蘿芙木rauvolfiaverticillatalour.baill.毛狀根外源基因表達(dá)系統(tǒng)的建立

1、單位代碼! Q 鰻§學(xué) 號(hào)S 2 Q 塑§2 l西南大學(xué)碩士學(xué)位論文蘿芙木( 尺臼甜v D 歷臼1 ，g 力f c z 比慟( L o u r ．) B a i l l ．)毛狀根外源基因表達(dá)系統(tǒng)的建立論文作者：王泓指導(dǎo)教師：孫敏教授廖志華教授學(xué)科專業(yè)：植物學(xué)研究方向：植物生物學(xué)與生物技術(shù)提交論文日期：2 0 0 6 年4 月 日論文答辯日期：2 0 0 6 年5 月 日學(xué)位授予單位：西南大學(xué)中國(guó)·重慶2

2、0 0 6 年5 月對(duì)蘿芙木毛狀根的培養(yǎng)條件進(jìn)行了篩選：發(fā)現(xiàn)在1 ／2 M s + 1 B A ( O ．2 m ∥m L ) +N A A ( O ．1 m ∥m L ) 固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)最好。后在附加潮露素2 0 m ∥m L 的抗性培養(yǎng)基上篩選，初步得到攜帶有s 護(hù)外源基因的毛狀根。通過聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)( P 0 1 y m e m e c h a j nr e a c t i o n ，P c R ) 對(duì)轉(zhuǎn)化毛狀根中j Ⅷ』6 、

3、∞如基因以及外源基因的檢測(cè)，確定了J 伊在宿主基因組的整合，進(jìn)一步證明前面所獲得的毛狀根為攜帶有J 肛外源基因的毛狀根。通過H P L c 檢測(cè)毛狀根中利血平的含量，結(jié)果顯示利血平在自然根( 種植在田問的蘿芙術(shù)植株的根) 的含量最高達(dá)干重的0 ．0 2 6 ％，空白毛狀根( 來(lái)攜帶s 驢基因的毛狀根) 中的含量最高可達(dá)干重的0 ．0 9 6 ％，為自然根中的3 ．7 倍，攜帶有s 護(hù)外源基因的毛狀根中可高達(dá)干重的1 ．3 6 7 ％，為