重組人干擾素-α2b的純化以及位點(diǎn)特異性PEG化研究.pdf

1、干擾素是細(xì)胞因子的一種,具有免疫調(diào)節(jié)的作用。當(dāng)人體遭遇細(xì)菌、病毒的侵襲時(shí),機(jī)體會(huì)釋放干擾素抑制病原體對(duì)人體的破壞?；诟蓴_素對(duì)免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用,許多醫(yī)藥公司利用基因工程技術(shù)以及生物化學(xué)技術(shù)將干擾素開發(fā)成一種抗病毒藥物。隨著藥物的應(yīng)用,干擾素類的蛋白藥物出現(xiàn)了許多缺點(diǎn),其中最重要的是其較短的半衰期。由于人體消化系統(tǒng)內(nèi)的胰蛋白酶對(duì)蛋白質(zhì)的破壞,蛋白類藥物只能通過(guò)皮下注射的方式直接注入到血液循環(huán)系統(tǒng)中發(fā)揮作用,但血液循化系統(tǒng)中也存在蛋白質(zhì)水

2、解酶。此外,注入到體內(nèi)的蛋白質(zhì)還要面對(duì)腎小球的濾過(guò)作用。因此,干擾素藥物在體內(nèi)的半衰期很短,需要病人經(jīng)常性地進(jìn)行皮下注射給藥。本實(shí)驗(yàn)為了解決干擾素類藥物半衰期短的特性,綜合了近年來(lái)提高半衰期的方法,選擇了位點(diǎn)特異性PEG化來(lái)提高干擾素的半衰期。
　　 本實(shí)驗(yàn)通過(guò)基因重組技術(shù)在干擾素-α2b結(jié)構(gòu)中構(gòu)建了第五個(gè)半胱氨酸,從而在其表面引入了一個(gè)自由巰基。通過(guò)自由巰基與馬來(lái)酰亞化PEG的反應(yīng),達(dá)到位點(diǎn)特異性的PEG化。這一反應(yīng)避免了多位