黨參多糖硫酸酯的制備及生物學(xué)活性初步研究.pdf

1、目的:對洛龍黨參多糖的提取、結(jié)構(gòu)改造以及生物活性進(jìn)行初步探索，同時采用不同分析方法對黨參多糖純化組分進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征，并測定純化后的多糖含量、糖醛酸含量。采用GC-MS分析黨參多糖中的單糖組成。在黨參多糖的硫酸酯(SCOP)合成工藝中，選擇氨基磺酸作為多糖的酯化試劑，并對酯化后的多糖與未酯化的多糖進(jìn)行生物活性初步探索，以期為黨參多糖的活性研究提供理論依據(jù)。
　　 方法:采用L9(34)正交設(shè)計(jì)法優(yōu)化洛龍黨參多糖提取工藝;對提取后的黨

2、參多糖初步分離后進(jìn)行硫酸化結(jié)構(gòu)改造，選擇U8(43)均勻設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)優(yōu)化黨參多糖硫酸酯合成工藝。對硫酸酯化后黨參多糖進(jìn)行了抗病毒作用研究及免疫活性研究?？共《狙芯窟x擇Vero細(xì)胞作為體外模型，并探討其可能作用機(jī)制，采用細(xì)胞病變效應(yīng)法(CPE)和MTT法對硫酸化多糖抗HSV-1病毒增殖作用機(jī)制進(jìn)行探討。免疫學(xué)活性研究選擇環(huán)磷酰胺(CTX)誘導(dǎo)的小鼠造模，取肝臟、脾臟進(jìn)行免疫學(xué)指標(biāo)考察;骨髓涂片后用Gimesa染色并記錄嗜多染紅細(xì)胞中出現(xiàn)微核的

3、數(shù)量，并對病變細(xì)胞出現(xiàn)的數(shù)目進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。
　　 結(jié)果:洛龍黨參多糖最佳提取工藝為:溫度100℃，加水量為16倍，提取時間為3h，提取次數(shù)為2次;經(jīng)GC-MS分析表明黨參多糖COP-4組分，為一種雜多糖，由阿拉伯糖，半乳糖、葡萄糖組成。均勻?qū)嶒?yàn)設(shè)計(jì)優(yōu)化黨參多糖硫酸酯合成工藝為:反應(yīng)溫度60℃，反應(yīng)時間15min，加入氨基磺酸為0.04mol，硫酸根取代度為0.74;硫酸酯化多糖抗HSV-1病毒的增殖活性結(jié)果表明，酯化后多糖對Ve

4、ro細(xì)胞的安全劑量為0.2mg/mL，HSV-1的TCID50為10-8，硫酸化后多糖呈現(xiàn)出良好的抗病毒效果。對昆明種小鼠的免疫學(xué)活性考察發(fā)現(xiàn)，黨參多糖對CTX造模后小鼠有影響，各組小鼠給藥后的臟器指數(shù):分子量為3500～10000的小鼠脾臟指數(shù)4.26±1.33，胸腺指數(shù)為:1.71±0.12;分子量為10000以上多糖給藥后小鼠的的脾臟指數(shù)為4.59±1.65，胸腺指數(shù)為1.92±0.27.
　　 結(jié)論:(1)洛龍黨參多糖的