簡介：目的通過檢測骨形態(tài)形成蛋白15BONEMPHOGEICPROTEINS15，BMP15在環(huán)磷酰胺（CYCLOPHOSPHAE，CTX）處理的大鼠血清和卵巢中的表達，及BMP15MRNA在CTX大鼠卵巢中的表達，探討B(tài)MP15能否反應卵巢儲備功能。方法選取有正常性周期的20只SD雌性大鼠進入實驗，將20只大鼠完全隨機分為CTX組和對照組，CTX組使用CTX75MGKG、對照組使用生理鹽水1ML，均單次行腹腔注射用藥后觀察兩組大鼠的一般狀態(tài)、體重增長情況、卵巢濕重、卵巢組織結構及各級卵泡數(shù)目的變化，用酶聯(lián)免疫吸附法ENZYMELINKEDIMMUNOSBANTASSAY，ELISA測定血清卵泡刺激素FOLLICLESTIMULATINGHMONE，F(xiàn)SH、雌二醇ESTRADIOL，E2及BMP15水平，并用免疫組織化學法及實時熒光定量聚合酶鏈式反應REALTIMEPCR技術檢測BMP15基因在大鼠卵巢組織中的表達水平。結果1與對照組比較，CTX組大鼠在用藥前后體重增長慢，卵巢濕重減輕，差異均有統(tǒng)計學意義P＜0052與對照組比較，CTX組大鼠的血清E2、BMP15水平下降，而FSH水平升高，差異有統(tǒng)計學意義P＜0053血清BMP15與E2存在正相關P＜0054CTX組大鼠與對照組比較，始基卵泡、竇前卵泡、竇狀卵泡及總卵泡數(shù)均減少，差異有統(tǒng)計學意義P＜005，但次級卵泡減少不明顯，差異無統(tǒng)計學意義P＞0055CTX組大鼠卵泡中BMP15表達的平均光密度MEANOPTICALDENSITY，MOD值低于對照組，差異有統(tǒng)計學意義P＜0056CTX組大鼠卵巢中總BMP15MRNA的表達量較對照組減少，差異有統(tǒng)計學意義P＜005。結論1CTX可導致大鼠卵巢功能受損2CTX可能降低BMP15在大鼠卵巢中的表達3血清BMP15可能可以作為CTX化療后大鼠卵巢儲備功能的評判指標。

簡介：中國醫(yī)科大學博士學位論文DYSTROGLYCAN缺陷肌營養(yǎng)不良相關性心肌病發(fā)病的細胞與分子機制研究姓名趙玫申請學位級別博士專業(yè)內(nèi)科學指導教師白小涓20090301LGDM2C、2D、2E、2F。DG是已知的和推想的糖基化酶蛋白的分子靶子，參與0【DG糖基化的酶蛋白的突變會導致DG的異常糖基化，致使DG作為骨骼肌細胞外基質受體的這一重要功能遭到破壞，與骨骼肌中的配體的結合活性丟失，引發(fā)相關的先天性肌營養(yǎng)不良CONGENITALMUSCULARDYSTROPHY，CMD。在這些已經(jīng)確認的疾病當中，同時合并心肌病變是其常見且嚴重的并發(fā)癥。因此，在DG的糖基化和功能方面的缺陷是幾種人類肌營養(yǎng)不良相關性心肌病的起因。蛋白糖基化途徑常?；祀s交錯，所以有學者作出假設其他蛋白可能是此酶學途徑的靶點并與疾病的表型有關由此便產(chǎn)生了一個邏輯上的問題，DG基因的遺傳性消除能否在小鼠身上重復出許多甚至所有的疾病表型DG敲除小鼠是胚胎致死性的，原因是對嚙齒類動物來說這是特異性致死性的發(fā)育缺陷。因此，目前尚沒有一種遺傳性疾病的相關描述涉及到Q或BDG的自身突變，也就是說目前尚未能在任一遺傳性疾病當中確認以DG自身突變?yōu)橹鞯牟∽?。本文研究者利用CRELOXP技術獲得了心肌組織特異性DG缺失的基因突變小鼠MLC2VCRE，使得有關DG在心肌這一特定組織中的結構與功能研究成為可能。首先，將確認DG缺失是否能夠充分且必要地解釋蛋白糖基化缺陷肌營養(yǎng)不良相關性心肌病的發(fā)生；其次，將探討心肌細胞DG基因突變在肌營養(yǎng)不良相關性心肌病的發(fā)病中所起的結構性和／或功能性的作用及其確切的作用機制；再次，要研究與此相關的心肌細胞存活信號轉導途徑上可能參與的酶的磷酸化水平以及其他可能參與其中的蛋白水解酶系統(tǒng)，以積極尋求潛在的臨床治療的新策略。綜上所述，患有DMD，BMD，與SG相關的退行性LGMD的病人，以及MDX小鼠和13、6一和YSG基因敲除LGMD小鼠模型常常發(fā)展為心肌病，然而，肌營養(yǎng)不良相關性心肌病的發(fā)病機制尚未完全為我們所了解。目前，DG與DGC在引起肌營養(yǎng)不良相關性心肌病中所起的作用及其機制也仍不明了，可能的原因分析如下首先，DGC蛋白復合物在心肌組織系統(tǒng)表達分布和功能比較復雜，心肌中DGC破壞可使得心肌細胞易感于膜損傷；其次，是否每一種蛋白在DGC中主要地起到結構性的或是功能性的作用遠未確定下來；再者，雖然具有骨骼肌蛋白糖基化異常的病人可發(fā)展為心肌病，但在心肌病本身DG的作用及作用機制2

