DPP6在難治性聶葉癲癇患者及匹羅卡品致癇大鼠腦組織中的表達(dá).pdf

1、目的:
　　癲癇是一種腦部疾病狀態(tài)，以具有能夠產(chǎn)生癲癇發(fā)作的持久易患性和出現(xiàn)相應(yīng)的神經(jīng)生物、認(rèn)知、心理及社會等方面的后果為特征。據(jù)估計(jì)全球約5000萬人罹患癲癇。盡管服用多種抗癲癇藥物，仍有30％的患者不能有效控制癲癇發(fā)作，稱為難治性癲癇。顳葉癲癇是最常見的難治性癲癇，但是，難治性癲癇的發(fā)病機(jī)制還不完全清楚。通過對難治性癲癇患者及動(dòng)物模型的腦組織標(biāo)本研究發(fā)現(xiàn)樹突棘存在重構(gòu)，推斷樹突棘重塑在癲癇發(fā)生中起重要作用。二肽基肽酶6(dip

2、eptidylpeptidase6，DPP6)是一種單次跨膜糖蛋白，在海馬神經(jīng)元樹突絲足和樹突棘的形成和穩(wěn)定中發(fā)揮重要作用。本文通過比較DPP6在難治性癲癇患者與腦外傷患者顳葉腦組織、匹羅卡品致癇大鼠模型腦組織與對照組腦組織中的表達(dá)差異，探討DPP6在難治性癲癇發(fā)生發(fā)展中的意義及可能的作用機(jī)制，為抗癲癇治療提供一種新思路。
　　方法:
　　在癲癇患者腦組織庫中，按照隨機(jī)化原則隨機(jī)抽取27例難治性顳葉癲癇患者的腦組織，在對照組

3、腦庫中抽取15例組織學(xué)正常的腦外傷患者的顳葉腦組織，采用Western Blot、免疫組織化學(xué)對DPP6的表達(dá)量和表達(dá)部位進(jìn)行測定。另外采用氯化鋰-匹羅卡品大鼠致癇模型，分別在大鼠癲癇發(fā)作后6h、24 h、72 h、1w、2w、1m、2 m(n=49)斷頭取腦，與對照組(n=7)比較，采用Western Blot、免疫組織化學(xué)、免疫熒光雙標(biāo)對DPP6的表達(dá)量和細(xì)胞定位進(jìn)行測定，進(jìn)一步探討DPP6在難治性癲癇發(fā)生發(fā)展中的作用。
　　

4、結(jié)果:
　　1癲癇患者組和對照組
　　1.1臨床特點(diǎn)比較:癲癇組共27例，平均病程12.11±1.42年。92.6％的患者病程超過5年，55.6％的患者病程超過10年。對照組共15例，實(shí)驗(yàn)組和對照組在年齡、性別、所取腦組織的部位方面差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　1.2Western Blotting示顳葉癲癇患者腦組織DPP6的蛋白表達(dá)水平明顯高于對照組。通過計(jì)算DPP6/GAPDH的相對光密度(OD)值，比較兩組的平均OD

5、值，癲癇組平均OD值（0.86±0.04），對照組平均OD值（0.37±0.02），兩組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　1.3免疫組織化學(xué)示DPP6主要表達(dá)于癲癇組和對照組的顳葉腦組織神經(jīng)元的細(xì)胞膜。對照組的平均OD值為0.21±0.03，癲癇組的平均OD值為0.50±0.02，兩組間差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有意義。
　　2動(dòng)物模型
　　2.1 Western Blotting示，癲癇組顳葉腦組織中DPP6在各個(gè)時(shí)間

6、點(diǎn)的表達(dá)逐漸增加，與對照組相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。實(shí)驗(yàn)組海馬中的DPP6在急性期(6h、24h)、慢性期(1m、2m)表達(dá)增加，潛伏期(1w、2w)比急性期表達(dá)減少，但各個(gè)時(shí)間點(diǎn)與對照組相比表達(dá)均增加，差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.001)。
　　2.2免疫組織化學(xué)示癲癇組顳葉腦組織與海馬中的DPP6主要表達(dá)于神經(jīng)元細(xì)胞膜，與對照組相比，表達(dá)均增加，且與Western Blot有相似的表達(dá)趨勢。
　　2.3免疫