條斑紫菜多糖的生物學(xué)活性研究.pdf

1、本文應(yīng)用分離純化的條斑紫菜多糖精品，通過小鼠體外和體內(nèi)系列實(shí)驗(yàn)，對(duì)條斑紫菜多糖的生物學(xué)活性進(jìn)行了研究。條斑紫菜多糖生物活性實(shí)驗(yàn)研究包括：條斑紫菜多糖對(duì)睪丸支持細(xì)胞的作用、對(duì)脾淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)的影響、對(duì)多種人腫瘤細(xì)胞的作用以及對(duì)四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)作用。 首次研究了條斑紫菜多糖對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞的增殖作用。通過實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，條斑紫菜多糖對(duì)大鼠睪丸支持細(xì)胞生長(zhǎng)增殖具有明顯的促進(jìn)作用，并且這種促進(jìn)作用隨著條斑紫菜多糖濃度提高而越加明

2、顯。當(dāng)濃度為0.05mg'ml-1(低濃度組)時(shí)，其增殖率達(dá)到了125.9％(p<0.01)，當(dāng)濃度為10mg．ml。時(shí)(高濃度組)，其增殖率具有明顯激增作用，高達(dá)354.5％(p<0.01)。盡管激增機(jī)理目前還不十分清楚，但為今后支持細(xì)胞與其它功能細(xì)胞的聯(lián)合移植以及提高精子質(zhì)量及男性不育癥的治療有著重要指導(dǎo)意義。 體外培養(yǎng)條件下分別用不同濃度的條斑紫菜多糖以及條斑紫菜多糖與ConA或LPS協(xié)同處理小鼠脾淋巴細(xì)胞，通過MTT法觀

3、察條斑紫菜多糖對(duì)小鼠脾淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)小鼠脾淋巴細(xì)胞的細(xì)胞周期變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果發(fā)現(xiàn)條斑紫菜多糖處理小鼠脾淋巴細(xì)胞72h后對(duì)其生長(zhǎng)有明顯促進(jìn)作用，且呈劑量依賴效應(yīng)，0.25mg·ml-1，0.5mg·ml-1和1mg·ml-1條斑紫菜多糖處理小鼠脾淋巴細(xì)胞后，小鼠脾淋巴細(xì)胞的存活率分別為157.5％，162。1％和173.4％(p<0.01)。條斑紫菜多糖與ConA或LPS共同處理小鼠脾淋巴細(xì)胞時(shí)，小鼠脾淋巴細(xì)胞的存活

4、率高于ConA和LPS單獨(dú)的作用，表現(xiàn)出明顯的協(xié)同效應(yīng)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)表明條斑紫菜多糖可以促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞從G1期進(jìn)入S期，表明條斑紫菜多糖可以促進(jìn)小鼠脾淋巴細(xì)胞生長(zhǎng)，為今后研究多糖提高機(jī)體免疫力的作用機(jī)理奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。 體外培養(yǎng)條件下分別用不同濃度的條斑紫菜多糖處理四種人腫瘤細(xì)胞，通過MTT法觀察條斑紫菜多糖對(duì)四種人腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響。采用流式細(xì)胞儀檢測(cè)腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)條斑紫菜多糖誘導(dǎo)HO-8910、MC

5、F-7、K562和SMMC-7721腫瘤細(xì)胞72h后對(duì)其生長(zhǎng)有明顯的抑制作用，呈劑量依賴效應(yīng)，500mg·L-1條斑紫菜多糖對(duì)四種腫瘤細(xì)胞的抑制率分別為21.2％，23.6％，18.8％和21％(p<0.001)。流式細(xì)胞儀檢測(cè)表明條斑紫菜多糖可以阻滯腫瘤細(xì)胞的細(xì)胞周期于G0/G1期或G2/M期。 通過建立四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠模型，研究條斑紫菜多糖對(duì)四氯化碳(CCl4)誘導(dǎo)的急性肝損傷的保護(hù)作用。以0.2％C

6、Cl4橄欖油溶液經(jīng)腹腔注射，制備小鼠急性肝損傷模型，測(cè)定給藥后模型小鼠血清和肝勻漿的丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)，肝勻漿超氧化物岐化酶(SOD)以及丙二醛(MDA)含量，計(jì)算肝臟指數(shù)，并在光鏡下觀察肝組織病理學(xué)變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，急性肝損傷模型組與正常對(duì)照組比較，各項(xiàng)指標(biāo)均有顯著差異(p<0.01)：條斑紫菜多糖組與模型組比較，小鼠肝臟指數(shù)，血清ALT，AST和肝勻漿ALT，AST，MDA都明顯降低(p<0.05