簡介：研究背景髕骨軟化癥CHONDROMALACIAPATELLAE，CP，是骨科常見病，膝前痛的主要原因之一。近年來有關其病各方面研究很多。本科在該病臨床治療方面采用電刺激訓練股內(nèi)側肌治療研究，多年來隨訪，治療效果顯著。但在各分期階段治療療效具體情況尚不清楚，為此作本課題研究。包括兩部分髕股關節(jié)穩(wěn)定結構解剖學觀察和電刺激訓練股內(nèi)側肌治療各期軟化癥療效分析。同時通過髕骨軟化癥的現(xiàn)代醫(yī)學研究概況相關文獻檢索，對髕骨軟化癥病因、病機、分期診斷和治療等方面的近年來研究進展進行了一個綜述概括，對髕骨軟化癥有一個完整的認識，對于本課題也有重要的指導作用。第一部分髕股關節(jié)穩(wěn)定結構臨床解剖學觀察目的通過髕股關節(jié)穩(wěn)定結構的臨床解剖學觀察探討髕骨軟化癥解剖學發(fā)病和治療的原理。材料與方法5側完整成人的膝關節(jié)標本其中新鮮3側，無膝關節(jié)外傷及手術，解剖去除股四頭肌表面及膝關節(jié)周圍的皮膚及脂肪組織。逐層解剖并觀察髕股關節(jié)穩(wěn)定結構。結果①觀察股四頭肌角QVADRICEPSANGLEQA，股直肌與髕韌帶延長線所成的角，Q角大小影響髕骨關節(jié)面的穩(wěn)定性；②股四頭肌收縮時，力線與大腿并不成一直線，而是沿著抵止于脛骨粗隆的方向，故髕骨有向外脫位的傾向。股四頭肌的擴張部與深筋膜相粘連，能維持髕骨的穩(wěn)定，并加強膝關節(jié)囊。內(nèi)外側支持帶甚為堅強，特別以內(nèi)側為甚，能防止髕骨向外脫位。股內(nèi)側肌最低處肌纖維方向幾乎水平，是保持髕骨穩(wěn)定的重要結構；③分別模擬正常情況及髕骨半脫位時膝關節(jié)活動，將膝關節(jié)自伸直狀態(tài)0°被動屈曲至30°、60°、90°，觀察到股四頭肌腱與股骨外側髁逐漸接觸加大情況及其變化。模擬髕骨半脫位膝關節(jié)屈伸活動時，將髕骨向外側牽拉至使髕骨外側面與股骨外側髁接觸，而其內(nèi)側面不與股骨內(nèi)側髁相接觸；④模擬HAUTAMAA等法觀察到單純切斷內(nèi)側支持帶特別是內(nèi)側髕股韌帶將使髕骨向外脫位的程度增加，但修補后又可重建髕骨排列平衡，證實了內(nèi)側支持帶特別是內(nèi)側髕股韌帶對膝關節(jié)髕骨穩(wěn)定的重要性；⑤打開關節(jié)觀察股骨下端、股骨髕面、內(nèi)外髁和髕骨的大體解剖，了解其骨性解剖穩(wěn)定結構和生理。結論髕股關節(jié)具有十分復雜的結構和載荷機制，髕股關節(jié)解剖和力學特性的異常，都可能導致髕股關節(jié)面的異常接觸，使得關節(jié)面局部應力增高、減低或壓力分布不均，從而造成關節(jié)軟骨的損害。髕骨是伸膝結構重要組成部分。正常情況下，髕股關節(jié)面之間的對合關系具有良好的適合性。良好的髕骨周圍結構及其力學平衡，對維持髕骨的正常排列具有重要作用。股四頭肌收縮時各肌肉之間的力學平衡是保持運動中髕股對合的動力結構。在維持髕骨正?；瑒榆壽E的眾多因素中，股四頭肌的作用十分重要，尤其是股內(nèi)側肌對髕骨的穩(wěn)定更重要，應重視科學的、有效的選擇性股內(nèi)側肌訓練，以預防和治療髕骨外側不穩(wěn)定，從而有效的治療髕骨軟化癥。第二部分選擇性電刺激股內(nèi)側肌訓練治療各分期髕骨軟化癥目的觀察電刺激訓練股內(nèi)側肌治療各分期髕骨軟化癥的療效及其機理。方法選擇門診符合曲綿域髕骨軟化癥診斷標準患者464例，按ROSEPM等MRL分期診斷標準分期后，隨機分成治療組和對照組進行治療，A組治療組310人，男71，女239，為選擇性股內(nèi)側肌電刺激組；B組對照組為直腿抬高股內(nèi)側肌訓練組，154人，男35，女119。治療組采用導師郭開今教授研究和臨床治療CP曾用的電刺激股內(nèi)側肌訓練療法，治療2至5療程對照組用傳統(tǒng)的直腿抬高股四頭肌訓練法，訓練2至3月為療程。進行隨訪924月，獲得隨訪A組211例I期48、II期50、III期58、Ⅳ期55，B組95例I期19、II期21、III期30、Ⅳ期25。分別對所測量膝關節(jié)軸位片適應角CA、外側髕股角LPA和癥狀療效評分優(yōu)、良、可、差進行統(tǒng)計分析，統(tǒng)計學處理使用SPSS115軟件包。