海黍子褐藻多糖硫酸酯的分離純化及生物功能研究.pdf

1、海黍子(SargassumKjellmanianum)是馬尾藻科(Sargassaceae)馬尾藻屬(Sargassum)的一種多年生大型海藻,分布于大陸沿岸的冷水水體中,由于其生長(zhǎng)環(huán)境比較特殊,其生長(zhǎng)過(guò)程中合成了一些具有特殊活性的產(chǎn)物,如蛋白質(zhì)、活性多糖等,這些物質(zhì)的存在為尋找天然藥物提供了廣闊的資源,因此海藻中活性物質(zhì)已成為了尋找與研究天然藥物的熱點(diǎn)。褐藻多糖硫酸酯是普遍存在于褐藻中的一種硫酸化多糖,很多研究表明褐藻多糖硫酸酯具有抗

2、氧化、調(diào)節(jié)免疫、抑制腫瘤細(xì)胞增殖等作用。近年,其可以治療慢性腎功能衰竭的作用也被證實(shí)。但由于其結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性,多糖發(fā)揮生物功能的機(jī)理目前還沒(méi)被認(rèn)清,其提取原料也僅限于海帶、羊棲菜等幾種褐藻,對(duì)于其他褐藻如海黍子多糖的研究還較少。本文主要對(duì)山東沿海水體中產(chǎn)量較高的海黍子中褐藻多糖硫酸酯進(jìn)行了提取分離得到海黍子多糖硫酸酯SKP,并采用超聲波輔助自由基降解、色譜分離技術(shù)與硫酸化修飾得到不同硫酸基含量的多糖組分,本文對(duì)其部分理化性質(zhì)與結(jié)構(gòu)組成分析

3、的基礎(chǔ)上,研究了其抗氧化、體內(nèi)外抗腫瘤、免疫調(diào)節(jié)和保濕活性。
　　(1)采用熱水抽提法從海黍子中提取得到海黍子粗多糖SKP,對(duì)SKP進(jìn)行了硫酸化修飾與超聲波輔助自由基法降解,硫酸化修飾得到多糖SOP,降解后多糖經(jīng)DEAE-52纖維素柱層析得到三個(gè)多糖組分SKP1、SKP2和SKP3。經(jīng)測(cè)定,SKP、SOP、SKP1、SKP2和SKP3的硫酸基含量分別為:18.9％、36.7%、8.4%、25.6%和29.9%。
　　(2)多

4、糖部分化學(xué)組成分析結(jié)果顯示,多糖均主要由巖藻糖、半乳糖、甘露糖組成,其次還含有少量的木糖、葡萄糖、阿拉伯糖和鼠李糖。降解前多糖糖醛酸含量為23.49%,降解后分級(jí)的三個(gè)多糖組分糖醛酸含量有所下降;分級(jí)后總糖含量明顯提高。紅外光譜分析結(jié)果顯示,幾種多糖組分均表現(xiàn)出硫酸基特征吸收。
　　(3)對(duì)不同硫酸基含量多糖進(jìn)行內(nèi)體外免疫與抗腫瘤試驗(yàn),結(jié)果表明,海黍子硫酸多糖SKP1、SKP2和SKP3均有一定的促進(jìn)免疫細(xì)胞增殖的作用,其中SKP

5、2和SKP3多糖組分均表現(xiàn)出極顯著的促進(jìn)脾淋巴細(xì)胞與巨噬細(xì)胞增殖,并且可以提高巨噬細(xì)胞吞噬中性紅與釋放NO的能力;海黍子多糖硫酸酯的體外對(duì)HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞)、Hela(人宮頸癌細(xì)胞)增殖以及小鼠體內(nèi)S-180肉瘤細(xì)胞作用結(jié)果顯示,海黍子硫酸多糖在體外對(duì)Hela細(xì)胞具有一定的抑制作用,對(duì)HT-29沒(méi)有明顯的抑制作用,SKP2與SKP3在小鼠體內(nèi)可以顯著抑制S-180在荷瘤小鼠增殖與擴(kuò)散,且成劑量依賴(lài)性。
　　(4)海黍子多糖

6、具有顯著的抗氧化作用,主要表現(xiàn)在對(duì)超氧陰離子自由基與羥自由基具有明顯的清除作用,其中SKP3對(duì)·OH和O2-·的清除作用最為明顯,清除率可達(dá)79.09%和68.22%,各多糖組分對(duì)有機(jī)自由基DPPH也有顯著的清除作用,且清除率與劑量有依賴(lài)作用,也隨著硫酸基含量的提高有所增加。
　　(5)對(duì)海黍子硫酸多糖的保濕與吸濕活性的研究結(jié)果表明,降解前多糖組分SKP具有良好的保濕與吸濕活性,保濕率和吸濕率分別可達(dá)67.89%和49.22%,吸