例肝臟干細(xì)胞移植術(shù)

1、肝臟干細(xì)胞移植術(shù) 臨床應(yīng)用初步體會(huì),,一、干細(xì)胞的概念,干細(xì)胞是能夠長(zhǎng)期存活，具有不斷的自我繁殖能力和多向化潛能，幾乎存在于所有組織中的原始細(xì)胞。可以分為生殖干細(xì)胞和功能干細(xì)胞。 干細(xì)胞是不均一的細(xì)胞群體，缺乏直接的形態(tài)學(xué)特征。其表面無(wú)血型分子、無(wú)MHC分子，故不需要配血型及MHC。,二、骨髓干細(xì)胞和臍血干細(xì)胞的特點(diǎn),干細(xì)胞長(zhǎng)期存活不斷地自我繁殖的特性： 干細(xì)胞不論在體內(nèi)還是體外培養(yǎng)都能表現(xiàn)為長(zhǎng)期存活，不斷地自我繁殖。

2、只有長(zhǎng)期存活，才能用于臨床治療。,二、骨髓干細(xì)胞和臍血干細(xì)胞的特點(diǎn),可塑性： 成體干細(xì)胞，可以跨系跨胚層分化為所有的組織細(xì)胞類(lèi)型的特性，稱為可塑性。這是成體干細(xì)胞能夠治療各種細(xì)胞損傷性疾病的理論基礎(chǔ)。,二、骨髓干細(xì)胞和臍血干細(xì)胞的特點(diǎn)（3）,化學(xué)趨向性： 成體干細(xì)胞的分化常發(fā)生在病理情況下，干細(xì)胞向病理部位遷移，成為病理部位的前體細(xì)胞，并分化為終末成熟細(xì)胞，因此不僅可以利用干細(xì)胞來(lái)修復(fù)組織的損傷，而且可以把它作為

3、多種疾病細(xì)胞替代治療和基因治療的理想載體”。這一特性被稱為稱為化學(xué)趨向性。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,意義： 臨床證實(shí)，干細(xì)胞移植能夠顯著促進(jìn)終末期肝病患者肝功能恢復(fù)，治療安全有效，在當(dāng)今原位肝移植供肝緊缺的情況下，可以部分代替肝移植治療，值得臨床上大力開(kāi)展。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,適應(yīng)癥： 肝硬化，肝功能 Child－pugh分級(jí)A、B級(jí)，移植前后加強(qiáng)保肝、降酶、抗病毒治療。急性、亞急性重型肝炎恢

4、復(fù)期。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,禁忌癥：原發(fā)性肝癌；重型肝炎急性期；肝功能C級(jí)。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,程序 ： 干細(xì)胞來(lái)源：采集胎盤(pán)臍血，臍血要求：足月產(chǎn)婦，留臍血70-100ml存放臍血袋內(nèi)，放置2-8℃保存（<12小時(shí)）。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細(xì)胞分離注意事項(xiàng)： 全部分離操作必須在萬(wàn)級(jí)潔凈實(shí)驗(yàn)室、局部百級(jí)超凈工作臺(tái)內(nèi)完成，以保證整個(gè)分離過(guò)程的無(wú)菌操作；必須保

5、證在操作過(guò)程中使用的其他容器及所有接觸臍血的物品無(wú)菌!,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細(xì)胞分離注意事項(xiàng)： 由細(xì)胞分離專業(yè)人員按試劑盒說(shuō)明書(shū)要求操作分離干細(xì)胞，儲(chǔ)存在專用試管中，在2-8℃容器內(nèi)，不超過(guò)1小時(shí)，留取2ml做細(xì)胞計(jì)數(shù)、CD34檢測(cè)、細(xì)菌培養(yǎng)、內(nèi)毒素檢測(cè)。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細(xì)胞分離原理： 主要是利用改變細(xì)胞膜電位（離子濃度）產(chǎn)生的血沉現(xiàn)象，采取負(fù)收集混合法分離并收

6、集細(xì)胞。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,干細(xì)胞的檢測(cè)： 干細(xì)胞終制品有核細(xì)胞存活率必須大于96%，有核細(xì)胞收集率大于85%（我院干細(xì)胞收集計(jì)數(shù)大于5.0*108 ）.,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,病例選擇： 乙肝患者11例，丙肝2例，特發(fā)性1例，共計(jì)14例。Child C級(jí)11例，B級(jí)2例，A級(jí)1例。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,患者入院后完善相關(guān)檢查，明確診斷后給予保肝降酶、抗病毒