結果①治療組CA、LPA角治療前后都有明顯改善P005；②治療組與對照組治療后癥狀療效評分結果比較有顯著差異P005；③治療組各分期治療前后癥狀療效評分均有顯著差別P005；⑤治療組III期、Ⅳ期療效與對照組療效評分無顯著差別P005。結論①髕骨軟化癥的發(fā)病與髕股關節(jié)紊亂有關，而股內(nèi)側肌是髕骨穩(wěn)定的主要機構，股內(nèi)側肌訓練有重要意義。②電刺激訓練股內(nèi)側肌能夠降低CA及LPA角，改善髕股關節(jié)穩(wěn)定性，干預髕骨運動軌跡從而治療各期髕骨軟化癥。也就能延緩或控制病情發(fā)展，甚至能達到臨床治愈目的達到治療的目的，是一有效的保守治療方法。③電刺激訓練股內(nèi)側肌干預髕骨運動軌跡治療各期髕骨軟化癥，早期III期優(yōu)于病變晚期IIIⅣ期療效，病變愈早療效愈好；反之越差。④治療組晚期IIIⅣ期病人療效與對照組療效無差別，電刺激訓練股內(nèi)側肌治療其期關節(jié)無特異性。⑤對照組治療后驗證也有較明顯的療效，分析認為由于股四頭肌的鍛煉改善了髕骨的部分角度，髕骨不穩(wěn)定得到一定程度糾正，因而癥狀有所好轉，這也進一步說明選擇性股內(nèi)側肌電刺激糾正CA及LPA角治療髕骨軟化癥原理。

簡介：研究背景1、多發(fā)性肌炎和皮肌炎PMDM是一類結締組織病CTD，易侵犯多臟器、多系統(tǒng)，臨床表現(xiàn)比較復雜，難以做到早期診斷、早期治療。近年研究發(fā)現(xiàn)PMDM患者體內(nèi)存在多種自身抗體，包括肌炎特異性自身抗體MSAS和肌炎相關性自身抗體MAAS，MSAS可分為3類抗合成酶抗體包括抗JO1抗體、抗PL7抗體和抗PL12抗體、抗SRP抗體和抗MI2抗體。MAAS包括抗KU72抗體、抗KU86抗體和抗PMSCL抗體等。國外研究報道，MSAS與臨床癥狀及預后密切相關。國內(nèi)有關方面報道較少，有很好的臨床應用前景。2、影像學檢查有助于PMDM診斷。核磁共振MRI對軟組織敏感性高，能全面顯示肌肉病變情況，可以重復檢查和動態(tài)觀察。國外已廣泛應用于肌肉疾病的診斷，國內(nèi)應用較少。目的通過檢測PMDM患者血清肌炎自身抗體譜，探討其對PMDM的診斷價值；通過對PMDM患者行肌肉磁共振成像MRI，探討其對PMDM的診斷價值。方法1、肌炎自身抗體譜檢測①研究對象2006年8月至2008年5月山西醫(yī)科大學第二醫(yī)院風濕科門診及住院患者共260例，其中PMDM組56例，其他結締組織病CTD組163例，血清陰性脊柱關節(jié)病SPA組41例，健康對照組30例。②試劑和方法使用德國歐蒙公司試劑盒，采用免疫印跡法檢測7種肌炎自身抗體包括抗JO1抗體、抗PL7抗體、抗PL12抗體、抗MI2抗體、抗KU72抗體、抗KU86抗體、抗PMSCL抗體。2、肌肉MRI檢查①研究對象PMDM患者共35例，其中PM11例，DM24例；健康對照組10例。②儀器及方法采用GEVECTRA15T超導型MRI掃描儀，選用體線圈冠狀面掃描。常規(guī)自旋回波序列SE包括T1加權像T1WI和T2加權像T2WI及短時反轉恢復序列STIR檢查。掃描部位臀區(qū)及雙下肢。結果1、肌炎自身抗體譜檢測結果①7種肌炎自身抗體敏感性分別為抗JO1抗體232％、抗PL7抗體89％、抗PL12抗體107％、抗MI2抗體89％、抗KU72抗體107％、抗KU86抗體143％、抗PMSCL抗體54％；特異性分別為抗JO1抗體990％、抗PL7抗體985％、抗PL12抗體995％、抗MI2抗體990％、抗KU72抗體789％、抗KU86抗體828％、抗PMSCL抗體922％。②抗合成酶抗體聯(lián)合檢測，對PMDM的敏感性明顯高于單獨檢測抗JO1抗體P＜005，特異性均無明顯下降。聯(lián)合檢測4種MSAS和聯(lián)合檢測3種MAAS，比較發(fā)現(xiàn)，敏感性和特異性前者均高于后者P＜005。③抗合成酶抗體與臨床癥狀相關性抗合成酶抗體陽性患者主要臨床表現(xiàn)為肌痛、肌無力、關節(jié)炎、間質性肺病、發(fā)熱、雷諾現(xiàn)象，陽性率均高于陰性對照組。2、肌肉MRI結果①健康對照組肌肉組織信號為介于骨皮質與皮下脂肪之間的中等強度信號，且較均勻。②PMDM組35例PMDM中，7例PM和13例DM為單純肌肉水腫，4例PM和7例DM為單純肌肉水腫合并脂肪浸潤病程＞1年，陽性率達886％3135。肌肉水腫在T1WI序列為稍低至等信號，T2WI和STIR序列上表現(xiàn)為多發(fā)的小片狀分布的高信號影；脂肪浸潤在T1WI和T2WI上均表現(xiàn)為等高信號，而STIR序列為等低信號。結論1、MSAS對PMDM特異性高，多種MSAS聯(lián)合檢測使敏感性明顯增高，有助于提高PMDM患者的診斷率，可以在臨床上推廣。2、肌肉MRI檢查可發(fā)現(xiàn)肌肉病變，對可疑PMDM患者進行篩查，指導肌肉活檢，從而提高PMDM患者的診斷率。

