrin,phos-Ezrin表達水平隨著SCC分級程度增高,有淋巴轉(zhuǎn)移的比無淋巴轉(zhuǎn)移的表達強,各組兩兩比較差異顯著(P<0.01)。 3、MTT結(jié)果表明。BAI在濃度0.1~0.5μg/ml對A431細胞生長抑制作用不明顯,為BAI對A431的細胞無毒性濃度(NCC)。WB印跡分析表明,BAI在NCC能明顯抑制A431細胞phos-Ezrin表達,且
5、呈濃度依賴性;電鏡觀察顯示A431細胞偽足明顯縮短,數(shù)量減少;劃痕實驗顯示BAI對A431細胞遷移有明顯的抑制作用。 結(jié)論: 1、Ezrin,phos-Ezrin高表達與皮膚癌的惡性程度和淋巴轉(zhuǎn)移有關(guān),可能是皮膚癌SCC發(fā)生和發(fā)展過程的重要分子“事件”。 2、BAI可以在NCC抑制Ezrin蛋白磷酸化。 3、BAI可能通過抑制phos-Ezrin表達,抑制A431細胞偽足形成和爬行運動,從而抑制腫瘤浸潤轉(zhuǎn)
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