正相色譜和反向色譜及c18柱子

1、正相色譜和反向色譜及正相色譜和反向色譜及C18柱子柱子反相與正相的區(qū)別在于，固定相與流動相的極性大小。反相：固定相的極性小于流動相的極性正相：固定相的極性大于流動相的極性反向色譜流動相極性大于固定相極性測定樣品時極性大的先出峰，正向反之在正相色譜中，一般采用極性鍵合固定相，硅膠表面鍵合的是極性的有機基團，鍵合相的名稱由鍵合上去的基團而定。最常用的有氰基（CN）、氨基（NH2）、二醇基（DIOL）鍵合相。流動相一般用比鍵合相極性小的非極性

2、或弱極性有機溶劑，如烴類溶劑，或其中加入一定量的極性溶劑（如氯仿、醇、乙腈等），以調(diào)節(jié)流動相的洗脫強度。通常用于分離極性化合物。一般認為正相色譜的分離機制屬于分配色譜。組分的分配比K值，隨其極性的增加而增大，但隨流動相中極性調(diào)節(jié)劑的極性增大（或濃度增大）而降低。同時，極性鍵合相的極性越大，組分的保留值越大。該法主要用于分離異構(gòu)體，極性不同的化合物，特別是用來分離不同類型的化合物。反相鍵合相色譜法在反相色譜中，一般采用非極性鍵合固定相，如

3、硅膠C18H37（簡稱ODS或C18）硅膠苯基等，用強極性的溶劑為流動相，如甲醇水，乙腈水，水和無機鹽的緩沖液等。目前，對于反相色譜的保留機制還沒有一致的看法，大致有兩種觀商業(yè)名稱，本質(zhì)應(yīng)該都是一樣的。Merck公司的填料喜歡叫RP18。比如Merck的LiChrospherRP18，SuperspherRP18，PurospherRP18。因此，我認為說“RP18“是改進型的不妥當。Merck的改進表現(xiàn)在前邊的名字上比如LiCHros

4、pherSuperspherPurospher表現(xiàn)的是不同的性能C8是硅膠鍵合辛烷基，C18是硅膠鍵合十八烷基，C18的極性較C8的極性小，C18對分析物的保留性能強于C8，含碳量對分離效果和主要組分的保留時間起很大的影響，所以含碳量高，主要組分的保留時間越長。C8和C18都是反相色譜柱的一種，適用于分析弱極性的物質(zhì)，C8適合分析弱極性物質(zhì)里極性稍強的一類物質(zhì)，C18適合分析弱極性物質(zhì)里極性更弱的物質(zhì)。這是他們極性上的差別，但是差別并不

5、是特別明顯，一般能用C8分析的物質(zhì)，在C18上也能分離。C18比C8的碳鏈更長，因此帶來更好的保留特性。因此C8就更適合分析大分子類的物質(zhì)，比如一些球蛋白等，都用C8和緩沖鹽洗脫劑來配合使用。相反，分子量較小的物質(zhì)，經(jīng)常用C18來進行分析和分離。鍵合相不同，導(dǎo)致同種組分在不同色譜柱上的保留時間不一致，對各組分的保留能力也會不同，峰位置就變化啦。C18前面看到“ODS”的字樣，ODS是英文octadecylsilane的所寫，意思是十八(