簡介：青島大學碩士學位論文生育期女性子宮腺肌病患者采用超選擇子宮動脈栓塞治療的臨床觀察姓名劉紅霞申請學位級別碩士專業(yè)人體解剖與組織胚胎學指導教師劉豐春20090525英文摘要SUPERCHOOSEUTERINEARTERYEMBMIZATIONTREATMENTREPRODUCTIVEPERIODUTERINEFIBROIDSCLINICALANALYSISABSTRACTOBJECTIVETODISCUSSSCUAESUPERCHOOSEUTERINEARTERYEMBOLIZATIONTREATMENTADENOMYOSISCLINICALANDCOMPLICATIONS．THUSFORTHEYOUNGPATIENTSOFADENOMYOSISWHOINREPRODUCTIVEPERIODPROVIDEASAFEANDEFFECTIVE，LOWSIDEEFFECTSOFTREATMENT．．METHODS50CASESOFFEMALEADENOMYOSISPATIENTSWHOWANTTOREMAINUTERINEWERETAKENSCUAESUPERCHOOSEUTERINEARTERIAEMBOLISMFORTREATMENTINOURHOSPITA1．OBSERVATIONANDCOMPARISONTHECHANGESOFDYSMENORRHEA、MENSTRUATION、OVARIANVOLUMERECOVERYANDCLINICALHORMONEOFPATIENTSBEFOREANDAFTERTHETREATMENTPERIOD，ALLDATASTATISTICSANALYSEDBYUSINGSTATISTICALSOFTWARESPSSI3．0．MEASUREMENTDATASUSINGTTEST．RESULTSFOLLOWINGUPTWOYEARSAFTERTREATMENT，ALLPATIENTSHAVETHEEASEOFDYSMENORRHEALP0．05．THESHORTERPERIOD，COMPAREDWITHTHEPREOPERATIVEDECREASE，P0．01，UTERINE2

簡介：目的分析兒童肘關節(jié)骨骺損傷患者的MRI表現(xiàn)，探討MRI在兒童骨骺損傷診斷及隨診復查中的應用價值。方法對36例514歲肘關節(jié)外傷且臨床懷疑骨骺損傷兒童患者行MRI檢查，并對其中17例于傷后2周至6個月內(nèi)復查，檢查序列包括T1WI、FSPDWI、T1TIRM、3DDESS、T2MAPPING。結果36例兒童肘關節(jié)外傷患者經(jīng)診斷存在骨骺損傷28例，按SALTERHARRIS分型，Ⅰ型4例179％，Ⅱ型11例464％，Ⅲ型8例214％，Ⅳ型5例143％，Ⅴ型0例0％，統(tǒng)計X線檢查與MRI檢查結果之間差異，P0025。本組MRI各序列中FSPDWI及3DDESS對骨骺損傷顯示最佳T1TIRM及FSPDWI顯示骨髓水腫最佳3DDESS對關節(jié)軟骨、骨橋形成及骺板閉合顯示最佳T2MAPPING對軟骨損傷最敏感。結論MRI對骨骺損傷檢出率優(yōu)于X線檢查，能夠糾正X線對骨骺損傷的錯誤分型T1WI、FSPDWI、T1TIRM、3DDESS、T2MAPPING序列組合能夠良好觀察骨折愈合變化、骨髓水腫吸收、關節(jié)軟骨損傷及骺板骨橋形成、骺板閉合情況，在兒童骨骺損傷的診斷和評價療效中有很大的應用價值。

簡介：點擊查看更多BMP-6及b-FGF對家兔腰椎間盤纖維環(huán)細胞成骨潛能的研究.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：浙江大學碩士學位論文垂體后葉素在腹腔鏡下子宮肌壁間肌瘤剔除術中的應用姓名章偉麗申請學位級別碩士專業(yè)婦產(chǎn)科學指導教師張松英20060401瀕扛大學碩士學位論文研究目的本研究隨機選擇二組子宮肌壁間肌瘤患者，術中分別于子宮肌層局部注射垂體后葉素和縮宮素，對比分析二組L、術中出血量2、手術時問I、用藥前后血壓變化4、術后恢復情況等，以觀察垂體后葉素在腹腔鏡下子宮肌壁間肌瘤剔除術中的止血效果及其副作用。