色譜法的分類及其原理

1、色譜法的分類及其原理（一）按兩相狀態(tài)氣相色譜法:1、氣固色譜法2、氣液色譜法液相色譜法:1、液固色譜法2、液液色譜法（二）按固定相的幾何形式1、柱色譜法(columnchromatography)：柱色譜法是將固定相裝在一金屬或玻璃柱中或是將固定相附著在毛細(xì)管內(nèi)壁上做成色譜柱，試樣從柱頭到柱尾沿一個(gè)方向移動(dòng)而進(jìn)行分離的色譜法2、紙色譜法（paperchromatography）：紙色譜法是利用濾紙作固定液的載體，把試樣點(diǎn)在濾紙上，然后用

2、溶劑展開，各組分在濾紙的不同位置以斑點(diǎn)形式顯現(xiàn)，根據(jù)濾紙上斑點(diǎn)位置及大小進(jìn)行定性和定量分析。3、薄層色譜法(thinlayerchromatographyTLC)：薄層色譜法是將適當(dāng)粒度的吸附劑作為固定相涂布在平板上形成薄層，然后用與紙色譜法類似的方法操作以達(dá)到分離目的。（三）按分離原理按色譜法分離所依據(jù)的物理或物理化學(xué)性質(zhì)的不同，又可將其分為：用來作為層析用固定相，將另一方從復(fù)雜的混合物中選擇可逆地截獲，達(dá)到純化的目的。可用于分離活體

3、高分子物質(zhì)、過濾性病毒及細(xì)胞?；蛴糜趯?duì)特異的相互作用進(jìn)行研究。（四）按原理色譜過程的本質(zhì)是待分離物質(zhì)分子在固定相和流動(dòng)相之間分配平衡的過程，不同的物質(zhì)在兩相之間的分配會(huì)不同，這使其隨流動(dòng)相運(yùn)動(dòng)速度各不相同，隨著流動(dòng)相的運(yùn)動(dòng)，混合物中的不同組分在固定相上相互分離。根據(jù)物質(zhì)的分離機(jī)制，又可以分為吸附色譜、分配色譜、離子交換色譜、凝膠色譜、親和色譜等類別。1、吸附色譜:吸附色譜利用固定相吸附中心對(duì)物質(zhì)分子吸附能力的差異實(shí)現(xiàn)對(duì)混合物的分離，吸附

4、色譜的色譜過程是流動(dòng)相分子與物質(zhì)分子競(jìng)爭(zhēng)固定相吸附中心的過程吸附色譜的分配系數(shù)表達(dá)式如下：K_a=frac[X_a][X_m]其中[Xa]表示被吸附于固定相活性中心的組分分子含量，[Xm]表示游離于流動(dòng)相中的組分分子含量。分配系數(shù)對(duì)于計(jì)算待分離物質(zhì)組分的保留時(shí)間有很重要的意義。2、分配色譜：分配色譜利用固定相與流動(dòng)相之間對(duì)待分離組分溶解度的差異來實(shí)現(xiàn)分離。分配色譜的固定相一般為液相的溶劑，依靠圖布、鍵合、吸附等手段分布于色譜柱或者擔(dān)體表