隨機(jī)重組多表位惡性瘧疾疫苗m.rcag1的制備及免疫保護(hù)性差異的機(jī)理研究

1、隨機(jī)重組多表位惡性瘧疾疫苗M ．R C A g 一1的制備及免疫保護(hù)性差異的機(jī)理研究博士研究生： 王健指導(dǎo)教師： 王恒教授學(xué)科專業(yè)： 病原生物學(xué)研究方向： 分子疫苗學(xué)申請學(xué)位： 醫(yī)學(xué)博士入學(xué)時間： 2 0 0 5 年9 月完成日期： 2 0 0 8 年5 月2 7 日所 院 ： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院2 0 0 8 年6 月中國北京北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院博士研究生學(xué)位論文隨機(jī)重組多表位惡性瘧疾疫苗M 。R C A g

2、 一1 的制備及免疫保護(hù)性差異的機(jī)理研究王健王恒( 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所，北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院基礎(chǔ)學(xué)院，1 0 0 0 0 5 ， 北京)摘要蚊媒傳播的瘧疾是全球最嚴(yán)重的三大傳染病之一。目前，全球約4 0 ％的世界人口處于罹患瘧疾的危險之中，而每年有5 億人受到瘧原蟲感染，約1 0 0 萬人死于惡性瘧疾，其中大部分是五歲以下的兒童和孕婦。由于惡性瘧原蟲對現(xiàn)有藥物的抗藥性不斷出現(xiàn)和蔓延，蚊媒對殺蟲劑抗藥性的產(chǎn)生等因素影響，瘧疾的防治成為

3、世界性的難題之一。瘧原蟲生活周期復(fù)雜，抗原具有階段特異性、蟲株差異性和高度變異性等特點，長期以來形成研制抗瘧原蟲疫苗的技術(shù)瓶頸。因此，針對惡性瘧原蟲不同生活時期的免疫反應(yīng)特點，選取誘導(dǎo)產(chǎn)生多種免疫反應(yīng)類型的不同抗原構(gòu)建多表位疫苗已經(jīng)成為研究瘧疾疫苗的熱點。在本課題組前期工作中，針對參與抗瘧原蟲紅內(nèi)期感染的免疫類型，選擇了來自8 個惡性瘧原蟲抗原的1 1 個B 細(xì)胞和T h 細(xì)胞表位，利用e p i t o p e s h u f f l

4、 i n g ( 表位改組) 技術(shù)成功構(gòu)建了隨機(jī)組合多表位惡性瘧疾疫苗M ，R C A g —l 。通過在B A L S ／c小鼠、 新西蘭兔、恒河猴的免疫原性和體內(nèi)外保護(hù)性實驗觀察，證實其具有良好的免疫原性和免疫保護(hù)效果，是一個極具潛力的瘧疾候選疫苗。本研究首先按照國家生物制品研制標(biāo)準(zhǔn)，篩選出表達(dá)多表位疫苗M ．R C A g 一1 重組蛋白的工程菌，建立了高效表達(dá)蛋白的純化工藝，評價了三種已用于人臨床試驗的佐劑與M ．R C A g