資料與方法選擇2005年1月至2005年12月間在浙江大學醫(yī)學院附屬邵逸夫醫(yī)院婦產(chǎn)科完成的腹腔鏡下子宮肌壁間肌瘤剔除術病例共70例。所有患者術前均經(jīng)婦科及陰道B超檢查明確子宮肌壁間肌瘸，或多發(fā)|I幾瘤中最大肌瘤位于肌壁問。子宮肌瘤最大直徑≤10CM，個數(shù)≤5個，臨床癥狀明顯或子宮增大≥妊娠1周需行手術治療者，且患者希望保留子宮。排除出血性疾病或伴嚴重高血壓冠心病等手術禁忌證患者。經(jīng)患者知情同意后，根據(jù)手術排序，病例隨機分組，遇單數(shù)列入A組，遇偶數(shù)列入B組。A組35例，患者平均年齡J74J6歲，最大肌瘤平均直徑586158CM，平均肌瘤個數(shù)2707個。B組35例，患者平均年齡3686J歲，最大肌瘤平均直徑57218LCM，平均肌瘤個數(shù)26J個。手術方法A組腹腔鏡下子宮肌癟根部肌壁注射經(jīng)生理鹽水20ML稀釋的垂體后葉素12”，注射后用鉗尖壓迫注射點L～2MIN。切開肌層深達肌瘤表層，切口長度與肌瘤直徑一致，用大抓鉗鉗夾肌瘤組織并向心方向牽拉，操作鉗鈍性分離肌層至肌瘤完整剝出，肌瘤蒂部用O號可吸收線套扎，可吸收線連續(xù)縫合子宮創(chuàng)口，瘸核用粉碎機旋切后取出，常規(guī)送病理。|組同樣方法將經(jīng)生理豁水20ML稀釋的縮宮素20“向子宮肌瘤根部肌壁注射，手術方式同組。所有手術由二名同一治療組醫(yī)生完成。觀察L、術中出血量2、手術時問J、用藥前后_虹壓變化1、手術前后血紅蛋白變化5、術后肛門排氣時問6、術

簡介：壓力性尿失禁STRESSURINARYINCONTINENCE，SUI是指患者腹壓突然增加咳嗽、大哭、噴嚏、運動及體位改變時，尿液不自主地由尿道口流出的現(xiàn)象。尿失禁是是影響女性尤其是中老年女性生活質量的主要疾病之一。隨著社會進一步老齡化，SUI越來越受到人們的重視。SUI主要治療措施包括非手術治療和手術治療。非手術治療主要是包括改變生活方式、盆底肌鍛煉、行為療法、生物反饋電刺激治療、藥物治療等，適用于癥狀較輕的患者及年輕女性，使用范圍較窄。手術治療主要包括經(jīng)陰道尿道膀胱頸筋膜縫合術、經(jīng)恥骨后膀胱尿道懸吊術、無張力陰道懸?guī)g等。傳統(tǒng)的膀胱頸懸吊術及其改良手術方法通過膀胱頸懸吊以改變膀胱頸和尿道的角度，治療Ⅰ、Ⅱ型SUI取得較好的效果。但手術創(chuàng)傷較大，懸吊力度不易掌握，可出現(xiàn)矯枉過正而致尿潴留，且不能糾正部分SUI患者的括約肌功能障礙。注射療法是將藥物或化學制劑注射到后尿道或膀胱內(nèi)口周圍粘膜下及肌層中，使尿道腔變窄、拉長和縮小，可不同程度彌補固有括約肌的功能不足，增加尿道阻力，從而改善壓力性尿失禁癥狀。近幾年，注射療法以其簡便、安全、微創(chuàng)的特點而逐漸受到醫(yī)生及病人的重視和歡迎。注射療法常用注射材料有TEFLON特氟隆、膠原、自體脂肪、硅樹脂顆粒、碳珠和微球體等。其近期療效較好，但遠期療效逐漸降低，且上述注射材料具有明顯的副反應。尋找高效、長效、安全的注射材料，是SUI臨床治療的迫切需要。理想的注射材料應該在結構上完整；無毒、無免疫原性；對局部組織僅引起輕微的炎癥反應；顆粒直徑應足夠大＞110UM不會被巨噬細胞吞噬而轉移到遠處器官；近期內(nèi)不會被分解，在足夠長的時間內(nèi)能保持其支撐作用。骨骼肌肌源性干細胞MUSCLEDERIVEDSTEMCELLS，MDSCS具有向肌肉、脂肪、骨骼、軟骨和神經(jīng)細胞等多種細胞分化的潛能，且來源豐富，可在體外分離、培養(yǎng)及擴增，是一種良好的替代治療靶細胞。利用自體MDSC進行注射治療，具有安全、無免疫排斥性、無過敏原性等優(yōu)點，相信在不遠的將來可能會為壓力性尿失禁提供新的治療選擇。本研究采用成年雌性SD大鼠為實驗動物并制作了SUI動物模型，從骨骼肌分離、純化和培養(yǎng)肌源性干細胞，觀察細胞的生長狀態(tài)，應用免疫組化技術以及形態(tài)觀察對MDSC進行了系統(tǒng)的鑒定。通過向大鼠SUI動物模型的尿道周圍注射自體MDSC，觀察了注射前后動物模型尿失禁改善情況以及自體MDSC注射后的存活情況。主要實驗方法及結果如下一、MDSC的分離、純化和培養(yǎng)1MDSC的分離和培養(yǎng)SD大鼠腓腸肌肌塊經(jīng)消化分離后獲得混合細胞產(chǎn)物；使用PERCOLL密度梯度離心法和PREPLATE差速貼壁純化MDSC。