石斛多糖和生物堿測定及多糖抗衰老實驗研究.pdf

1、目的：比較產(chǎn)自貴州赤水人工栽培的不同生長期(1、2、3年)金釵石斛與鐵皮石斛中主要活性成分多糖和總生物堿的含量。方法：選擇同一產(chǎn)地不同生長期的金釵和鐵皮石斛3批，采用苯酚，硫酸比色法測定其多糖含量，在490 nm處使用紫外-可見分光光度計測定吸收度；酸性染料比色法測定其總生物堿含量，在620nm處使用紫外-可見分光光度計測定吸收度；氣相色譜法測定石斛堿在石斛藥材中的含量。結(jié)果：樣品濃度在4.95-39.95μg·ml-1內(nèi)，多糖的濃度和

2、吸光度有良好的線性關(guān)系(r=0.9969)，金釵石斛1、2、3年生多糖含量分別是7.74%、2.75%、2.20%，鐵皮石斛1、2、3年生多糖含量分別是40.40%、30.96%、48.87%；樣品在39.6-198.4μg·ml-1內(nèi)，石斛堿的濃度和吸光度有良好的線性關(guān)系(r=0.9945)，金釵石斛1、2、3年生總生物堿含量分別是0.5489%、0.4166%、0.3255%，鐵皮石斛1、2、3年生總生物堿含量分別是0.0114%、

3、0.0111%、0.0121%；金釵石斛1、2、3年生石斛堿含量分別是0.2212%、0.2229%、0.1129%，而鐵皮石斛中幾乎不含有石斛堿。結(jié)論：赤水產(chǎn)一年生金釵石斛中多糖和總生物堿含量最高，故金釵石斛以一年采收最佳；赤水產(chǎn)三年生鐵皮石斛多糖和總生物堿含量最高，故鐵皮石斛以三年采收最佳。
　　 目的：研究金釵石斛多糖對D-半乳糖誘導的衰老小鼠學習記憶及抗衰老的作用。
　　 方法：小鼠頸背部皮下注射D-半乳糖(12

4、0 mg/kg)建立衰老模型，同時以石斛多糖(80，160，320 mg/kg)作為抗衰老實驗藥物灌服。60天后，與衰老小鼠比較在行為、記憶上的差異；與衰老小鼠比較血漿、腦組織以及肝臟組織內(nèi)的丙二醛(MDA)含量及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物歧化酶(GSH-Px)、Na+-K+-ATPase活性的差異；計算免疫組織器官胸腺和脾臟的濕重指數(shù)；免疫組化法檢測腎組織中細胞周期調(diào)節(jié)因子p21的表達情況；HE染色法觀察胸腺、皮膚組織

5、的病理變化。
　　 結(jié)果：在跳臺及暗室實驗中石斛多糖組的潛伏期明顯長于模型組(P<0.05)；水迷宮實驗中石斛多糖組的潛伏期明顯低于模型組(P<0.05)：石斛多糖組SOD、GSH-Px以及Na+-K+-ATPase酶活性高于模型組，而MDA含量低于模型組(P<0.05)；石斛多糖組胸腺和脾臟的濕重指數(shù)低于模型組(P<0.05)；石斛多糖組腎臟p21表達量比模型組低(P<0.05)；HE染色顯示，石斛多糖組可拮抗D-半乳糖誘導的