2013年-2016年淄博市副溶血性弧菌血清分型、分子特征及溯源研究.pdf

1、副溶血性弧菌(V.parahaemolyticus, VP)是嗜鹽性革蘭氏陰性菌，主要存在于我國沿海區(qū)域，該菌能夠引起食源性食物中毒及疾病，從而導(dǎo)致地方性流行的胃腸炎暴發(fā)，其發(fā)生規(guī)模在我國沿海和部分內(nèi)陸區(qū)域已經(jīng)表現(xiàn)出明顯的上升趨勢，高居細(xì)菌性食物中毒的首要位置。大量研究發(fā)現(xiàn)，耐熱性直接溶血素(thermostable direct hemolysin, TDH)或TDH相關(guān)溶血素(TDH-related hemolysin, TRH)存

2、在于能夠致病的副溶血弧菌中。這兩種溶血素是導(dǎo)致副溶血性弧菌致病的主要毒力因子，與該菌的致病能力密切相關(guān)。副溶血性弧菌實(shí)驗(yàn)室的常用分型方法主要有生化分型和血清學(xué)分型，這兩種方法不能有效地對目標(biāo)菌的同源性進(jìn)行分析，但是脈沖場凝膠電泳技術(shù)(Pulsed field gel electrophoresis, PFGE)方法具有分型力好、分辨力強(qiáng)、可重復(fù)性的優(yōu)點(diǎn)，常被用于微生物的鑒定分型研究。
　　本研究對淄博市2013年-2016年自水產(chǎn)

3、品分離出的副溶血性弧菌菌株毒力相關(guān)基因的分布情況進(jìn)行了分析，同時應(yīng)用PFGE技術(shù)對VP分離菌株進(jìn)行分子分型，研究其同源性，為副溶血性弧菌導(dǎo)致食源性疾病的防控提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　目的：利用血清分型方法、毒力基因分子檢測和PFGE技術(shù)對淄博市2013年-2016年市售水產(chǎn)品中分離得到的副溶血性弧菌進(jìn)行比對分析，了解近4年該目標(biāo)菌之間存在的關(guān)系，分析其流行規(guī)律，為有效預(yù)防和控制食源性疾病的發(fā)生提供科學(xué)依據(jù)。
　　方法：對淄博市20

4、13年-2016年分離自市售新鮮水產(chǎn)品的副溶血性弧菌菌株進(jìn)行復(fù)蘇培養(yǎng)和復(fù)核鑒定。對上述目標(biāo)分離菌株進(jìn)行血清分型，探討血清型的分布特點(diǎn)；用PCR對tdh和trh基因進(jìn)行檢測；PFGE技術(shù)進(jìn)行副溶血性弧菌的分子分型，探討菌株的同源性。
　　結(jié)果：①85株分離株經(jīng)復(fù)核鑒定，復(fù)核結(jié)果與初始鑒定一致。共分出7個O抗原血清型，以O(shè)2群為優(yōu)勢血清型，占29.41%。K抗原鑒定出型別較少，只有5種，且分布較分散，無明顯趨勢。②多重?zé)晒釶CR檢測結(jié)

5、果表明，85株分離菌株毒力相關(guān)基因tdh攜帶率為3.53%，trh攜帶率為5.88%，trh高于tdh。③PFGE分型結(jié)果顯示，血清型同為O2:K28的2株分離株P(guān)FGE圖譜不盡相同，其他分離菌株血清型各不相同且PFGE圖譜各自成型，相似度極低。攜帶毒力基因的分離株間親緣關(guān)系較遠(yuǎn)，沒有明顯優(yōu)勢帶型。
　　結(jié)論：①淄博市副溶血性弧菌分離菌株O抗原分布以O(shè)2群居多，K抗原型別較少且分布較分散，無明顯趨勢。②市售水產(chǎn)品分離菌株中，毒力基