觀察見MDSC體積較小，貼壁緩慢，折光性較好，多呈球形、梭形或紡錘形，增殖緩慢；MDSC培養(yǎng)72H后，細胞數(shù)量明顯增多并均勻散在分布，以紡錘形及梭狀為主，少數(shù)形態(tài)不規(guī)則；培養(yǎng)5～7D后，細胞分裂增殖明顯，細胞密度明顯增加，胞體逐漸舒展，細胞體積增大，細胞呈長梭形、長棱形地貼壁生長；培養(yǎng)12～14D，貼壁細胞繼續(xù)增殖，細胞密度增大，并逐漸融合；分化培養(yǎng)812D，細胞呈現(xiàn)明顯極向性生長排列趨勢，可見明顯肌管形成。2不同接種密度對MDSC生長的影響采用MTT比色法，分別以下列不同接種密度2、4、6、8、10、12、14、16105ML接種100ULMDSC于含20％胎牛血清的DMEM培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)板中培養(yǎng)。結果顯示在以10105ML密度接種時活細胞數(shù)量最多，細胞活性較好，有利于MDSC的生長。故以10105ML為適宜接種密度，進行細胞傳代培養(yǎng)。3MDSCS的傳代培養(yǎng)MDSCS在穩(wěn)定培養(yǎng)1416天后，細胞密度顯著增加并逐漸融合，以10105ML為接種密度，予以傳代培養(yǎng)。傳代后的細胞呈長梭形和紡錘形為主，傳14代細胞分裂增殖明顯，適宜行細胞注射實驗。隨著傳代次數(shù)增多，細胞增殖速度逐漸減慢。傳代細胞培養(yǎng)到第7代，細胞仍然存活。4骨骼肌MDSC的鑒定MDSC經(jīng)免疫細胞化學染色和免疫熒光染色鑒定，結果為DESMIN，CD34，SCA1，CD45；肌管SKELETALMYOSINFAST免疫細胞化學染色呈強陽性反應。本部分研究提示，通過消化分離，PERCOLL密度梯度離心和PREPLATE差速貼壁技術，可以獲得純度較高的SD大鼠MDSC；在適宜的培養(yǎng)條件以及接種密度情況下細胞顯現(xiàn)出最佳的生長增殖狀態(tài)，并可穩(wěn)定傳代培養(yǎng)；MDSC免疫細胞化學染色和免疫熒光染色鑒定結果為DESMIN，CD34，SCA1，CD45一。二、大鼠SUI動物模型的制作和MDSC標志基因的轉染1大鼠SUI動物模型的制作以雙側陰部神經(jīng)阻斷的方法，制備大鼠SUI動物模型。尿動力學檢測提示模型動物的最大膀胱容量，LPP和CP均較正常顯著下降；噴嚏負荷實驗陽性率100％，證實SUI動物模型制作成功。2MDSC標志基因的轉染使用攜帶LACZ基因的重組AAV2載體RAAV2LACZ，在丁酸鈉的輔助作用下轉染MDSC，行Β半乳糖苷酶原位染色觀察見大量細胞呈藍染，轉染效率達80％以上，證明轉染成功。本部分研究通過雙側陰部神經(jīng)阻斷的方法，成功建立了SUI的動物模型，為后續(xù)實驗奠定了基礎。該模型具有操作簡便，制作成功率高，仿真度高，順應性好等優(yōu)點。本實驗使用重組AAV2載體RAAV2LACZ，成功高效地轉染了MDSC，使其表達Β半乳糖苷酶，在XGAL染色作用后呈現(xiàn)明顯藍染；該方法簡單易行，為長期觀測MDSC的體內(nèi)狀況創(chuàng)造了條件。三、自體MDSC注射對雌性大鼠SUI的影響1MDSC自體注射將自體MDSC50UL約1106個，注射到細胞來源的SUI模型動物的尿道近端肌層及黏膜下，使局部隆起。2MDSC自體注射對大鼠SUI的影響與注射前相比，大鼠MDSC細胞注射后最大膀胱容量、LPP、CP均有顯著上升，噴嚏負荷實驗陽性率下降顯著，提示自體MDSC注射有效改善SUI癥狀。組織切片檢查提示，注射細胞在局部并未引起明顯慢性炎癥及免疫排斥反應；注射后8W仍有報告基因表達，提示自體MDSC注射后可以長期成活并持續(xù)發(fā)揮作用。本部分研究提示，自體MDSC注射可以有效改善SUI癥狀，未引起明顯慢性炎癥及免疫排斥反應，并且在較長時間內(nèi)持續(xù)產(chǎn)生治療效應。本實驗成功地在體外對MDSC進行了分離、純化和擴增，通過自體MDSC尿道肌層及黏膜下注射，對SUI產(chǎn)生較長時間的治療作用，為大鼠SUI模型提供了一種有效的注射治療方法，同時為MDSC在女性SUI的臨床應用奠定了實驗基礎。

