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1、綜合輔導(dǎo)藥分:色譜法綜合輔導(dǎo)藥分:色譜法第七章色譜法第一節(jié)概述色譜法:是一種物理或物理化學(xué)分離方法。用于定性鑒別、純度檢查、含量測(cè)定。分配系數(shù):組分在固定相和流動(dòng)相之間的分配平衡時(shí)的濃度之比。K=容量因子:又稱質(zhì)量分配系數(shù),即達(dá)到分配平衡后,組分在固定相和流動(dòng)相中的質(zhì)量之比。第二節(jié)薄層分析法一般指吸附薄層色譜法,固定相為吸附劑的薄層吸附法。K值越大隨展開(kāi)劑移動(dòng)的速度越慢。比移徝:在薄層色譜法中,組分的遷移距離()與展開(kāi)劑的遷移距離()之
2、比稱為比移值()。R最佳范圍是0.30.5,可用范圍是0.20.8。吸附劑:吸附薄層色譜法的固定相。常用吸附劑有:硅膠、氧化鋁、硅藻土、纖維素和聚酰胺。硅膠:在105110C加熱30分,使硅膠吸附力增加,稱為活化。具微酸性,適分離酸性中性物質(zhì)。氧化鋁:堿性、中性、酸性。中性用得多。制備薄層板:要求吸附劑涂布均勻表面光滑,使用前檢查均勻度。2000版用機(jī)械涂布法。活化。吸附劑與展開(kāi)劑的選擇:分離極性較強(qiáng)的組分時(shí),宜選用活性低(活度級(jí)別高)
3、的薄層板,以極性強(qiáng)的展開(kāi)劑展開(kāi)。反之點(diǎn)樣:體積宜在20ul以下,樣徑不超過(guò)23mm,點(diǎn)間距離為1.52.0cm,距底2.0cm。顯色方法:直接噴霧法、浸漬法、壓板法。定性分析方法、純度檢查、定量分析方法(洗脫測(cè)定法和直接測(cè)定法)。第三節(jié)氣相色譜法氣相色譜法:以氣體為流動(dòng)相的色譜法稱為氣相色譜法。不適用于難揮發(fā)和熱穩(wěn)定性差的物質(zhì)分析。原理:各組分在固定相與載氣(流動(dòng)相)間分配系數(shù)不等,按大小依次被載氣帶出色譜柱,小先流出。一、基極性的分子
4、型物質(zhì),用于含有不同官能團(tuán)物質(zhì)的分離。極性弱組分先流出反相色譜法:……………大于………………………用于分離非極性至中等極性的分子型化合物2、高效液相色譜儀:1、高壓輸液泵2、色譜柱3、進(jìn)樣閥4、檢測(cè)器:紫外吸收檢測(cè)器、熒光檢測(cè)器、差示折光檢測(cè)器、電化學(xué)檢測(cè)中國(guó)藥典2000對(duì)高效液相色譜法規(guī)定:除固定相種類、流動(dòng)相組分、檢測(cè)器類型不得任意更改外,其余均可適當(dāng)改變,色譜圖于20min內(nèi)記錄完畢。第5節(jié)色譜系統(tǒng)適用性試驗(yàn)和定量分析方法一、系統(tǒng)
5、適用性試驗(yàn)1、色譜柱的理論板數(shù):2、分離度:應(yīng)大于1.53、重復(fù)性3、拖尾聲因子:0.951.05之間二、定量測(cè)定法:1、內(nèi)標(biāo)法加較正因子測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量2、外標(biāo)法測(cè)定供試品中某個(gè)雜質(zhì)或主成分含量3、加較正因子的主成分自身對(duì)照法不加較正因子的主成分自身對(duì)照法第六節(jié)電泳法電泳法:在電場(chǎng)的作用下,依據(jù)各組分之間淌度的不同實(shí)現(xiàn)分離的方法。分離程度取決于淌度之差。一、基本原理:電泳遷移速度為:電泳淌度:電場(chǎng)強(qiáng)度影響電泳分離的條件
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