7、、退黃利尿、輸白蛋白、血漿治療。患者腹脹、乏力、納差、腹水等消退或減輕。經(jīng)與患者及其家屬溝通，征得知情同意的情況下，采用干細(xì)胞移植治療。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,術(shù)前查常規(guī)化驗(yàn)檢查、PCR-HBV-DNA,CT肝臟（平掃CT值、強(qiáng)化CT值、三維血管成像）、門(mén)靜脈一級(jí)分枝肝臟截面積。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,在介入治療室內(nèi)，病人首先進(jìn)行肝動(dòng)脈造影記錄、攝像，14例患者中，發(fā)現(xiàn)2例直徑為1.5cm的小肝癌，隨后行碘

8、油5ml、MMC10mg、EADR 20mg 由微導(dǎo)管行TACE；然后經(jīng)肝固有動(dòng)脈再注入干細(xì)胞（慢速，2ml/min）。術(shù)后股動(dòng)脈穿刺點(diǎn)壓迫止血6小時(shí)。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,術(shù)后處理： 術(shù)后常規(guī)監(jiān)護(hù)、治療，特別用藥:HGF180mg ivgtt qd×14天，生長(zhǎng)激素4u皮下×14天；發(fā)現(xiàn)有小肝癌的患者加用IL-2 100萬(wàn)u ivgtt qd×14天。注意繼續(xù)抗病毒

9、、保肝及對(duì)癥支持治療。,三、干細(xì)胞移植在肝臟疾病中的應(yīng)用,療效觀察： 術(shù)后1、2周常規(guī)化驗(yàn)檢查，在干細(xì)胞移植后4周常規(guī)化驗(yàn)，第10周、第16周分別做常規(guī)化驗(yàn)、肝臟CT測(cè)定。,四、干細(xì)胞移植治療肝臟疾病應(yīng)遵守的四項(xiàng)基本原則,自愿原則：臍血供者、肝病患者自愿；土壤原則：盡可能將肝功能提升至A級(jí)，解決病人可能的出血問(wèn)題，腹水消失，膽紅素降至43nmol/L；,干細(xì)胞移植治療肝臟疾病應(yīng)遵守的四項(xiàng)基本原則,滅“蟲(chóng)”原則：乙、

10、丙肝患者盡量將病毒轉(zhuǎn)為陰性，或HBV-DNA3.5kg,剖腹產(chǎn)。,我院已治療患者療效觀察,目前有10例完成了4周觀察，有4例完成了16周觀察，臨床療效超過(guò)預(yù)期值。,一、術(shù)后并發(fā)癥,12例患者在術(shù)后2周內(nèi)未出現(xiàn)任何不適癥狀，肝功化驗(yàn)變化不大；2例同時(shí)行TACE的患者，出現(xiàn)發(fā)熱、肝區(qū)不適，其中1例患者術(shù)后第2日體溫超過(guò)38.2℃，均未使用激素，給予吲哚美辛栓30mg肛塞后病情好轉(zhuǎn)，共發(fā)熱3天。,二、短期療效（1－4周）,患者均在術(shù)后1周左右

11、出現(xiàn)精神、體力、食欲明顯好轉(zhuǎn)，原有腹脹、噯氣等癥狀消失，到2周觀察期結(jié)束時(shí)，盡管肝功并無(wú)明顯改善，但患者癥狀卻明顯好轉(zhuǎn)：精神、體力、食欲明顯好轉(zhuǎn)，患者間斷補(bǔ)充白蛋白，雙下肢水腫消失，未發(fā)現(xiàn)明顯不良反應(yīng)。,三、近期療效（10周）（4例平均值）,肝功：ALT AST基本恢復(fù)正常；前白蛋白：由23mg/L升至185mg/L；白蛋白：由28.6g/L升至37.2g/L；總膽紅素：由37.5mmol/L降至31.2mmol/L；血凝I

12、號(hào)：PTa由41 ％升至67％,三、中期療效（16周以內(nèi)）,行干細(xì)胞移植的患者治療前、　　　　　　　治療后的平掃CT對(duì)比： 治療前 治療后10周 治療后16周,三、中期療效（16周以內(nèi)）,下面是同一患者治療 前后的強(qiáng)化CT對(duì)比：

13、 治療前 治療后10周 治療后16周,四、其他觀察項(xiàng)目,4例患者的肝臟最大截面積由124增至198cm2肝臟CT值平掃由52.7降至49.2PV值變化不大,五、同一患者治療前、后平掃CT對(duì)比,治療前術(shù)后10周術(shù)后16周,六、