簡介：研究背景及目的股骨頭壞死OSTEONECROSISOFFEMURHEAD，ONFH是臨床上較為常見的難治性疾病之一，多數(shù)進展至股骨頭塌陷從而繼發(fā)骨關節(jié)炎，多數(shù)需行人工關節(jié)置換。目前ONFH的早期治療的重點在于保存股骨頭，防止塌陷。股骨頭的保存治療方法很多，但都有各自的優(yōu)缺點。近年來，骨髓基質細胞MARROWSTROMALCELLS，MSCS移植作為一種新的治療方法，也用于治療ONFH。MSCS移植后在體內(nèi)的轉歸與作用機制是目前研究的熱點。為監(jiān)測活體內(nèi)移植細胞的分布、增殖、遷移等，傳統(tǒng)方法都需要在離體狀態(tài)下進行組織學檢查，難以準確地觀察植入細胞的生長分化情況，無法對干細胞移植的療效做出客觀評價，從而極大的阻礙了干細胞移植在臨床應用上的發(fā)展。隨著分子生物學的發(fā)展和分子影像學概念的產(chǎn)生，人類開始能夠在細胞分子水平評價活體組織細胞的生物學過程。如利用MRI來監(jiān)測移植細胞，其最大的優(yōu)點是能夠無創(chuàng)地進行多次重復檢測。為能在MRI上區(qū)分移植細胞和靶組織細胞，需要對移植細胞進行移植前標記。目前廣泛使用超順磁性氧化鐵SUPERPARAMAGICIRONOXIDE，SPIO標記移植細胞。SPIO是一種納米級粒子，由于其特殊的化學結構，SPIO即使在較弱的磁場中也可以產(chǎn)生較大的磁性，而外磁場撤消后磁性也迅速消失，即具有所謂的超順磁性，可以使MRI的靶區(qū)信號均明顯降低，產(chǎn)生負性對比劑的效應，從而經(jīng)SPIO標記的移植細胞團也就可因含SPIO顆粒而顯示為低信號，這樣就間接反映了移植細胞的分布和聚集情況。目前應用SPIO進行細胞的體內(nèi)示蹤主要應用于神經(jīng)系統(tǒng)和心血管系統(tǒng)研究，在骨骼系統(tǒng)中的應用鮮有報道。本實驗采用SPIO進行標記細胞的體外實驗及模擬股骨頭壞死區(qū)移植細胞的體內(nèi)示蹤，旨在明確SPIO體外標記狗骨髓間充質干細胞MSCS的適當條件，以及經(jīng)MRI體外成像的特征和可成像的最低標記細胞量等；利用MRI進行移植細胞的示蹤，結合組織學觀察移植細胞在股骨頭內(nèi)的存活及轉歸；探討骨髓基質干細胞的成骨及促進股骨頭壞死修復的能力。從而為細胞移植的轉歸與作用機制研究打下工作基礎，為臨床應用骨髓基質細胞治療骨壞死找到一定的理論依據(jù)。實驗方法試驗分兩部分。①超順磁性納米氧化鐵顆粒SPIO體外標記MSCS抽取狗的雙側髂骨骨髓，行梯度離心及貼壁細胞分離法分離骨髓基質干細胞MSCS，進行體外培養(yǎng)擴增。按不同SPIO濃度設定實驗組，觀察不同實驗組之間標記率的差異性、對細胞增殖活性的影響、MRI成像的特征和條件等，找到合適的標記條件。觀察標記后細胞的遠期增殖情況以及SPIO在細胞內(nèi)的存留穩(wěn)定性。②細胞的股骨頭壞死區(qū)內(nèi)移植及示蹤制備股骨頭壞死模型。同時抽取狗雙側髂骨骨髓，行梯度離心及貼壁細胞分離法分離MSCS，進行體外培養(yǎng)擴增。2周后，骨壞死區(qū)病灶刮除，將體外標記了SPIO的MSCS與脫抗原小牛松質骨復合，植入骨壞死區(qū)，另一側單純植入脫抗原小牛松質骨作為對照，術后定期行活體MRI檢測，觀察不同時間段SPIO的體內(nèi)成像特點，并取材行組織學對照。利用顯微鏡、組織化學法及透射電鏡等觀察SPIO的體外標記情況。行普魯士藍染色觀察含鐵顆粒的細胞在體內(nèi)的分布、轉歸等情況。行HE染色及圖像分析，觀察MSCS在體內(nèi)的成骨效果。實驗結果①SPIO可以很好的標記MSCS，并長期存留，適當濃度下對細胞活性無影響，一定數(shù)量時體外可被MRI所檢測。②SPIO標記細胞體內(nèi)移植側MRI檢測可見明顯低密度灶，3個月仍然可被檢測到。③股骨頭缺損內(nèi)發(fā)現(xiàn)大量SPIO陽性細胞，新骨形成越活躍的地方，SPIO陽性細胞數(shù)目越多，很多骨陷窩及骨小梁表面細胞SPIO呈陽性。④MSCS移植側成骨程度強于對照側。實驗側的成骨量、骨基質礦化的程度、骨成熟度高于對照側，含有更加豐富的梭形間充質細胞和成骨細胞。結論SPIO是良好的細胞示蹤劑，MRI體內(nèi)活體示蹤成為可能。移植的骨髓細胞能在股骨頭內(nèi)成活，并能停留在骨缺損部位生長增殖。MSCS能分化成成骨細胞和軟骨細胞參與成骨，能促進骨壞死和骨缺損的修復。

