東海厚殼貽貝多糖的抗衰老生物學(xué)活性研究.pdf

1、本文主要對東海厚殼貽貝多糖(Mytilus coruscus polysaccharide，MP)進(jìn)行了分離純化、抗衰老生物學(xué)活性研究。 1．MP的分離純化。通過新鮮厚殼貽貝肉組織勻漿、熱水抽提、水提液Sevag法除蛋白的方法得到貽貝多糖。同時(shí)，對分離純化的條件進(jìn)行了優(yōu)化。 2．MP的抗衰老生物學(xué)活性研究。建立24月齡SD大鼠自然衰老模型，分為老年正常對照組、貽貝粉組(1g/kg/d)、貽貝多糖低劑量組(200mg/kg

2、/d)、貽貝多糖高劑量組(400mg/kg/d)，3月齡大鼠5只為青年對照組，灌胃給藥(1次/天)；觀察大鼠心臟、肝臟、腎、脾的臟器指數(shù)，對其心臟、肝臟、腦組織進(jìn)行切片觀察病理學(xué)變化，測定大鼠血清及肝臟中SOD、MDA、GSH-Px水平，測定腦組織中SOD、MDA水平，冰凍切片染色觀察腦組織中β-半乳糖苷酶含量，測定血清主要生化指標(biāo)。 3．MP的抗衰老機(jī)制研究。建立24月齡SD大鼠自然衰老模型，分為老年正常對照組、貽貝粉組(1g

3、/kg/d)、貽貝多糖低劑量組(200mg/kg/d)、貽貝多糖高劑量組(400mg/kg/d)，3月齡大鼠5只為青年對照組，灌胃給藥90天(1次/天)；實(shí)驗(yàn)大鼠末次給藥的次日給予10％水合氯醛麻醉，斷頭取腦組織約0.3g左右，提取腦組織總蛋白和核蛋白，免疫印記分析P16和磷酸化型Rb的表達(dá)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過分離純化后得到的貽貝多糖呈白色粉末，水溶性較好。經(jīng)分離純化條件的優(yōu)化，縮短了分離純化的時(shí)間，多糖得率提高至貽貝鮮組織的

4、7.7％，多糖含量為91％。抗衰老生物學(xué)活性實(shí)驗(yàn)顯示，與老年組相比，貽貝多糖高劑量組的心臟、肝臟、腦組織病理切片HE染色觀察未見明顯衰老性改變，其血清、肝臟中SOD、GSH-Px水平增高，MDA含量降低；與衰老組相比，貽貝多糖組腦組織中SOD、GSH-Px水平增高，MDA升高，β-半乳糖苷酶含量降低。與老年對照組相比，貽貝多糖組的p16蛋白表達(dá)下降，磷酸化型Rb表達(dá)無增高或下降。 結(jié)論：獲得貽貝多糖呈白色粉末，水溶性較好；貽貝多