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簡介：目的觀察Ⅱ型大麻素受體（CANNABINOIDRECEPT2，CB2）在類風濕性關節(jié)炎（RHEUMATOIDARTHRITIS，RA）疾病進程中的表達變化，分析CB2選擇性激動劑JWH133對RA炎癥性骨侵蝕的治療作用。方法雄性DBA1小鼠50只，采用隨機數(shù)字表法分為5組，即正常對照組（CONTROL）、模型組（VEHICLE）、JWH133低劑量治療組（LJWH133）、JWH133高劑量治療組（HJWH133）和陽性對照組（甲氨蝶呤治療組，MTX），每組10只。采用牛Ⅱ膠原誘導的小鼠CIA模型，藥物治療組于初次免疫后第28天（D28）經(jīng)腹腔分別給予JWH133（1MGKGD和10MGKGD）和MTX（20MGKG，每周2次），連續(xù)給藥6周。模型組經(jīng)腹腔注射生理鹽水01MLKGD，空白組小鼠常規(guī)飼養(yǎng)，不予處理。分別觀察各組小鼠的體重、后足足掌厚度變化，并對關節(jié)炎的腫脹程度進行評分。MICROCT檢查評估骨組織破壞程度，HE染色評估滑膜增生和炎性細胞浸潤程度，番紅O染色檢測軟骨破壞程度，抗酒石酸酸性磷酸酶（TRAP）染色檢測成熟破骨細胞，免疫組織化學染色檢測CB2、腫瘤壞死因子?。═UMNECROSISFACTΑTNF?。捉樗兀↖NTERLEUKINIL）1Β、白介素6（IL6）、基質金屬蛋白酶3（MATRIXMETALLOPROTEINASES3MMP3）、環(huán)氧化酶2（CYCLOOXYGENASE2COX2）、誘導性一氧化氮合酶（HADUEEDNITRICOXIDESYATHASEINOS）以及核因子ΚB受體活化因子配體（RECEPTACTIVATSOFNUCLEARFACTKAPPABLIG，RANKL）和骨保護素（OSTEOPROTEGERINOPG）的表達變化。結果DBA1小鼠初次免疫21天（D21）開始，體重逐漸下降，最低為（D35，1799±144）G，明顯低于CONTROL組（D35，2181±123）G比較差異有統(tǒng)計學意義（P結論CB2選擇性激動劑JWH133能抑制炎性細胞浸潤，減少炎性因子分泌；JWH133能下調(diào)RANKL表達，促進OPG表達，抑制軟骨和骨組織的破壞。CB2有望成為治療RA炎癥性骨侵蝕的新靶點。

簡介：第一部分皮肌炎多發(fā)性肌炎的胸部HRCT表現(xiàn)目的探討皮肌炎多發(fā)性肌炎DERMATOMYOSITISPOLYMYOSITIS，DMPM的胸部高分辨CTHIGHRESOLUTIONCT，HRCT表現(xiàn)。材料和方法選取215例臨床與HRCT資料完整的DMPM患者，除外合并腫瘤的患者?；仡櫺苑治鯠MPM患者胸部HRCT表現(xiàn)與臨床檢查。結果在215例DMPM患者中，174患者的HRCT有異常表現(xiàn)，142例患者診斷為DMPM相關性ILD。HRCT表現(xiàn)包括磨玻璃樣影124例、實變53例、小葉間隔增厚127例、小葉內(nèi)間質增厚86例、索條92例、胸膜下線68例、蜂窩征29例，牽拉性支氣管擴張67例、小結節(jié)及微結節(jié)42例、縱隔淋巴結腫大70例、縱隔氣腫8例、胸腔積液19例、心包積液42例、心包積液并胸腔積液9例。結論PMDM的胸部HRCT常表現(xiàn)為肺間質異常，HRCT表現(xiàn)對DMPM的診斷與治療有重要參考價值。第二部分皮肌炎多發(fā)性肌炎的胸部HRCT表現(xiàn)與抗JO1抗體的相關性目的探討DMPM的胸部HRCT表現(xiàn)與抗JO1抗體間的相關性。材料和方法第一部分選取的215例DMPM患者，按其抗JO1抗體是否陽性將其分為抗JO1抗體陽性組和抗JO1抗體陰性組，分析兩組胸部HRCT表現(xiàn)。結果抗JO1抗體陰性組出現(xiàn)磨玻璃樣影99例、實變45例、小葉間隔增厚99例、小葉內(nèi)間質增厚63例、索條85例、胸膜下線53例、蜂窩征23例、牽拉性支擴、小結節(jié)及微結節(jié)36例、縱隔淋巴結腫大53例、縱隔氣腫6例、心包積液29例、胸腔積液14例。抗JO1抗體陽性組出現(xiàn)GGO25例、實變8例、小葉間隔增厚28例、小葉內(nèi)間質增厚23例、索條7例、胸膜下線15例、蜂窩征6例、牽拉性支擴20例、小結節(jié)及微結節(jié)6例、縱隔淋巴結腫大17例、縱隔氣腫2例、心包積液13例、胸腔積液5例。與抗JO1抗體陰性組相比，抗JO1抗體陽性組出現(xiàn)GGO、小葉間隔增厚、小葉內(nèi)間隔增厚、索條、胸膜下線、牽拉性支擴、縱隔淋巴結腫大、心包積液明顯增多P＜005。結論GGO、小葉間隔增厚、小葉內(nèi)間隔增厚是抗JO1抗體陽性PMDM最常見的胸部HRCT征象。根據(jù)胸部HRCT征象、結合臨床特點與實驗室檢查，能夠提示抗JO1抗體綜合征的診斷。